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小反刍兽疫病毒GZL-14的分离鉴定与双抗体夹心ELISA方法的建立及应用

中文摘要第4-6页
abstract第6-7页
引言第12-14页
第1章 文献综述第14-28页
    1.1 PPR病原学概述第14-19页
        1.1.1 小反刍兽疫病毒分类第14页
        1.1.2 PPRV形态结构及易感细胞系第14-15页
        1.1.3 PPRV理化学特性第15页
        1.1.4 PPRV分子生物学特性第15-16页
        1.1.5 PPR的发生与传播第16-17页
        1.1.6 PPR临床症状与病理变化第17-19页
    1.2 小反刍兽疫的流行病学及防控第19-24页
        1.2.1 小反刍兽疫流行与分布第19-20页
        1.2.2 我国小反刍兽疫流行与分布第20-22页
        1.2.3 小反刍兽疫病毒(PPRV)流行基因系谱第22-23页
        1.2.4 小反刍兽疫防控第23-24页
    1.3 PPR的诊断方法研究第24-28页
        1.3.1 病毒分离与鉴定第25页
        1.3.2 免疫学诊断技术第25-26页
        1.3.3 聚合酶链式反应(PCR)第26-28页
第2章 疑似PPR病例的诊断与病原分离鉴定第28-46页
    2.1 材料第29-30页
        2.1.1 病料第29页
        2.1.2 细胞培养第29页
        2.1.3 分子生物学试剂第29页
        2.1.4 主要仪器第29-30页
        2.1.5 细胞培养等相关试剂配制第30页
    2.2 方法第30-34页
        2.2.1 小反刍兽疫病例临床诊断第30-31页
        2.2.2 病毒分离第31-32页
        2.2.3 病毒核酸序列测定与分析第32-33页
        2.2.4 GZL-14 毒株全基因序列比对分析第33-34页
    2.3 结果第34-44页
        2.3.1 流行病学调查结果第34-35页
        2.3.2 发病羊临床症状第35页
        2.3.3 病理剖检变化第35-36页
        2.3.4 组织病理学观察第36-37页
        2.3.5 病毒分离培养第37-38页
        2.3.6 病毒核酸序列的测定与分析第38-41页
        2.3.7 GZL-14 毒株全基因组序列比对分析结果第41-44页
    2.4 讨论第44-45页
    2.5 小结第45-46页
第3章 GZL14N蛋白基因的原核表达与纯化及特异性抗体的制备第46-58页
    3.1 材料第46-48页
        3.1.1 细胞、菌株和毒株第46页
        3.1.2 分子生物学试剂第46-47页
        3.1.3 主要实验仪器第47页
        3.1.4 相关溶液的配制第47页
        3.1.5 免疫实验动物第47-48页
    3.2 方法第48-52页
        3.2.1 GZL-14 病毒N结构蛋白抗原性分析与扩增第48-49页
        3.2.2 原核表达载体构建第49-51页
        3.2.3 重组蛋白的表达与纯化第51页
        3.2.4 兔抗PPRV-N的抗体制备第51-52页
    3.3 结果第52-56页
        3.3.1 N蛋白基因分析与扩增第52-53页
        3.3.2 目的基因原核表达载体构建第53-54页
        3.3.3 重组蛋白的表达与纯化第54-55页
        3.3.4 兔抗PPRV-N蛋白的抗体特异性第55-56页
    3.4 讨论第56页
    3.5 小结第56-58页
第4章 检测PPRV抗原双抗体夹心ELISA方法的建立与应用第58-68页
    4.1 材料第58-59页
        4.1.1 样品及来源第58-59页
        4.1.2 试剂与部分耗材第59页
        4.1.3 主要实验仪器第59页
        4.1.4 主要试剂配制第59页
    4.2 方法第59-61页
        4.2.1 兔抗PPRV-N IgG提取纯化第59页
        4.2.2 兔抗PPRV-N IgG的辣根过氧化物酶(HRP)标记第59-60页
        4.2.3 双抗体夹心ELISA方法的建立第60-61页
        4.2.4 双抗体夹心ELISA方法应用于PPRV流行病学调查第61页
    4.3 结果第61-65页
        4.3.1 兔抗PPRV-N IgG的辣根过氧化酶(HRP)标记第61-62页
        4.3.2 双抗体夹心ELISA方法的建立与条件的优化第62-65页
        4.3.3 吉林省及周边不同地区羊群PPRV感染的流行病学调查第65页
    4.4 讨论第65-67页
    4.5 小结第67-68页
结论第68-70页
参考文献第70-76页
导师简介第76-78页
作者简介及科研成果第78-80页
致谢第80页

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