中文摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
引言 | 第12-14页 |
第1章 文献综述 | 第14-28页 |
1.1 PPR病原学概述 | 第14-19页 |
1.1.1 小反刍兽疫病毒分类 | 第14页 |
1.1.2 PPRV形态结构及易感细胞系 | 第14-15页 |
1.1.3 PPRV理化学特性 | 第15页 |
1.1.4 PPRV分子生物学特性 | 第15-16页 |
1.1.5 PPR的发生与传播 | 第16-17页 |
1.1.6 PPR临床症状与病理变化 | 第17-19页 |
1.2 小反刍兽疫的流行病学及防控 | 第19-24页 |
1.2.1 小反刍兽疫流行与分布 | 第19-20页 |
1.2.2 我国小反刍兽疫流行与分布 | 第20-22页 |
1.2.3 小反刍兽疫病毒(PPRV)流行基因系谱 | 第22-23页 |
1.2.4 小反刍兽疫防控 | 第23-24页 |
1.3 PPR的诊断方法研究 | 第24-28页 |
1.3.1 病毒分离与鉴定 | 第25页 |
1.3.2 免疫学诊断技术 | 第25-26页 |
1.3.3 聚合酶链式反应(PCR) | 第26-28页 |
第2章 疑似PPR病例的诊断与病原分离鉴定 | 第28-46页 |
2.1 材料 | 第29-30页 |
2.1.1 病料 | 第29页 |
2.1.2 细胞培养 | 第29页 |
2.1.3 分子生物学试剂 | 第29页 |
2.1.4 主要仪器 | 第29-30页 |
2.1.5 细胞培养等相关试剂配制 | 第30页 |
2.2 方法 | 第30-34页 |
2.2.1 小反刍兽疫病例临床诊断 | 第30-31页 |
2.2.2 病毒分离 | 第31-32页 |
2.2.3 病毒核酸序列测定与分析 | 第32-33页 |
2.2.4 GZL-14 毒株全基因序列比对分析 | 第33-34页 |
2.3 结果 | 第34-44页 |
2.3.1 流行病学调查结果 | 第34-35页 |
2.3.2 发病羊临床症状 | 第35页 |
2.3.3 病理剖检变化 | 第35-36页 |
2.3.4 组织病理学观察 | 第36-37页 |
2.3.5 病毒分离培养 | 第37-38页 |
2.3.6 病毒核酸序列的测定与分析 | 第38-41页 |
2.3.7 GZL-14 毒株全基因组序列比对分析结果 | 第41-44页 |
2.4 讨论 | 第44-45页 |
2.5 小结 | 第45-46页 |
第3章 GZL14N蛋白基因的原核表达与纯化及特异性抗体的制备 | 第46-58页 |
3.1 材料 | 第46-48页 |
3.1.1 细胞、菌株和毒株 | 第46页 |
3.1.2 分子生物学试剂 | 第46-47页 |
3.1.3 主要实验仪器 | 第47页 |
3.1.4 相关溶液的配制 | 第47页 |
3.1.5 免疫实验动物 | 第47-48页 |
3.2 方法 | 第48-52页 |
3.2.1 GZL-14 病毒N结构蛋白抗原性分析与扩增 | 第48-49页 |
3.2.2 原核表达载体构建 | 第49-51页 |
3.2.3 重组蛋白的表达与纯化 | 第51页 |
3.2.4 兔抗PPRV-N的抗体制备 | 第51-52页 |
3.3 结果 | 第52-56页 |
3.3.1 N蛋白基因分析与扩增 | 第52-53页 |
3.3.2 目的基因原核表达载体构建 | 第53-54页 |
3.3.3 重组蛋白的表达与纯化 | 第54-55页 |
3.3.4 兔抗PPRV-N蛋白的抗体特异性 | 第55-56页 |
3.4 讨论 | 第56页 |
3.5 小结 | 第56-58页 |
第4章 检测PPRV抗原双抗体夹心ELISA方法的建立与应用 | 第58-68页 |
4.1 材料 | 第58-59页 |
4.1.1 样品及来源 | 第58-59页 |
4.1.2 试剂与部分耗材 | 第59页 |
4.1.3 主要实验仪器 | 第59页 |
4.1.4 主要试剂配制 | 第59页 |
4.2 方法 | 第59-61页 |
4.2.1 兔抗PPRV-N IgG提取纯化 | 第59页 |
4.2.2 兔抗PPRV-N IgG的辣根过氧化物酶(HRP)标记 | 第59-60页 |
4.2.3 双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第60-61页 |
4.2.4 双抗体夹心ELISA方法应用于PPRV流行病学调查 | 第61页 |
4.3 结果 | 第61-65页 |
4.3.1 兔抗PPRV-N IgG的辣根过氧化酶(HRP)标记 | 第61-62页 |
4.3.2 双抗体夹心ELISA方法的建立与条件的优化 | 第62-65页 |
4.3.3 吉林省及周边不同地区羊群PPRV感染的流行病学调查 | 第65页 |
4.4 讨论 | 第65-67页 |
4.5 小结 | 第67-68页 |
结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
导师简介 | 第76-78页 |
作者简介及科研成果 | 第78-80页 |
致谢 | 第80页 |