| 中文摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-5页 |
| 中文文摘 | 第5-11页 |
| 绪论 | 第11-21页 |
| 1. Ⅱ型聚酮合成酶研究进展 | 第11-14页 |
| ·聚酮化合物及聚酮合成酶分类 | 第11页 |
| ·Ⅱ型聚酮合成酶 | 第11-13页 |
| ·Ⅱ型PKS合成聚酮化合物的活性与化学结构 | 第13-14页 |
| 2. 多环氧杂蒽酮类抗生素的研究进展 | 第14-17页 |
| ·多环氧杂蒽酮类化合物的化学结构与活性 | 第15-16页 |
| ·多环氧杂蒽酮类化合物的生物合成研究 | 第16-17页 |
| 3. kigamicins的研究进展 | 第17-18页 |
| 4. 聚酮化合物含氮骨架的形成 | 第18-19页 |
| 5. 基因敲除是Ⅱ型PKS中功能基因的研究常用技术 | 第19-20页 |
| 6. 本课题的研究意义 | 第20-21页 |
| 第一章 对Orf56的生物信息学分析及其作用的推导 | 第21-25页 |
| ·方法 | 第21页 |
| ·结果与分析 | 第21-25页 |
| 第二章 基因置换天冬酰胺合成酶基因orf56 | 第25-43页 |
| ·前言 | 第25页 |
| ·材料 | 第25-29页 |
| ·质粒与菌株 | 第25-26页 |
| ·化学试剂 | 第26-28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·仪器 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-36页 |
| ·菌种的保藏 | 第29页 |
| ·细菌质粒的提取 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及回收 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态的CaCl_2法制备与转化 | 第31-32页 |
| ·E coli BW 25113/pIJ 790电转感受态的制备与转化 | 第32-33页 |
| ·基因置换载体的构建 | 第33-34页 |
| ·异源表达 | 第34-35页 |
| ·突变株Kiga 137/68产物液相质谱(LC-MS)检测 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·orf 56基因置换构建pLL 137 | 第36-38页 |
| ·pLL 137在S.lividans K4中异源表达 | 第38页 |
| ·突变株Kiga 137/68产物高效液质联用(LC-MS)鉴定 | 第38-41页 |
| ·本章小结 | 第41-43页 |
| 第三章 基因置换突变株的发酵和分离纯化 | 第43-63页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·材料 | 第43-44页 |
| ·菌株 | 第43页 |
| ·实验试剂 | 第43页 |
| ·培养基 | 第43-44页 |
| ·使用仪器 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·摇瓶发酵 | 第44页 |
| ·50L发酵罐发酵 | 第44-45页 |
| ·有机溶剂重蒸 | 第45页 |
| ·Amberlite XAD-16非离子型大孔树脂吸附与解吸 | 第45页 |
| ·反向硅胶柱层析 | 第45-46页 |
| ·高效液相色谱分离纯化 | 第46页 |
| ·高分辨质谱检测 | 第46-47页 |
| ·核磁共振检测(Nuclear Magnetic Resonance,NMR) | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-60页 |
| ·突变株Kiga 137/68摇瓶培养与固体培养的对比 | 第47-49页 |
| ·50L发酵罐发酵 | 第49页 |
| ·Amberlite XAD-16非离子型大孔树脂吸附与解吸 | 第49-50页 |
| ·反相硅胶层析 | 第50页 |
| ·高效液相分离纯化 | 第50-53页 |
| ·拟元素组成 | 第53-58页 |
| ·NMR分析 | 第58-60页 |
| ·小结 | 第60-63页 |
| 第四章 总结与展望 | 第63-67页 |
| ·总结 | 第63-64页 |
| ·展望 | 第64-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 个人简历 | 第77-79页 |
