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双亲基因载体的构筑及在增强内皮细胞转染效率方面的研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-13页
前言第13-16页
第一章 文献综述第16-42页
   ·心血管疾病的治疗及主要存在问题第16页
   ·人工血管材料及其改性第16-18页
     ·人工血管材料第17页
     ·人工血管材料表面改性第17-18页
   ·基因治疗促进人工血管内皮化第18-35页
     ·目的基因或目的因子第18-22页
       ·成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)第18-19页
       ·血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)第19-21页
       ·VEGF基因第21页
       ·ZNF580基因第21-22页
     ·阳离子型传送载体第22-35页
       ·脂质体第23-25页
       ·PEI第25-27页
       ·PEI类聚阳离子第27-29页
       ·阳离子型的树枝化聚合物第29-31页
       ·阳离子型多糖第31-33页
       ·两性离子类的阳离子聚合物第33-35页
       ·其他类载体第35页
   ·靶向基因治疗促进人工血管内皮化第35-39页
     ·内皮细胞的特异性识别作用第35-36页
     ·多肽及多肽修饰的基因载体在促进血管内皮化方面的应用第36-39页
       ·RGD多肽类物质在促进血管内皮化方面的应用第36页
       ·YIGSR多肽在促进血管内皮化方面的应用第36-38页
       ·REDV多肽在促进血管内皮化方面的应用第38页
       ·CAG多肽在促进血管内皮化方面的应用第38-39页
   ·立题背景、研究内容和创新点第39-42页
     ·立题背景第39-40页
     ·研究内容第40-41页
     ·创新点第41-42页
第二章 不同分子量的阳离子基因载体的制备及其基因递送能力考察第42-61页
   ·引言第42-43页
   ·实验部分第43-48页
     ·主要试剂和原料第43-45页
     ·主要实验仪器第45页
     ·PHEMA的合成第45-46页
     ·PHEMA-PLA的合成第46页
     ·羧基化的PHEMA-PLA的合成第46页
     ·不同分子量的PHEMA-PLA-PEG-PEI聚合物的合成及其纳米粒的制备第46-47页
     ·四种pEGFP-ZNF580基因复合物的制备第47页
     ·琼脂糖凝胶电泳实验第47页
     ·细胞存活率考察第47-48页
     ·体外转染实验第48页
   ·结果与讨论第48-60页
     ·PHEMA-PLA-PEG-PEI聚合物的合成及表征第48-53页
     ·纳米粒的尺寸和形貌第53-55页
     ·纳米复合物的尺寸和形貌第55-56页
     ·凝胶电泳第56-57页
     ·细胞存活率考察第57-59页
     ·体外转染实验第59-60页
   ·本章小结第60-61页
第三章 REDV多肽修饰的聚阳离子基因载体的制备及应用第61-86页
   ·引言第61-63页
   ·实验部分第63-68页
     ·主要试剂和原料第63-64页
     ·主要实验仪器第64页
     ·mPEG-P(LA-co-CL) 共聚物的合成第64页
     ·mPEG-P(LA-co-CL)-COOH共聚物的合成第64页
     ·mPEG-P(LA-co-CL)-PEI共聚物的合成第64-65页
     ·mPEG-P(LA-co-CL)-PEI-REDV共聚物的合成第65页
     ·纳米粒及复合物的制备第65页
     ·凝胶电泳第65页
     ·pEGFP-ZNF580基因在复合物中的稳定性测定实验第65-66页
     ·MTT毒性实验第66页
     ·体外转染实验第66-67页
     ·Western blot实验第67页
     ·划痕实验第67-68页
   ·结果与讨论第68-84页
     ·mPEG-P(LA-co-CL)-PEI-REDV聚合物的合成及表征第68-72页
     ·纳米粒及其复合物的尺寸和形貌第72-73页
     ·REDV-NP及其复合物的流体力学直径和zeta电位值第73-76页
     ·凝胶电泳阻滞实验第76-77页
     ·pEGFP-ZNF580基因在复合物中的稳定性实验第77-78页
     ·不同复合物对细胞相对存活率的影响第78-80页
     ·体外转染和蛋白分析第80-82页
     ·细胞划痕第82-84页
   ·本章小结第84-86页
第四章 REDV多肽修饰的双亲梳型基因载体的制备及基因递送能力考察第86-109页
   ·引言第86-88页
   ·实验部分第88-93页
     ·主要试剂和原料第88页
     ·主要实验仪器第88-89页
     ·PHEMA的合成第89页
     ·PHEMA-PCL的合成第89页
     ·PHEMA-PCL-COOH的合成第89页
     ·PHEMA-PCL-PEG-PEI的合成第89-90页
     ·PHEMA-PCL-PEG-PEI-REDV的合成第90页
     ·聚合物纳米粒及基因复合物的制备第90页
     ·凝胶电泳实验第90-91页
     ·pEGFP-ZNF580基因在复合物中的稳定性实验第91页
     ·MTT毒性实验第91-92页
     ·体外转染实验第92页
     ·Western blot实验第92-93页
   ·结果与讨论第93-107页
     ·PHEMA-PCL-PEG-PEI-REDV聚合物的合成及表征第93-98页
     ·PHEMA-PCL-PEG-PEI聚合物的热性能表征第98-99页
     ·聚合物纳米粒的尺寸和形貌第99-100页
     ·纳米粒及其复合物的粒径及zeta电位值第100-101页
     ·凝胶电泳实验第101-102页
     ·pEGFP-ZNF580基因在复合物中的稳定性实验第102-103页
     ·细胞存活率实验第103-104页
     ·体外转染实验结果第104-107页
   ·结论第107-109页
第五章 结论第109-110页
参考文献第110-123页
发表论文和参加科研情况说明第123-125页
致谢第125-126页

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