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拟南芥动蛋白AtKP1通过与线粒体外膜蛋白AtVDAC3互作参与调控线粒体功能

摘要第1-5页
Abstract第5-7页
缩略词第7-10页
第一章 文献综述第10-26页
   ·细胞骨架及其相关蛋白与线粒体的关系第10-14页
     ·细胞骨架蛋白第10-11页
     ·细胞骨架参与线粒体的运动、定位及形态调控第11-12页
     ·细胞骨架及其相关蛋白参与线粒体呼吸调控第12-14页
   ·微管依赖的马达蛋白动蛋白与线粒体第14-18页
     ·动蛋白的结构第14-15页
     ·动蛋白的功能第15-17页
     ·马达蛋白与线粒体第17-18页
   ·细胞骨架及其相关蛋白与线粒体外膜蛋VDAC第18-25页
     ·VDAC的结构第18-20页
     ·VDAC的功能第20-23页
     ·细胞骨架蛋白与VDAC蛋白相互作用第23-24页
     ·植物VDAC第24-25页
   ·本研究的目的与意义第25-26页
第二章 材料与方法第26-37页
   ·实验材料、试剂和仪器第26-27页
     ·实验材料第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·实验仪器第27页
   ·实验方法第27-37页
     ·拟南芥的培养第27页
     ·AtKP1重组蛋白的构建、表达和亲和纯化第27-29页
     ·His-VDAC3蛋白纯化第29-30页
     ·Bac-to-Bac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达重组的外源蛋白第30-32页
     ·GST Pull-Down第32页
     ·Tricine SDS-PAGE第32-34页
     ·免疫印迹第34页
     ·溶氧电极测定植物材料呼吸作用第34-35页
     ·拟南芥线粒体的分离第35页
     ·荧光素酶法测定ATP第35页
     ·线粒体琥珀酸脱氢酶酶活测定第35页
     ·Rhodamine123染色测定线粒体膜电位第35-36页
     ·线粒体产热的检测第36页
     ·线粒体细胞色素C释放的检测第36页
     ·H_2DCFDA染色检测ROS第36-37页
第三章 实验结果与分析第37-58页
   ·AtKP1和AtVDAC3参与种子在低温萌发过程中的呼吸调节第37-38页
   ·AtKP1通过AtVDAC3降低线粒体ATP生成第38-41页
   ·AtKP1和AtVDAC3参与线粒体凋亡过程第41-47页
   ·AtKP1 C端不同肽段通过AtVDAC3对线粒体功能产生不同影响第47-58页
第四章 讨论与展望第58-64页
   ·AtKP1通过与AtVDAC3互作,参与调控线粒体功能第58-59页
   ·AtKP1可能存在多位点调控参与影响线粒体功能第59-60页
   ·AtKP1通过AtVDAC3提高抗逆性第60-63页
   ·展望第63-64页
第五章 结论第64-65页
附录 拟南芥动蛋白AtKP1与线粒体外膜蛋白AtVDAC3互作的结构生物学研究第65-75页
 一、研究背景第65-66页
 二、实验材料与方法第66-67页
  1、实验材料第66页
  2、蛋白结晶相关试剂第66页
  3、实验方法第66-67页
 三、实验结果与分析第67-75页
  1. His-VDAC3蛋白的获得第67-68页
  2. AtKP1 C端功能肽段的选择第68-71页
  3. AtVDAC3晶体筛选第71-72页
  4. AtVDAC3/KP1-C_(1038-1087)复合体晶体筛选第72-75页
参考文献第75-90页
致谢第90-92页
个人简历第92页

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