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抗RSV转基因水稻中外源基因的染色体定位及其对水稻基因表达的影响

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-22页
   ·转基因作物的安全性第12-15页
     ·转基因作物第12页
     ·转基因作物的安全评价第12-15页
       ·分子特征第12-13页
       ·遗传稳定性第13-14页
       ·环境安全性第14页
       ·食品安全性第14-15页
   ·转基因水稻研究进展第15-17页
     ·抗病毒转基因水稻第16页
     ·转基因水稻中的外源基因第16-17页
   ·转基因植物中侧翼序列获得方法的研究第17-20页
     ·HiTail-PCR第17-18页
     ·反向PCR第18-19页
     ·Genome walking第19-20页
   ·基因表达差异的分析第20-21页
     ·数字基因表达谱测序第20-21页
     ·Swath测序第21页
   ·本课题的目的和意义第21-22页
2 材料与方法第22-32页
   ·材料第22-23页
     ·转基因材料第22页
     ·非转基因材料第22页
     ·菌株与质粒第22页
     ·酶和生化试剂第22页
     ·引物第22-23页
   ·实验方法第23-32页
     ·植物总DNA的提取(CTAB法)第23-24页
     ·转基因植株的PCR检测第24页
     ·转基因植物的Southern blot分析第24-27页
       ·植物总DNA的酶切第24页
       ·DNA凝胶电泳第24-25页
       ·转膜第25页
       ·探针标记(随机引物法)第25页
       ·预杂交与杂交第25-26页
       ·洗膜与显影第26-27页
     ·HiTail-PCR获得侧翼序列第27-28页
     ·Genome walking方法获得侧翼序列第28-32页
       ·预酶切第28-29页
       ·酶切第29页
       ·纯化酶切后的DNA第29页
       ·连接接头第29-30页
       ·初步PCR第30页
       ·第二步PCR第30-32页
3 结果与分析第32-52页
   ·确定实验材料目的基因的拷贝数第32页
   ·KRSV-1 插入的T-DNA的染色体定位第32-38页
     ·KRSV-1 插入的T-DNA右边界侧翼序列的获得第32-35页
       ·HiTail-PCR的方法获得侧翼序列第32-34页
       ·普通PCR验证获得的侧翼序列第34-35页
     ·KRSV-1 插入的T-DNA左边界侧翼序列的获得第35-38页
       ·HiTail-PCR的方法获得侧翼序列第35-36页
       ·Genome Walking的方法获得侧翼序列第36-38页
   ·T-DNA在水稻基因组中插入位点的鉴定第38-46页
     ·T-DNA右边界侧翼序列向水稻基因方向的探究第38-45页
     ·T-DNA左边界侧翼序列向水稻基因方向的探究第45页
     ·T-DNA在转基因水稻KRSV-1 基因组中整合方式的分析第45-46页
   ·水稻的数字基因表达谱测序分析第46-48页
     ·数字基因表达谱测序结果的获得第46页
     ·数字基因表达谱测序结果的分析第46-48页
   ·Swath测序分析第48-52页
     ·Swath测序结果的获得第48页
     ·Swath测序结果的分析第48-52页
4 讨论第52-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-60页
致谢第60页

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