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海洋产胞外多糖菌的筛选、发酵条件优化及其多糖免疫学活性初步探究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
前言第15-17页
第一章 微生物胞外多糖的研究进展第17-25页
   ·微生物胞外多糖的结构特征第17-19页
   ·微生物胞外多糖的生物学活性第19-21页
     ·免疫学活性第19页
     ·抗肿瘤活性第19-20页
     ·抑菌活性第20页
     ·抗病毒活性第20页
     ·抗氧化活性第20-21页
   ·微生物胞外多糖的提取及分离纯化第21-23页
     ·微生物胞外多糖的提取第21页
     ·微生物胞外多糖的分离及其纯化第21-23页
       ·分级醇沉法第21-22页
       ·柱层析分离法第22-23页
         ·阴离子交换柱层析分离法第22页
         ·凝胶柱层析分离法第22页
         ·亲和层析分离法第22-23页
   ·本文立题依据及研究内容第23-25页
     ·立题依据第23页
     ·研究内容和技术路线第23-25页
第二章 海洋产胞外多糖菌的筛选及发酵条件优化第25-36页
   ·实验材料第25-26页
     ·主要仪器第25页
     ·样品第25页
     ·培养基组成第25-26页
   ·实验方法第26-28页
     ·细菌初筛第26页
     ·菌种纯化及保存第26页
     ·菌种复筛第26-27页
     ·发酵条件优化第27-28页
       ·葡萄糖(分析纯)标准曲线的制作第27页
       ·发酵条件优化第27-28页
     ·正交实验确定最佳剂量第28页
     ·产胞外多糖菌的稳定性检测第28页
   ·实验结果第28-34页
     ·初筛结果第28页
     ·复筛结果第28-29页
     ·条件优化结果第29-32页
       ·葡萄糖分析纯标准曲线第29页
       ·碳源对细菌发酵影响第29-30页
       ·氮源对细菌发酵影响第30-31页
       ·金属离子对细菌发酵影响第31-32页
     ·正交优化结果第32-33页
     ·稳定性试验结果第33-34页
   ·小结与讨论第34-36页
第三章 细菌种属的鉴定及胞外多糖理化性质初步分析第36-45页
   ·实验材料及仪器第36页
   ·细菌种属鉴定第36-37页
     ·细菌DNA的提取第36-37页
     ·细菌 16Sr DNA的扩增与测序第37页
   ·胞外多糖的粗提取第37页
  Sevage法除蛋白第37页
   ·多糖理化性质的初步研究第37-38页
     ·多糖分子量的测定第37-38页
     ·多糖红外光谱分析第38页
     ·电镜下多糖颗粒形态观察第38页
   ·实验结果第38-43页
     ·16Sr DNAPCR鉴定结果第38页
     ·遗传进化树的建立第38-40页
     ·胞外多糖的初步纯化结果第40-41页
     ·多糖分子量的测定结果第41-42页
     ·红外光谱分析结果第42-43页
     ·电镜扫描结果第43页
   ·小结第43-45页
第四章 胞外多糖在细胞水平上的免疫学研究及抗肿瘤细胞研究第45-66页
   ·实验材料第45-46页
     ·样品第45页
     ·实验动物及细胞第45页
     ·药品及仪器第45-46页
   ·实验方法第46-47页
     ·多糖溶液的配置第46页
     ·细胞毒性实验第46页
     ·小鼠脾、胸腺淋巴细胞增殖反应第46-47页
     ·巨噬细胞(Peritoneal macrophages,PMΦ)吞噬功能第47页
     ·对Hela肿瘤细胞增殖的抑制作用第47页
   ·试验结果第47-64页
     ·细胞毒性第47-51页
       ·04多糖对细胞毒性实验结果第47-49页
       ·09多糖对细胞毒性实验结果第49-51页
     ·多糖对脾、胸腺淋巴细胞增殖反应结果第51-59页
       ·04多糖对脾、胸腺淋巴细胞影响结果第51-54页
       ·09多糖对脾、胸腺淋巴细胞影响结果第54-59页
     ·胞外多糖对PMΦ的吞噬功能结果第59-60页
       ·04多糖对PMΦ的吞噬功能影响第59页
       ·09多糖对PMΦ的吞噬功能影响第59-60页
     ·04、09多糖对肿瘤细胞体外增殖的抑制作用结果第60-64页
       ·04多糖对肿瘤细胞体外增殖的抑制作用第60-62页
       ·09多糖对肿瘤细胞体外增殖的抑制作用第62-64页
   ·小结与讨论第64-66页
第五章 胞外多糖对幼鸡的免疫增强及对IBDV病毒攻毒后的免疫保护性研究第66-78页
   ·实验材料第66-67页
     ·实验试剂与材料第66-67页
     ·实验仪器第67页
   ·实验方法第67-69页
     ·商品疫苗B87与多糖一起作用的免疫增强阶段第67-68页
     ·IBDV抗体水平及IL-1 水平检测第68页
     ·对IBDV病毒的保护性试验第68页
     ·攻毒后所测数据第68-69页
       ·免疫器官体重比第68页
       ·流式细胞仪检测第68页
       ·荧光定量检测病毒载量第68-69页
     ·数据分析方法第69页
   ·实验结果第69-75页
     ·IBDV抗体水平检测结果第69-70页
     ·IL-1 水平检测结果第70-71页
     ·攻毒实验结果第71-72页
     ·免疫各器官比重结果第72-73页
     ·攻毒后实验鸡法氏囊与胸腺中B、CD4+、CD8+等免疫淋巴细胞的变化第73-74页
     ·荧光定量结果第74-75页
   ·小结与讨论第75-78页
第六章 结论第78-79页
附录第79-80页
参考文献第80-84页
致谢第84-85页
攻读学位期间发表论文情况第85页

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