| 中文摘要 | 第11-12页 |
| ABSTRACT | 第12-13页 |
| 第一章 综述 | 第14-21页 |
| 1.1 蜡质的合成途径 | 第14-16页 |
| 1.1.1 C16和C18脂肪酸的合成 | 第14-15页 |
| 1.1.2 脂肪酸的延神及各种衍生物的合成 | 第15-16页 |
| 1.2 蜡质的分泌途径 | 第16-18页 |
| 1.2.1 脂肪酸(C16或C18)从质体到内质网的运输途径 | 第17页 |
| 1.2.2 VLCFAs从内质网到质膜的运输途径 | 第17页 |
| 1.2.3 VLCFAs从质膜到质体外的运输途径 | 第17页 |
| 1.2.4 VLCFAs跨细胞壁到表皮角质层的运输途径 | 第17-18页 |
| 1.3 蜡质相关基因的研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4 本实验的研究内容及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 大葱生理特性的初步研究 | 第21-25页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第21页 |
| 2.1.1 材料 | 第21页 |
| 2.1.2 试剂和仪器 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-22页 |
| 2.2.1 扫描电镜观察 | 第21页 |
| 2.2.2 株高与茎粗 | 第21页 |
| 2.2.3 叶绿素浸提率测定 | 第21页 |
| 2.2.4 光合速率、蒸腾速率的测定 | 第21-22页 |
| 2.2.5 相对面积上的气孔数 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-24页 |
| 2.3.1 观察表皮蜡质晶体 | 第22页 |
| 2.3.2 植株性状比较 | 第22-23页 |
| 2.3.3 净光合速率 | 第23页 |
| 2.3.4 蒸腾速率 | 第23页 |
| 2.3.5 单位面积上的气孔数 | 第23-24页 |
| 2.4 讨论 | 第24-25页 |
| 第三章 大葱AfCER1基因的克隆与表达分析 | 第25-40页 |
| 3.1 材料与方法 | 第25-26页 |
| 3.1.1 材料 | 第25-26页 |
| 3.1.2 试剂和仪器 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-30页 |
| 3.2.1 RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 3.2.2 RACE获得目的基因3'端cDNA序列 | 第28页 |
| 3.2.3 RACE获得目的基因5'端cDNA序列 | 第28页 |
| 3.2.4 比对同源蛋白序列和构建系统进化树 | 第28-29页 |
| 3.2.5 生物信息学分析氨基酸序列及蛋白结构 | 第29页 |
| 3.2.6 RT-PCR和Real-time PCR分析目的基因的空间表达模式 | 第29-30页 |
| 3.3 AfCER1基因的克隆与表达分析 | 第30-38页 |
| 3.3.1 AfCER1序列及其分析 | 第30页 |
| 3.3.2 蛋白序列比对及其系统进化分析 | 第30-34页 |
| 3.3.3 AfCER1的结构分析 | 第34-37页 |
| 3.3.4 AfCER1基因在大葱不同部位的表达分析 | 第37页 |
| 3.3.5 AfCER1在大葱中的空间表达模式 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-40页 |
| 3.4.1 AfCER1可能是整合膜蛋白 | 第38-39页 |
| 3.4.2 AfCER1可能影响大葱表皮蜡质的积累 | 第39-40页 |
| 第四章 大葱AfKCS6基因的克隆与表达分析 | 第40-52页 |
| 4.1 材料与方法 | 第40页 |
| 4.1.1 材料 | 第40页 |
| 4.1.2 试剂和仪器 | 第40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-42页 |
| 4.2.1 RNA的提取及第一链cDNA的合成 | 第40页 |
| 4.2.2 RACE获得目的基因3'端cDNA序列 | 第40-41页 |
| 4.2.3 RACE获得目的基因5'端cDNA序列 | 第41页 |
| 4.2.4 比对同源蛋白序列和构建系统进化树 | 第41页 |
| 4.2.5 生物信息学分析氨基酸序列及蛋白结构 | 第41页 |
| 4.2.6 RT-PCR和Real-time PCR分析目的基因的空间表达模式 | 第41-42页 |
| 4.3 AfKCS6基因的克隆与表达分析 | 第42-51页 |
| 4.3.1 AfKCS6序列及其分析 | 第42-44页 |
| 4.3.2 蛋白序列比对及其系统进化分析 | 第44-46页 |
| 4.3.3 AfKCS6的结构分析 | 第46-49页 |
| 4.3.4 AfKCS6基因在大葱不同部位的表达分析 | 第49-50页 |
| 4.3.5 AfKCS6在大葱中的空间表达模式 | 第50-51页 |
| 4.4 讨论 | 第51-52页 |
| 第五章 PET28a—AfKCS6原核表达载体的构建和AfKCS6的表达 | 第52-58页 |
| 5.1 材料和试剂 | 第52页 |
| 5.1.1 菌体和载体 | 第52页 |
| 5.1.2 试剂和仪器 | 第52页 |
| 5.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 5.2.1 将目的片段连接到T载体PTOPO | 第52页 |
| 5.2.2 双酶切PET28a和PTOPO—AfKCS6 | 第52-53页 |
| 5.2.3 PET28a与目的基因连接、转化、鉴定 | 第53-54页 |
| 5.2.4 正确的重组子转化至BL21(DE3)菌株 | 第54页 |
| 5.2.5 目的基因的诱导表达 | 第54页 |
| 5.2.6 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第54-55页 |
| 5.3 结果与分析 | 第55-57页 |
| 5.3.1 获得目的基因 | 第55-56页 |
| 5.3.2 双酶切PET28a和PTOPO—AfKCS6 | 第56页 |
| 5.3.3 PET28a与目的基因连接、转化、鉴定 | 第56-57页 |
| 5.3.4 AfKCS6的表达 | 第57页 |
| 5.4 讨论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 个人简况及联系方式 | 第69-71页 |
