鼠源抗2型单纯疱疹病毒gB蛋白噬菌体单链抗体库的构建及特异性抗体筛选
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-28页 |
| ·单纯疱疹病毒 | 第11-13页 |
| ·单纯疱疹病毒简介 | 第11页 |
| ·单纯疱疹病毒的感染状况 | 第11-12页 |
| ·单纯疱疹病毒治疗状况 | 第12-13页 |
| ·基因工程抗体 | 第13-16页 |
| ·基因工程抗体的发展 | 第13页 |
| ·基因工程抗体的类型 | 第13-15页 |
| ·基因工程抗体的优点 | 第15页 |
| ·单链抗体的应用 | 第15-16页 |
| ·抗体库构建与筛选 | 第16-23页 |
| ·抗体库种类 | 第17-18页 |
| ·抗体库展示技术 | 第18-20页 |
| ·噬菌体抗体库的构建 | 第20-21页 |
| ·抗体库筛选技术 | 第21-23页 |
| ·抗体药物的发展状况 | 第23-25页 |
| ·抗体药物的诞生与发展 | 第23-24页 |
| ·国外抗体药物状况 | 第24页 |
| ·国内抗体药物状况 | 第24-25页 |
| ·研究目的意义和研究内容 | 第25-28页 |
| ·研究目的 | 第25页 |
| ·研究意义 | 第25页 |
| ·研究内容 | 第25-27页 |
| ·技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 抗HSV2-gB蛋白噬菌体抗体库的构建 | 第28-48页 |
| ·前言 | 第28页 |
| ·实验材料 | 第28-33页 |
| ·噬粒载体、噬菌体、菌株等 | 第28-30页 |
| ·主要仪器和设备 | 第30页 |
| ·主要试剂耗材 | 第30-33页 |
| ·实验方法 | 第33-41页 |
| ·总RNA的提取与mRNA的纯化 | 第33-34页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第34页 |
| ·PCR扩增抗体的重链和轻链可变区片段 | 第34-35页 |
| ·重链和轻链可变区片段与Linker的连接 | 第35-37页 |
| ·ScFv基因和噬粒载体的连接 | 第37-39页 |
| ·电感受态Ecoli TG1的制备 | 第39页 |
| ·辅助噬菌体M13KO7储液的制备 | 第39-40页 |
| ·噬菌体抗体库的构建 | 第40-41页 |
| ·实验结果 | 第41-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第41页 |
| ·抗体可变区基因及ScFv基因的扩增 | 第41-43页 |
| ·文库的重组率鉴定及多样性分析 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-47页 |
| ·本章小结 | 第47-48页 |
| 第三章 噬菌体抗体库抗HSV-gB抗体筛选及鉴定 | 第48-62页 |
| ·前言 | 第48页 |
| ·实验材料 | 第48-51页 |
| ·细胞株、HSV病毒等 | 第48页 |
| ·主要仪器和设备 | 第48-49页 |
| ·主要试剂耗材 | 第49-51页 |
| ·实验方法 | 第51-54页 |
| ·噬菌体抗体库的富集筛选 | 第51-52页 |
| ·ELISA法鉴定阳性克隆 | 第52-53页 |
| ·阳性克隆序列测定分析 | 第53页 |
| ·HSV2病毒攻击中和试验 | 第53-54页 |
| ·Western Blot分析 | 第54页 |
| ·非竞争性酶联免疫法亲和力测定 | 第54页 |
| ·实验结果 | 第54-59页 |
| ·噬菌体抗体库的富集 | 第54-56页 |
| ·阳性克隆的序列分析 | 第56-57页 |
| ·阳性克隆病毒中和能力的检测 | 第57-58页 |
| ·Western Blot分析 | 第58页 |
| ·单链抗体的亲和力测定 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·本章小结 | 第60-62页 |
| 第四章 结论及后续工作 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第62页 |
| ·后续的工作与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
