利用cDNA-AFLP分析白桦雄花早期表达基因
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 绪论 | 第10-17页 |
| ·高等植物花发育的研究进展 | 第10-13页 |
| ·植物花发育调控的分子机理 | 第10-12页 |
| ·木本植物开花调节基因的研究 | 第12-13页 |
| ·白桦雄花发育的研究进展 | 第13-14页 |
| ·白桦概况 | 第13-14页 |
| ·白桦提早开花技术研究进展 | 第14页 |
| ·cDNA-AFLP技术研究进展 | 第14-16页 |
| ·cDNA-AFLP技术原理及特点 | 第14-15页 |
| ·cDNA-AFLP技术的应用 | 第15-16页 |
| ·研究的目的、意义和方法 | 第16-17页 |
| ·研究的目的和意义 | 第16页 |
| ·研究方法 | 第16-17页 |
| 2 白桦cDNA-AFLP体系的优化和建立 | 第17-28页 |
| ·实验材料、试剂和设备 | 第17页 |
| ·实验材料 | 第17页 |
| ·酶及试剂 | 第17页 |
| ·主要仪器设备 | 第17页 |
| ·实验方法 | 第17-23页 |
| ·总RNA的提取 | 第18页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第18-19页 |
| ·酶切体系 | 第19-20页 |
| ·接头连接 | 第20页 |
| ·预扩增体系 | 第20-21页 |
| ·选择性扩增体系 | 第21页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第21-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-26页 |
| ·总RNA的提取和双链cDNA的合成 | 第23页 |
| ·两种酶切方法的效果比较 | 第23-24页 |
| ·预扩增反应体系的建立 | 第24-26页 |
| ·讨论 | 第26-27页 |
| ·本章小节 | 第27-28页 |
| 3 白桦雄花发育早期和晚期基因表达的差异分析 | 第28-38页 |
| ·实验材料、试剂和设备 | 第28页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·酶及试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-34页 |
| ·总RNA的提取与纯化 | 第29-30页 |
| ·双链cDNA的合成 | 第30页 |
| ·cDNA-AFLP差异分析 | 第30-32页 |
| ·差异条带回收、克隆、测序 | 第32-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-36页 |
| ·总RNA的提取与纯化 | 第34-35页 |
| ·cDNA-AFLP差异分析 | 第35页 |
| ·差异片段的回收克隆测序 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36页 |
| ·本章小结 | 第36-38页 |
| 4 白桦雄花早期特异ESTs的测序及分析 | 第38-46页 |
| ·实验试剂与方法 | 第38页 |
| ·测序引物与仪器 | 第38页 |
| ·EST的测序结果处理 | 第38页 |
| ·EST功能注释和功能分类 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-44页 |
| ·早期花发育相关基因筛选 | 第38-40页 |
| ·EST序列的GO分类 | 第40-42页 |
| ·代谢途径的分析 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-45页 |
| ·ESTs序列测定和生物信息学分析 | 第44-45页 |
| ·关于白桦雄花花发育早期ESTs的探讨 | 第45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 5 白桦雄花早期花发育4个相关基因的表达分析 | 第46-51页 |
| ·实验材料、试剂和设备 | 第46页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·酶及试剂 | 第46页 |
| ·主要仪器设备 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-48页 |
| ·总RNA的提取 | 第46页 |
| ·基因组DNA的去除 | 第46页 |
| ·RNA的回收纯化 | 第46-47页 |
| ·cDNA的合成 | 第47页 |
| ·引物筛选 | 第47页 |
| ·实时定量PCR | 第47-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-50页 |
| ·总RNA的提取和纯化 | 第48页 |
| ·RT-PCR验证 | 第48-49页 |
| ·qRT-PCR分析 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50页 |
| ·内参基因的选择 | 第50页 |
| ·目的基因的表达分析 | 第50页 |
| ·本章小结 | 第50-51页 |
| 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
