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棉花GaMEKK和GaMPK4基因功能的VIGS分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-9页
第一章 文献综述第9-23页
   ·棉花概述第9-10页
     ·棉花简介第9页
     ·我国棉花生产情况第9-10页
   ·植物防卫反应机制第10页
   ·植物细胞信号传导第10-11页
   ·蛋白质的可逆磷酸化与植物蛋白激酶第11-13页
   ·植物中的 MAPK 级联系统第13-21页
     ·促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)第13页
     ·植物 MAPK 的结构特点第13-14页
     ·植物 MAPK 的种类第14-16页
     ·植物 MAPK 的功能第16-21页
       ·植物 MAPK 与的生长发育的信号传递第16-17页
       ·植物 MAPK 与非生物胁迫的信号传递第17-18页
       ·植物 MAPK 与激素的信号转导第18-19页
       ·植物 MAPK 与活性氧的信号传递第19页
       ·植物 MAPK 与病原信号的传递第19-21页
   ·病毒诱导基因沉默(Virus induced gene silencing VIGS)第21页
   ·本研究的目的及意义第21-23页
第二章 实验材料和方法第23-47页
   ·实验材料第23-27页
     ·植物材料第23页
     ·菌株与质粒第23页
     ·酶与试剂第23-24页
     ·抗生素,培养基以及重悬液的配制第24-27页
       ·抗生素的配制第24-25页
       ·培养基的配制第25-26页
       ·重悬液的配制第26-27页
     ·模板与引物第27页
       ·模板的获得第27页
       ·引物的获得第27页
     ·仪器与设备第27页
   ·实验方法第27-47页
     ·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因的克隆第27-37页
       ·棉花幼苗的获得第27-28页
       ·棉花总 RNA 的提取第28-29页
       ·cDNA 第一链的的合成第29-30页
       ·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因的扩增第30-31页
       ·目的片段的与载体的连接及其测序分析第31-37页
     ·工程菌的制备与检测第37-38页
       ·农杆菌感受态细胞的制备第37页
       ·表达载体转化农杆菌 GV3101 感受态细胞第37-38页
       ·农杆菌菌落 PCR 的检测第38页
       ·质粒 PCR 的检测第38页
     ·棉花 VIGS 体系的构建第38-40页
       ·摇菌第38页
       ·扩大培养第38-39页
       ·重悬菌液并测 OD 值第39页
       ·VIGS 棉花幼苗的获得第39-40页
       ·培养接种第40页
     ·VIGS 体系中 MAPK 基因的检测第40-41页
     ·VIGS 棉花植株的病原菌接种及检测第41-45页
       ·细菌病原菌 PstDC3000 的接种及检测第41-43页
       ·真菌病原菌 V991 的接种及检测第43-45页
     ·VIGS 体系中 MAPK 标志基因的检测第45-47页
第三章 结果与讨论第47-57页
   ·棉花总 RNA 的提取及目标基因的分离第47-48页
     ·棉花总 RNA 的获得及 cDNA 的合成第47页
     ·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因序列分析第47-48页
     ·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因片段的获得第48页
   ·病毒诱导基因沉默载体的构建第48-49页
   ·农杆菌工程菌的获得第49页
   ·利用 VIGS 方法获得棉花沉默 GaMEKK 或 GaMPK4 基因植株第49-51页
   ·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因抗病功能分析第51-55页
     ·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因对细菌病原菌 PstDC3000 的抗性分析第51-53页
     ·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因对真菌病原菌 V991 的抗性分析第53-55页
   ·JA 和 SA 防卫途径标志基因的检测第55-57页
第四章 讨论第57-59页
第五章 结论第59-60页
参考文献第60-68页
致谢第68-69页
作者简介第69-70页
司怀军导师简介第70-71页
吴家和导师简介第71-73页
附录 I第73-75页
附录 II第75-76页

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