| 中文摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 一、试剂与材料 | 第12-16页 |
| 1.1 细胞株 | 第12页 |
| 1.2 组织样本 | 第12页 |
| 1.3 质粒 | 第12页 |
| 1.4 试剂 | 第12-13页 |
| 1.5 主要仪器设备 | 第13-14页 |
| 1.6 主要溶液配制 | 第14-16页 |
| 二、实验方法 | 第16-25页 |
| 2.1 细胞培养 | 第16页 |
| 2.2 MIRNA芯片分析以及生物信息学分析 | 第16页 |
| 2.3 细胞转染 | 第16-17页 |
| 2.4 质粒构建 | 第17-18页 |
| 2.5 实时荧光定量PCR | 第18-20页 |
| 2.6 蛋白质免疫印迹 | 第20-21页 |
| 2.7 双荧光素酶系统基因活性测定 | 第21-22页 |
| 2.8 流式细胞术 | 第22页 |
| 2.9 酶联免疫法ELISA | 第22-23页 |
| 2.10 细胞活性检测MTT | 第23页 |
| 2.11 裸鼠移植瘤实验 | 第23-24页 |
| 2.12 免疫组化 | 第24页 |
| 2.13 免疫荧光 | 第24页 |
| 2.14 统计学处理 | 第24-25页 |
| 三、实验结果 | 第25-41页 |
| 3.1 结直肠癌中TGF-B1, B7-H3和B7-H4的表达 | 第25-27页 |
| 3.2 TGF-B1对负性共刺激分子B7-H3和B7-H4表达的影响 | 第27-28页 |
| 3.3 结直肠癌中异常表达的MIRNAs | 第28-30页 |
| 3.4 TGF-B1通过SMAD3和SMAD4来上调MIR-155的表达 | 第30-32页 |
| 3.5 MIR-155通过抑制CEBPB下调MrR-143的表达 | 第32-34页 |
| 3.6 MIR-143在结直肠癌细胞中抑制B7-H3和B7-H4的表达 | 第34-37页 |
| 3.7 B7-H3和B7-H4刺激T细胞分泌细胞因子维持肿瘤免疫抑制微环境 | 第37-38页 |
| 3.8 MIR-143对结直肠癌细胞HCT-116的体内外抑制作用 | 第38-41页 |
| 四、讨论 | 第41-44页 |
| 总结与展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 综述:负性协同刺激分子B7-H3和B7-H4及其在结直肠癌中的作用 | 第50-60页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 缩写词表 | 第60-61页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61-63页 |
| 本研究所获的基金资助 | 第63-64页 |
| 附录表 | 第64-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
