| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-20页 |
| ·大豆研究概述 | 第9页 |
| ·大豆疫霉根腐病研究概述 | 第9-11页 |
| ·大豆疫霉根腐病的危害 | 第9-10页 |
| ·大豆疫霉根腐病的防治措施 | 第10-11页 |
| ·hrp基因研究概述 | 第11-14页 |
| ·基因调控功能 | 第11页 |
| ·蛋白质转位泌出功能 | 第11-12页 |
| ·Hrp基因与avr基因的关系 | 第12页 |
| ·编码HR反应激发子 | 第12页 |
| ·Hrp基因参与纤毛的形成 | 第12页 |
| ·Harpin蛋白的结构与特点 | 第12-13页 |
| ·Harpin蛋白作用机理 | 第13页 |
| ·Harpin蛋白的应用 | 第13-14页 |
| ·大豆遗传转化 | 第14-17页 |
| ·大豆遗传转化方法-农杆菌介导法 | 第14-15页 |
| ·基因枪法 | 第15-16页 |
| ·电激法 | 第16页 |
| ·PEG电激法 | 第16页 |
| ·超声波辅助农杆菌介导法 | 第16页 |
| ·显微注射法 | 第16-17页 |
| ·花粉管通道法 | 第17页 |
| ·转化受体要求 | 第17-18页 |
| ·受体材料的选择 | 第17页 |
| ·大豆遗传转化中常用受体 | 第17-18页 |
| ·本课题研究的目的与意义 | 第18-20页 |
| ·研究目的 | 第18页 |
| ·研究意义 | 第18-20页 |
| 第二章 HrpZpsta基因重组植物表达载体的构建 | 第20-28页 |
| ·材料与方法 | 第20-21页 |
| ·菌株与载体 | 第20页 |
| ·酶和试剂 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-26页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·克隆载体质粒的提取 | 第21-23页 |
| ·HrpZpsta基因的扩增 | 第23页 |
| ·PCR扩增产物的检测及回收 | 第23-25页 |
| ·重组植物表达载体pBI121-hrpZpsta的构建 | 第25-26页 |
| ·结果与分析 | 第26-28页 |
| ·重组植物表达载体pBI121-hrpZpsta的构建 | 第26-27页 |
| ·HrpZpsta基因的测序及序列分析 | 第27-28页 |
| 第三章 重组植物表达载体的遗传转化及转基因植株的检测 | 第28-51页 |
| ·材料与方法 | 第28-29页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·试剂与主要仪器设备 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·农杆菌介导的大豆遗传转化 | 第29-31页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第29页 |
| ·重组表达载体转化农杆菌感受态 | 第29-30页 |
| ·转化子的筛选 | 第30页 |
| ·农杆菌工程菌液的制备 | 第30页 |
| ·大豆子叶节的培养和处理 | 第30-31页 |
| ·大豆子叶节卡那霉素选择压的确定 | 第31页 |
| ·农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化 | 第31页 |
| ·大豆花粉管通道法的遗传转化 | 第31-34页 |
| ·植物材料的准备 | 第31页 |
| ·质粒DNA的提取和纯化 | 第31-33页 |
| ·大豆花粉管通道法的遗传转化的方法 | 第33-34页 |
| ·转基因植株的检测 | 第34-44页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第34-35页 |
| ·转基因植株的Southern杂交检测 | 第35-39页 |
| ·转基因植株的RT-PCR检测 | 第39-42页 |
| ·转基因植株的SDS-PAGE检测 | 第42-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-51页 |
| ·农杆菌工程菌的获得 | 第44-45页 |
| ·大豆子叶节卡那霉素选择压的确定 | 第45页 |
| ·农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化 | 第45-46页 |
| ·大豆花粉管通道的遗传转化 | 第46页 |
| ·农杆菌介导法获得的T_0代转基因植株的PCR检测 | 第46-47页 |
| ·转基因品系的PCR检测 | 第47-48页 |
| ·农杆菌介导的大豆遗传转化获得的T_1代转基因植株的Southern杂交 | 第48页 |
| ·转基因品系的RT-PCR检测 | 第48-49页 |
| ·转基因品系的SDS-PAGE检测 | 第49-51页 |
| 4 讨论 | 第51-53页 |
| 5 结论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
