摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
前言 | 第11-18页 |
材料 | 第18-22页 |
1. 细胞系与质粒 | 第18页 |
2. 主要试剂 | 第18-19页 |
3. 部分试剂配制 | 第19页 |
4. 主要实验仪器 | 第19-22页 |
内容与方法 | 第22-40页 |
1. 人肝癌细胞培养及荧光定量 PCR 检测 HPSE 表达高低 | 第22-31页 |
2. 人 HPSE 基因 RNAi 载体构建 | 第31-34页 |
3. 人 HPSE 基因真核表达载体构建 | 第34-37页 |
4. 人 HPSE 基因 RNAi 载体与基因真核表达载体转染肝癌细胞的 qPCR 评价 | 第37-40页 |
结果 | 第40-47页 |
1. 三种人肝癌细胞株 HPSE基因荧光定量PCR 结果 | 第40-41页 |
2. pEGFP-1- RNAi,pEGFP-1-HPSE 构建的检测结果 | 第41-44页 |
·人HPSE基因4个RNAi载体序列测定 | 第41页 |
·构建pEGFP-1-HPSE的HSPE基因PCR扩增及电泳结果 | 第41-42页 |
·pEGFP-1-HPSE重组载体菌落的PCR扩增及电泳结果 | 第42页 |
·pEGFP-1-HPSE 重组载体酶切电泳鉴定 | 第42-43页 |
·pEGFP-1-HPSE 重组载体测序 | 第43-44页 |
3. pEGFP-1- RNAi 与 pEGFP-1-HPSE 转染肝癌细胞的影响 | 第44-47页 |
·转染对肝癌细胞的肝素酶表达的影响 | 第44-45页 |
·转染细胞组样品RNA抽提电泳 | 第45页 |
·HPSE目的基因及hACTB内参基因qPCR定量结果 | 第45-46页 |
·四种pEGFP-1- RNAi与pEGFP-1-HPSE对HPSE表达的影响 | 第46-47页 |
讨论 | 第47-50页 |
1. 肝素酶表达与肝癌的关系 | 第47页 |
2. EGFP 的应用 | 第47页 |
3. RNAi 技术应用 | 第47-48页 |
4. 过表达载体构建 | 第48页 |
5. 转染实验设计 | 第48页 |
6. 意义 | 第48-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
综述 | 第56-68页 |
参考文献 | 第62-68页 |
作者简介及读研期间主要科研成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |