中文摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 前言 | 第10-27页 |
1.1 水稻纹枯病 | 第10页 |
1.2 水稻纹枯病病原菌 | 第10-11页 |
1.3 水稻纹枯病发病情况 | 第11-13页 |
1.3.1 水稻纹枯病的发病症状 | 第11页 |
1.3.2 水稻纹枯病的病害循环 | 第11-12页 |
1.3.3 水稻纹枯病的致病机理 | 第12-13页 |
1.4 水稻纹枯病的病害防治以及抗性研究 | 第13-16页 |
1.4.1 水稻纹枯病的农业防治 | 第13-14页 |
1.4.2 水稻纹枯病的生物防治 | 第14页 |
1.4.3 水稻纹枯病的化学防治 | 第14-15页 |
1.4.4 水稻纹枯病抗性的遗传研究 | 第15-16页 |
1.5 植物启动子 | 第16-26页 |
1.5.1 植物启动子的基本结构和功能元件 | 第16-17页 |
1.5.1.1 启动子的基本结构 | 第16页 |
1.5.1.2 TATA-BOX | 第16-17页 |
1.5.1.3 起始因子 | 第17页 |
1.5.1.4 CAAT-BOX | 第17页 |
1.5.2 植物启动子的分类以及应用 | 第17-25页 |
1.5.2.1 组成型启动子 | 第18-19页 |
1.5.2.1.1 异源组成型启动子 | 第18页 |
1.5.2.1.2 来源于植物自身的组成型启动子 | 第18-19页 |
1.5.2.2 组织特异性启动子 | 第19-21页 |
1.5.2.2.1 根特异性启动子 | 第19-20页 |
1.5.2.2.2 茎特异性启动子 | 第20页 |
1.5.2.2.3 种子特异性启动子 | 第20页 |
1.5.2.2.4 果实特异性启动子 | 第20-21页 |
1.5.2.2.5 花特异性启动子 | 第21页 |
1.5.2.3 诱导型启动子 | 第21-25页 |
1.5.2.3.1 光诱导表达启动子 | 第22页 |
1.5.2.3.2 温度诱导表达启动子 | 第22-23页 |
1.5.2.3.3 创伤诱导表达启动子 | 第23页 |
1.5.2.3.4 激素诱导表达启动子 | 第23-24页 |
1.5.2.3.5 病原诱导表达启动子 | 第24-25页 |
1.5.3 启动子的研究方法 | 第25-26页 |
1.5.3.1 生物信息学分析 | 第25页 |
1.5.3.2 缺失分析法 | 第25-26页 |
1.5.3.3 瞬时表达分析 | 第26页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
2 实验材料和方法 | 第27-30页 |
2.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.1 使用菌株以及载体 | 第27页 |
2.1.2 材料处理方法 | 第27页 |
2.1.2.1 纹枯病菌的培养 | 第27页 |
2.1.2.2 常用酶与生化试剂 | 第27页 |
2.1.2.3 常用仪器 | 第27页 |
2.2 POs2H16启动子缺失表达载体构建 | 第27-30页 |
2.2.1 PCR引物设计 | 第27-28页 |
2.2.2 POs2H16启动子片段的扩增 | 第28页 |
2.2.3 启动子片段的切胶回收和酶切 | 第28页 |
2.2.4 空载体和目的片段的酶切纯化以及连接 | 第28-29页 |
2.2.5 感受态细胞的制备 | 第29页 |
2.2.6 热激转化大肠杆菌 | 第29页 |
2.2.7 质粒DNA的提取 | 第29页 |
2.2.8 电转化农杆菌感受态细胞 | 第29-30页 |
2.3 农杆菌介导的烟草瞬时表达转化 | 第30页 |
2.3.1 农杆菌的培养以及转化烟草 | 第30页 |
2.3.2 纹枯病菌YWK-196接种烟草 | 第30页 |
2.4 GFP的定性及定量分析 | 第30页 |
3 结果与分析 | 第30-40页 |
3.1 验证病源诱导区间-513到-411是否依赖于GT-1 起作用 | 第31-32页 |
3.1.1 POs2H16-513以及缺失GT-1 表达载体的构建 | 第31页 |
3.1.2 POs2H16-513以及缺失GT-1 表达载体烟草瞬时表达后对纹枯病的诱导情况 | 第31-32页 |
3.2 精确定位病原诱导元件的核心区域 | 第32-40页 |
3.2.1 POs2H16-513△GT-1 第一次截短载体构建 | 第32-33页 |
3.2.2 POs2H16-513△GT-1 第一次截短载体在烟草瞬时表达后对纹枯病的诱导反应 | 第33-34页 |
3.2.3 POs2H16-513△GT-1 第二次截短载体构建 | 第34-35页 |
3.2.4 POs2H16-513△GT-1 第二次截短载体在烟草瞬时表达后对纹枯病的诱导反应 | 第35-36页 |
3.2.5 POs2H16-513△GT-1 第三次截短载体构建 | 第36-37页 |
3.2.6 POs2H16-513△GT-1 第三截短片段在烟草瞬时表达后对纹枯病的诱导反应 | 第37-38页 |
3.2.7 AATCA元件多倍重复表达载体的构建 | 第38-39页 |
3.2.8 AATCA元件对纹枯病诱导活性的功能验证 | 第39-40页 |
4.讨论 | 第40页 |
5 结论 | 第40-42页 |
参考文献 | 第42-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
附录 | 第52-53页 |