| 符号说明 | 第5-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第14-27页 |
| 1.1 花生产业发展现状 | 第14-18页 |
| 1.1.1 花生高油育种研究 | 第15-16页 |
| 1.1.2 提高花生含油量的途径 | 第16-17页 |
| 1.1.3 抑制油脂合成竞争路径可提高花生含油量 | 第17-18页 |
| 1.2 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（PEPC）研究进展 | 第18-20页 |
| 1.2.1 PEPC的特性 | 第18页 |
| 1.2.2 PEPC的功能 | 第18-19页 |
| 1.2.3 PEPC的基因工程 | 第19-20页 |
| 1.3 花生遗传转化的研究 | 第20-23页 |
| 1.3.1 农杆菌介导的转化 | 第21-22页 |
| 1.3.2 基因枪介导的转化 | 第22-23页 |
| 1.4 反义RNA技术在植物基因工程中的应用 | 第23-24页 |
| 1.4.1 油料作物种子中脂肪酸合成的调控 | 第23页 |
| 1.4.2 果实成熟过程的调控 | 第23-24页 |
| 1.4.3 提高植物抗病性 | 第24页 |
| 1.4.4 花卉颜色控制方面 | 第24页 |
| 1.5 转录组测序在植物科学研究中的应用 | 第24-26页 |
| 1.6 本研究的目的意义 | 第26-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-41页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第27页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第27页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.5 PCR引物和测序 | 第28页 |
| 2.1.6 分析软件及网站 | 第28页 |
| 2.2 试验方法 | 第28-41页 |
| 2.2.1 基因的克隆与表达 | 第28-35页 |
| 2.2.1.1 大肠杆菌的培养和保存 | 第28页 |
| 2.2.1.2 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第28-29页 |
| 2.2.1.3 质粒提取 | 第29-30页 |
| 2.2.1.4 DNA电泳 | 第30页 |
| 2.2.1.5 凝胶回收 | 第30页 |
| 2.2.1.6 重组质粒的筛选、鉴定和保存 | 第30-31页 |
| 2.2.1.7 花生总DNA提取 | 第31页 |
| 2.2.1.8 花生总RNA的提取 | 第31-32页 |
| 2.2.1.9 普通反转录第一链cDNA的合成 | 第32-33页 |
| 2.2.1.10 荧光定量反转录cDNA的合成 | 第33页 |
| 2.2.1.11 AhPEPCs基因组织表达和胁迫条件下的表达分析 | 第33-34页 |
| 2.2.1.12 AhPEPCs基因原核表达载体构建和融合蛋白的诱导表达 | 第34-35页 |
| 2.2.2 AhPEPC1基因在花生中的遗传转化及功能鉴定 | 第35-39页 |
| 2.2.2.1 AhPEPC1基因反义表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 2.2.2.2 农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第36-37页 |
| 2.2.2.3 根癌农杆菌介导的花生转化 | 第37-38页 |
| 2.2.2.4 基因组PCR鉴定转基因花生阳性植株 | 第38页 |
| 2.2.2.5 转基因花生表型鉴定 | 第38-39页 |
| 2.2.3 转录组测序 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-78页 |
| 3.1 花生PEPC家族基因的生物信息学分析 | 第41-45页 |
| 3.1.1 花生PEPC基因的序列分析 | 第41-42页 |
| 3.1.2 花生PEPC基因结构和染色体定位 | 第42-45页 |
| 3.2 花生PEPC基因的表达模式分析 | 第45-53页 |
| 3.2.1 不同时空表达模式分析 | 第45-46页 |
| 3.2.2 非生物胁迫下的表达模式分析 | 第46-52页 |
| 3.2.3 PEPC融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达分析 | 第52-53页 |
| 3.3 AhPEPC1基因在花生中的遗传转化及功能鉴定 | 第53-62页 |
| 3.3.1 AhPEPC1基因反义表达载体的构建 | 第53-54页 |
| 3.3.2 花生的遗传转化及抗性植株筛选 | 第54-57页 |
| 3.3.3 转化植株PCR鉴定及转基因阳性植株的获得 | 第57页 |
| 3.3.4 转基因花生T3代植株的分子鉴定及表型观察 | 第57-62页 |
| 3.4 转基因花生的RNA-Seq测序及分析 | 第62-78页 |
| 3.4.1 测序数据质量统计 | 第62-64页 |
| 3.4.2 参考序列比对分析 | 第64-65页 |
| 3.4.3 可变剪切分析 | 第65-66页 |
| 3.4.4 基因表达水平分析 | 第66-70页 |
| 3.4.5 差异基因GO富集分析 | 第70页 |
| 3.4.6 差异基因KEGG富集分析 | 第70-73页 |
| 3.4.7 转录组数据验证 | 第73-78页 |
| 4 讨论 | 第78-82页 |
| 4.1 花生PEPC家族基因的序列分析与特性 | 第78页 |
| 4.2 花生PEPC家族5个基因的表达模式呈现多样性 | 第78-79页 |
| 4.3 AhPEPC1基因的抑制表达对花生的影响 | 第79-80页 |
| 4.4 转基因花生的RNA-Seq测序及分析 | 第80-82页 |
| 5 结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-95页 |
| 致谢 | 第95-96页 |
| 攻读学位期间论文情况 | 第96页 |
