| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-18页 |
| 材料 | 第18-22页 |
| 1. 细胞系与质粒 | 第18页 |
| 2. 主要试剂 | 第18-19页 |
| 3. 部分试剂配制 | 第19页 |
| 4. 主要实验仪器 | 第19-22页 |
| 内容与方法 | 第22-40页 |
| 1. 人肝癌细胞培养及荧光定量 PCR 检测 HPSE 表达高低 | 第22-31页 |
| 2. 人 HPSE 基因 RNAi 载体构建 | 第31-34页 |
| 3. 人 HPSE 基因真核表达载体构建 | 第34-37页 |
| 4. 人 HPSE 基因 RNAi 载体与基因真核表达载体转染肝癌细胞的 qPCR 评价 | 第37-40页 |
| 结果 | 第40-47页 |
| 1. 三种人肝癌细胞株 HPSE基因荧光定量PCR 结果 | 第40-41页 |
| 2. pEGFP-1- RNAi,pEGFP-1-HPSE 构建的检测结果 | 第41-44页 |
| ·人HPSE基因4个RNAi载体序列测定 | 第41页 |
| ·构建pEGFP-1-HPSE的HSPE基因PCR扩增及电泳结果 | 第41-42页 |
| ·pEGFP-1-HPSE重组载体菌落的PCR扩增及电泳结果 | 第42页 |
| ·pEGFP-1-HPSE 重组载体酶切电泳鉴定 | 第42-43页 |
| ·pEGFP-1-HPSE 重组载体测序 | 第43-44页 |
| 3. pEGFP-1- RNAi 与 pEGFP-1-HPSE 转染肝癌细胞的影响 | 第44-47页 |
| ·转染对肝癌细胞的肝素酶表达的影响 | 第44-45页 |
| ·转染细胞组样品RNA抽提电泳 | 第45页 |
| ·HPSE目的基因及hACTB内参基因qPCR定量结果 | 第45-46页 |
| ·四种pEGFP-1- RNAi与pEGFP-1-HPSE对HPSE表达的影响 | 第46-47页 |
| 讨论 | 第47-50页 |
| 1. 肝素酶表达与肝癌的关系 | 第47页 |
| 2. EGFP 的应用 | 第47页 |
| 3. RNAi 技术应用 | 第47-48页 |
| 4. 过表达载体构建 | 第48页 |
| 5. 转染实验设计 | 第48页 |
| 6. 意义 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 综述 | 第56-68页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |