致谢 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
专业词汇中英文对照表 | 第8-10页 |
目录 | 第10-13页 |
1 引言 | 第13-21页 |
·表观遗传学 | 第13页 |
·甲基化修饰 | 第13-15页 |
·DNA甲基化 | 第13-14页 |
·组蛋白甲基化 | 第14页 |
·RNA甲基化 | 第14-15页 |
·N~6-甲基腺苷酸(m~6A) | 第15-16页 |
·m~6A的去甲基化酶 | 第16-17页 |
·m~6A的特异性甲基转移酶 | 第17-19页 |
·m~6A的结合蛋白 | 第19页 |
·METTL3互作蛋白的研究 | 第19-21页 |
2 研究材料与方法 | 第21-44页 |
·实验材料 | 第21-27页 |
·质粒载体 | 第21页 |
·菌株 | 第21-22页 |
·细胞系 | 第22页 |
·分子克隆工具酶 | 第22页 |
·试剂盒及相关试剂 | 第22-24页 |
·siRNA序列 | 第24页 |
·引物 | 第24-25页 |
·抗体 | 第25页 |
·实验仪器 | 第25-27页 |
·实验方法 | 第27-34页 |
·主要实验试剂配制 | 第27-34页 |
·实验方法 | 第34-44页 |
·目的基因载体的构建 | 第34-35页 |
·感受态的制备及质粒转化 | 第35-36页 |
·细胞培养、传代及保存 | 第36页 |
·siRNA沉默目的基因 | 第36页 |
·质粒的瞬时转染 | 第36-37页 |
·哺乳动物总蛋白的提取 | 第37页 |
·原核蛋白的表达与纯化 | 第37-41页 |
·GST pull down | 第41-42页 |
·免疫荧光技术 | 第42页 |
·利用iRNA-FAM进行基因沉默 | 第42页 |
·免疫共沉淀技术 | 第42页 |
·用于质谱分析的蛋白样品制备 | 第42-43页 |
·总RNA提取 | 第43-44页 |
3 研究结果 | 第44-55页 |
·METTL3的生物学功能初步探索 | 第44页 |
·GST-METTL3融合蛋白纯化条件的优化 | 第44-46页 |
·GST-METTL3融合蛋白可溶性条件的优化 | 第44-45页 |
·利用凝胶层析法对GST-METTL3蛋白进行纯化 | 第45-46页 |
·METTL3特异性抗体的制备及检测 | 第46-48页 |
·His-METTL3蛋白纯化 | 第46-47页 |
·从包涵体中提取His-METTL3融合蛋白 | 第47-48页 |
·METTL3互作蛋白的筛选及鉴定 | 第48-52页 |
·METTL3互作蛋白的筛选 | 第48-49页 |
·METTL3互作蛋白的鉴定 | 第49-50页 |
·METTL3和WTAP直接相互作用的证明 | 第50-52页 |
·METTL3及其互作蛋白的细胞生物学水平的研究 | 第52-55页 |
·METTL3及其互作蛋白在细胞内的定位 | 第52-53页 |
·细胞内METTL3及其互作蛋白的表达对于其互作蛋白的影响 | 第53-55页 |
4 结论及讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
作者简历及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第60页 |