| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略语表 | 第13-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-37页 |
| 1.1 假单胞菌研究进展 | 第15-22页 |
| 1.1.1 恶臭假单胞菌 | 第15-16页 |
| 1.1.2 铜绿假单胞菌 | 第16-17页 |
| 1.1.3 丁香假单胞菌 | 第17-18页 |
| 1.1.4 荧光假单胞菌 | 第18-19页 |
| 1.1.5 假单胞菌遗传操作技术的发展 | 第19-22页 |
| 1.2 Red/ET重组工程 | 第22-35页 |
| 1.2.1 Red/ET重组工程简介 | 第22-23页 |
| 1.2.2 Red/ET重组工程的工作原理 | 第23-26页 |
| 1.2.3 Red/ET重组工程的操作步骤 | 第26-27页 |
| 1.2.4 Red/ET重组技术改进 | 第27-30页 |
| 1.2.5 Red/ET重组技术与其他基因操作方法的结合 | 第30-32页 |
| 1.2.6 Red/ET重组技术的应用 | 第32-35页 |
| 1.3 立题依据和意义 | 第35-36页 |
| 1.4 技术路线 | 第36-37页 |
| 第二章 假单胞菌中Red/ET重组系统的构建和基因修饰 | 第37-61页 |
| 2.1 实验材料 | 第38-43页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第38-39页 |
| 2.1.2 培养基和抗生素 | 第39-40页 |
| 2.1.3 寡核苷酸合成和DNA测序 | 第40-41页 |
| 2.1.4 试剂 | 第41-42页 |
| 2.1.5 实验仪器 | 第42-43页 |
| 2.1.6 分析软件 | 第43页 |
| 2.2 实验方法 | 第43-46页 |
| 2.2.1 PCR扩增 | 第43-44页 |
| 2.2.2 菌落PCR | 第44页 |
| 2.2.3 大肠杆菌电转化 | 第44-45页 |
| 2.2.4 大肠杆菌中质粒的小量提取和酶切鉴定 | 第45页 |
| 2.2.5 诱导表达位点特异性重组酶 | 第45-46页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第46-59页 |
| 2.3.1 搜索具有潜在重组功能的核酸外切酶-重组酶 | 第46-47页 |
| 2.3.2 构建一系列的重组系统 | 第47-48页 |
| 2.3.3 假单胞菌中不同重组系统的效率比较 | 第48-51页 |
| 2.3.4 假单胞菌中重组系统工作条件的优化 | 第51-54页 |
| 2.3.5 利用新型重组系统在假单胞菌中进行遗传修饰 | 第54-56页 |
| 2.3.6 SSB蛋白对重组效率的影响 | 第56-59页 |
| 2.4 讨论 | 第59-61页 |
| 全文总结与展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-72页 |
| 致谢 | 第72-74页 |
| 攻读学位期间参与的学术会议 | 第74页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第74-75页 |
| 学位论文评阅及答辩情况 | 第75页 |
