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猪轮状病毒VP3蛋白C端结构域的结构学研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略语表(Abbreviation)第10-11页
1 文章综述第11-20页
   ·猪轮状病毒概述第11-14页
     ·猪轮状病毒流行病学第11-12页
     ·猪轮状病毒形态结构第12页
     ·猪轮状病毒理化特性第12-13页
     ·猪轮状病毒基因组成和所编码的蛋白第13页
     ·猪轮状病毒结构蛋白的功能第13-14页
     ·猪轮状病毒非结构蛋白的功能第14页
     ·猪轮状病毒与免疫相关的结构蛋白第14页
   ·OAS-RNase L系统在抗病毒中的研究进展第14-17页
     ·2'-5' 寡聚腺苷酸合成酶(2'-5'oligoadenylate synthetase,OAS)第14-15页
     ·2'-5' 寡聚腺苷酸 (2’-5’A)第15页
     ·核糖核酸酶(RNase L)第15-16页
     ·OAS-RNase L信号通路的抗病毒机制第16-17页
     ·VP3-CTD蛋白抑制OAS-RNase L信号通路的研究第17页
   ·蛋白质结晶学研究第17-19页
     ·蛋白质结晶的方法与原理第17-18页
     ·结晶生长条件的优化第18页
     ·蛋白质晶体数据的收集第18-19页
     ·晶体结构解析和精修第19页
   ·研究目的及意义第19-20页
2 材料与方法第20-35页
   ·材料第20-24页
     ·质粒第20页
     ·菌株第20页
     ·实验仪器和材料第20页
     ·主要酶与试剂盒第20-21页
     ·主要培养基及相关配制第21页
     ·主要试剂及相关配制第21页
     ·主要缓冲液及相关配制第21-23页
     ·主要分析软件第23页
     ·引物第23-24页
   ·实验方法第24-35页
     ·基因克隆、原核表达载体的构建第24-29页
     ·VP3-CTD蛋白在大肠杆菌中表达与纯化第29-32页
     ·VP3-CTD蛋白质结晶及结晶条件的筛选和优化第32-34页
     ·VP3-CTD蛋白晶体衍射数据采集与结构解析第34-35页
3 结果与分析第35-48页
   ·VP3-CTD表达载体的构建第35-36页
     ·VP3-CTD基因的扩增第35页
     ·重组质粒的酶切鉴定第35-36页
   ·VP3-CTD蛋白在大肠杆菌中表达与纯化第36-41页
     ·VP3-CTD基因在大肠杆菌中的诱导表达与鉴定第36-37页
     ·VP3-CTD蛋白原核表达条件的确定第37-38页
     ·VP3-CTD蛋白的纯化第38-41页
   ·VP3-CTD蛋白质结晶及结晶条件的筛选和优化第41-45页
     ·VP3-CTD蛋白结晶条件的筛选第41-43页
     ·VP3-CTD 蛋白结晶的鉴定第43页
     ·VP3-CTD蛋白结晶的优化第43-45页
   ·VP3-CTD蛋白晶体衍射数据收集与结构解析第45-48页
     ·VP3-CTD蛋白结晶的衍射数据收集及修正第45-47页
     ·VP3-CTD蛋白结构解析第47-48页
4 讨论第48-50页
   ·VP3-CTD蛋白的表达和纯化第48页
   ·VP3-CTD蛋白的纯化第48页
   ·VP3-CTD蛋白晶体的结构解析第48-50页
5.结论第50-51页
参考文献第51-58页
致谢第58页

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