中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-14页 |
前言 | 第14-17页 |
第一部分 黄连解毒汤不同极性提取物抗白念珠菌活性的筛选 | 第17-20页 |
1 实验材料 | 第17页 |
·菌株 | 第17页 |
·药物 | 第17页 |
·试剂 | 第17页 |
·培养基的制备 | 第17页 |
·仪器 | 第17页 |
2 实验方法 | 第17-18页 |
·菌悬液制备 | 第17-18页 |
·黄连解毒汤不同极性部位的提取 | 第18页 |
·提取物对白念珠菌最低抑菌浓度的测定 | 第18页 |
3 结果 | 第18页 |
4 讨论 | 第18-20页 |
第二部分 黄连解毒汤乙酸乙酯提取物对白念珠菌毒力因子的作用研究 | 第20-61页 |
1 实验材料 | 第20-23页 |
·菌株 | 第20页 |
·药物 | 第20页 |
·试剂 | 第20页 |
·培养基制备 | 第20-22页 |
·仪器 | 第22-23页 |
2 实验方法 | 第23-34页 |
·EAHD对白念珠菌黏附作用的影响 | 第23-25页 |
·菌悬液的配制 | 第23页 |
·XTT法检测白念珠菌黏附性 | 第23页 |
·固体平板法计数导管上黏附的白念珠菌 | 第23页 |
·倒置显微镜观察早期黏附的白念珠菌 | 第23页 |
·qRT-PCR检测黏附相关基因的表达 | 第23-25页 |
·EAHD对白念珠菌菌丝形成的影响 | 第25-28页 |
·菌悬液的配制 | 第25页 |
·倒置显微镜观察菌丝形态 | 第25页 |
·荧光显微镜观察菌丝形态 | 第25-26页 |
·扫描电镜观察菌丝形态 | 第26页 |
·固体平板上观测菌落形态 | 第26页 |
·qRT-PCR检测菌丝形成相关基因的表达 | 第26页 |
·Western Blot实验 | 第26-28页 |
·EAHD对白念珠菌分泌酶及疏水性的影响 | 第28-30页 |
·菌悬液配制 | 第28页 |
·分泌酶阳性菌株的筛选及其酶活力测定 | 第28-29页 |
·细胞表面疏水性的测定 | 第29页 |
·qRT-PCR检测毒力因子相关基因的表达 | 第29-30页 |
·EAHD对白念珠菌生物膜分散作用的影响 | 第30-31页 |
·白念珠菌液和导管片的制备 | 第30页 |
·EAHD对白念珠菌生物膜最低抑制浓度的测定 | 第30-31页 |
·白念珠菌生物膜分散实验 | 第31页 |
·XTT法检测来自生物膜的分散细胞活性 | 第31页 |
·导管片残余生物膜CFU计数 | 第31页 |
·扫描电镜检查残余生物膜形态结构 | 第31页 |
·EAHD联合FLZ抗白念珠菌耐药株 | 第31-34页 |
·菌悬液配制 | 第31-32页 |
·EAHD与FLZ对耐药株MIC及SMIC80 的测定 | 第32页 |
·棋盘稀释法测定两药联合抗菌实验 | 第32页 |
·时间-杀菌曲线的测定 | 第32-33页 |
·HPLC法检测生物膜麦角甾醇含量 | 第33页 |
·qRT-PCR检测麦角甾醇形成相关基因的表达 | 第33-34页 |
3 结果 | 第34-54页 |
·EAHD可显著抑制白念珠菌的早期黏附 | 第34-37页 |
·EAHD降低白念珠菌对96孔板的黏附 | 第34-35页 |
·EAHD减少白念珠在聚酯导管菌落数 | 第35页 |
·EAHD抑制黏附状态白念珠菌的发育 | 第35-36页 |
·EAHD对白念珠菌黏附相关基因表达的影响 | 第36-37页 |
·EAHD可抑制白念珠菌菌丝的发 | 第37-42页 |
·倒置显微镜观察 | 第37-38页 |
·荧光显微镜观察 | 第38-39页 |
·扫描电镜检测 | 第39-40页 |
·平板菌落形态 | 第40-41页 |
·EAHD对白念珠菌菌丝形成相关基因表达的影响 | 第41-42页 |
·Western blot法检测菌丝特异性蛋白表达水平 | 第42页 |
·EAHD可抑制白念珠菌分泌酶活力及疏水 | 第42-47页 |
·分泌酶阳性菌株筛选结果 | 第42-44页 |
·EAHD对分泌酶的活力影响 | 第44-45页 |
·EAHD对CSH的影响 | 第45-46页 |
·EAHD对白念珠菌分泌酶及疏水性相关基因表达的影响 | 第46-47页 |
·EAHD对白念珠菌生物膜的分散无明显影响 | 第47-50页 |
·EAHD对白念珠菌的SMIC80 | 第47页 |
·EAHD对白念珠菌生物膜的分散细胞活性的影响 | 第47-48页 |
·EAHD对导管片上残余生物膜菌落数的影响 | 第48-49页 |
·EAHD对导管片上残余生物膜形态结构的影响 | 第49-50页 |
·EAHD协同FLZ抗白念珠菌耐药株 | 第50-54页 |
·EAHD与FLZ单用及联用时对白念珠菌浮游菌与生物膜的抗菌效应 | 第50页 |
·时间-杀菌曲线 | 第50-51页 |
·白念珠菌生物膜麦角甾醇含量 | 第51-53页 |
·EAHD对白念珠菌耐药株麦角甾醇合成相关基因表达的影响 | 第53-54页 |
4 讨论 | 第54-61页 |
·EAHD对白念珠菌黏附性的影响 | 第54-55页 |
·EAHD对白念珠菌菌丝形成的影响 | 第55-56页 |
·EAHD对白念珠菌分泌酶及细胞表面疏水性的影响 | 第56-58页 |
·EAHD对白念珠菌生物膜分散的影响 | 第58-59页 |
·EAHD联合FLZ对白念珠菌耐药株的抗菌作用 | 第59-60页 |
·结语 | 第60-61页 |
第三部分 黄连解毒汤乙酸乙酯提取物对体内白念珠菌感染的保护作用研究 | 第61-70页 |
1 实验材料 | 第61页 |
·菌株 | 第61页 |
·药物 | 第61页 |
·试剂 | 第61页 |
·动物 | 第61页 |
·仪器 | 第61页 |
2 实验方法 | 第61-64页 |
·EAHD对白念珠菌系统性感染的治疗作用 | 第61-62页 |
·模型的建立 | 第61-62页 |
·分组给药并观察存活时间 | 第62页 |
·EAHD对白念珠菌呼吸道感染的治疗作用 | 第62-64页 |
·模型的建立及治疗 | 第62页 |
·肺组织切片观察 | 第62-64页 |
3 结果 | 第64-68页 |
·EAHD对白念珠菌感染小鼠存活率的影响 | 第64-65页 |
·EAHD对白念珠菌感染小鼠肾脏的影响 | 第65-67页 |
·肾脏的外形观察 | 第65-66页 |
·肾脏的菌落计数 | 第66-67页 |
·EAHD对白念珠菌呼吸道感染小鼠肺的影响 | 第67-68页 |
·白念珠菌感染小鼠肺部模型的确定 | 第67页 |
·EAHD对小鼠肺的治疗作用 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-75页 |
综述 | 第75-86页 |
参考文献 | 第83-86页 |
附录 | 第86-87页 |
致谢 | 第87页 |