摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-23页 |
·棉花概述 | 第9-10页 |
·棉花简介 | 第9页 |
·我国棉花生产情况 | 第9-10页 |
·植物防卫反应机制 | 第10页 |
·植物细胞信号传导 | 第10-11页 |
·蛋白质的可逆磷酸化与植物蛋白激酶 | 第11-13页 |
·植物中的 MAPK 级联系统 | 第13-21页 |
·促分裂原活化蛋白激酶(MAPK) | 第13页 |
·植物 MAPK 的结构特点 | 第13-14页 |
·植物 MAPK 的种类 | 第14-16页 |
·植物 MAPK 的功能 | 第16-21页 |
·植物 MAPK 与的生长发育的信号传递 | 第16-17页 |
·植物 MAPK 与非生物胁迫的信号传递 | 第17-18页 |
·植物 MAPK 与激素的信号转导 | 第18-19页 |
·植物 MAPK 与活性氧的信号传递 | 第19页 |
·植物 MAPK 与病原信号的传递 | 第19-21页 |
·病毒诱导基因沉默(Virus induced gene silencing VIGS) | 第21页 |
·本研究的目的及意义 | 第21-23页 |
第二章 实验材料和方法 | 第23-47页 |
·实验材料 | 第23-27页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌株与质粒 | 第23页 |
·酶与试剂 | 第23-24页 |
·抗生素,培养基以及重悬液的配制 | 第24-27页 |
·抗生素的配制 | 第24-25页 |
·培养基的配制 | 第25-26页 |
·重悬液的配制 | 第26-27页 |
·模板与引物 | 第27页 |
·模板的获得 | 第27页 |
·引物的获得 | 第27页 |
·仪器与设备 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-47页 |
·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因的克隆 | 第27-37页 |
·棉花幼苗的获得 | 第27-28页 |
·棉花总 RNA 的提取 | 第28-29页 |
·cDNA 第一链的的合成 | 第29-30页 |
·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因的扩增 | 第30-31页 |
·目的片段的与载体的连接及其测序分析 | 第31-37页 |
·工程菌的制备与检测 | 第37-38页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第37页 |
·表达载体转化农杆菌 GV3101 感受态细胞 | 第37-38页 |
·农杆菌菌落 PCR 的检测 | 第38页 |
·质粒 PCR 的检测 | 第38页 |
·棉花 VIGS 体系的构建 | 第38-40页 |
·摇菌 | 第38页 |
·扩大培养 | 第38-39页 |
·重悬菌液并测 OD 值 | 第39页 |
·VIGS 棉花幼苗的获得 | 第39-40页 |
·培养接种 | 第40页 |
·VIGS 体系中 MAPK 基因的检测 | 第40-41页 |
·VIGS 棉花植株的病原菌接种及检测 | 第41-45页 |
·细菌病原菌 PstDC3000 的接种及检测 | 第41-43页 |
·真菌病原菌 V991 的接种及检测 | 第43-45页 |
·VIGS 体系中 MAPK 标志基因的检测 | 第45-47页 |
第三章 结果与讨论 | 第47-57页 |
·棉花总 RNA 的提取及目标基因的分离 | 第47-48页 |
·棉花总 RNA 的获得及 cDNA 的合成 | 第47页 |
·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因序列分析 | 第47-48页 |
·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因片段的获得 | 第48页 |
·病毒诱导基因沉默载体的构建 | 第48-49页 |
·农杆菌工程菌的获得 | 第49页 |
·利用 VIGS 方法获得棉花沉默 GaMEKK 或 GaMPK4 基因植株 | 第49-51页 |
·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因抗病功能分析 | 第51-55页 |
·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因对细菌病原菌 PstDC3000 的抗性分析 | 第51-53页 |
·棉花 GaMEKK 和 GaMPK4 基因对真菌病原菌 V991 的抗性分析 | 第53-55页 |
·JA 和 SA 防卫途径标志基因的检测 | 第55-57页 |
第四章 讨论 | 第57-59页 |
第五章 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
作者简介 | 第69-70页 |
司怀军导师简介 | 第70-71页 |
吴家和导师简介 | 第71-73页 |
附录 I | 第73-75页 |
附录 II | 第75-76页 |