| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1. 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1. WRKY转录因子的研究 | 第9-19页 |
| 1.1.1. WRKY转录因子的起源与进化 | 第9-10页 |
| 1.1.2. WRKY转录因子的结构特点 | 第10-11页 |
| 1.1.3. WRKY转录因子的功能特点 | 第11-18页 |
| 1.1.4. 烟草WRKY转录因子的研究 | 第18-19页 |
| 1.2. 研究的目的与意义 | 第19-21页 |
| 1.2.1. 研究目的与意义 | 第19-20页 |
| 1.2.2. 技术路线 | 第20-21页 |
| 2. 实验材料与方法 | 第21-33页 |
| 2.1. 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1. 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2. 菌株与载体 | 第21页 |
| 2.1.3. 仪器设备 | 第21页 |
| 2.1.4. 试剂 | 第21页 |
| 2.1.5. 所需溶液 | 第21-22页 |
| 2.1.6. 培养基 | 第22-23页 |
| 2.1.7. 试验用引物 | 第23页 |
| 2.2. 试验方法 | 第23-33页 |
| 2.2.1. 材料培养 | 第23页 |
| 2.2.2. 材料处理 | 第23-25页 |
| 2.2.3. DNase消化处理RNA | 第25页 |
| 2.2.4. cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
| 2.2.5. Real-time PCR检测 | 第26-27页 |
| 2.2.6. PCR反应 | 第27-28页 |
| 2.2.7. 酶切 | 第28页 |
| 2.2.8. 产物的纯化回收 | 第28-29页 |
| 2.2.9. 连接 | 第29页 |
| 2.2.10. T-A克隆 | 第29-30页 |
| 2.2.11. 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第30页 |
| 2.2.12. 阳性克隆筛选 | 第30页 |
| 2.2.13. 质粒DNA小量提取 | 第30页 |
| 2.2.14. 酵母菌感受态细胞的制备与转化 | 第30-31页 |
| 2.2.15. 酵母自激活检测 | 第31页 |
| 2.2.16. 农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第31-32页 |
| 2.2.17. 农杆菌介导的NtWRKY8蛋白在洋葱表皮细胞的定位观察 | 第32-33页 |
| 3. 结果与分析 | 第33-44页 |
| 3.1. 烟草总RNA提取 | 第33页 |
| 3.1.1. 烟草总RNA提取结果 | 第33页 |
| 3.2. NtWRKY8基因的生物信息学分析 | 第33-37页 |
| 3.2.1. NtWRKY8基因的序列分析 | 第34-35页 |
| 3.2.2. NtWRKY8蛋白的理化性质分析 | 第35-37页 |
| 3.2.3. NtWRKY8蛋白的进化分析 | 第37页 |
| 3.3. NtWRKY8基因表达特性研究 | 第37-42页 |
| 3.3.1. NtWRKY8基因的组织表达特性 | 第37-38页 |
| 3.3.2. NtWRKY8基因高盐胁迫诱导的表达特性 | 第38页 |
| 3.3.3. NtWRKY8基因低温胁迫诱导的表达特性 | 第38-39页 |
| 3.3.4. NtWRKY8基因高温胁迫诱导表达的特性 | 第39页 |
| 3.3.5. NtWRKY8基因干旱胁迫诱导表达的特性 | 第39-40页 |
| 3.3.6. NtWRKY8基因受植物激素诱导表达的特性 | 第40-42页 |
| 3.4. NtWRKY8蛋白的转录自激活检测 | 第42-43页 |
| 3.5. NtWRKY8蛋白的洋葱表皮细胞亚细胞定位 | 第43-44页 |
| 4. 讨论 | 第44-49页 |
| 4.1. NtWRKY8蛋白是WRKY家族的新成员 | 第45页 |
| 4.2. NtWRKY8基因的表达受生物/非生物胁迫应答的调控 | 第45-48页 |
| 4.3. NtWRKY8蛋白具有转录激活特性 | 第48页 |
| 4.4. NtWRKY8蛋白定位在细胞核 | 第48-49页 |
| 5. 结论及下一步工作计划 | 第49-50页 |
| 5.1. 结论 | 第49页 |
| 5.2. 下一步工作计划 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 附录 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
