| 中文摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-17页 |
| 1 肿瘤坏死因子-α拮抗剂的研究现状 | 第11-12页 |
| 2 噬菌体抗体库技术简介 | 第12-14页 |
| 3 本研究的意义及技术路线 | 第14-15页 |
| 参考文献 | 第15-17页 |
| 第一章 人源性肿瘤坏死因子-α的制备 | 第17-28页 |
| 1 材料 | 第17-18页 |
| 2 方法 | 第18-22页 |
| ·TNF-α原核表达载体的构建 | 第18-20页 |
| ·获得表达 TNF-α的大肠杆菌 | 第20页 |
| ·TNF-α高效表达 | 第20-21页 |
| ·TNF-α纯化 | 第21页 |
| ·分析与鉴定 | 第21-22页 |
| 3 结果 | 第22-26页 |
| ·TNF-α原核表达载体的构建 | 第22-23页 |
| ·TNF-α高效表达 | 第23-25页 |
| ·TNF-α纯化 | 第25-26页 |
| ·分析与鉴定 | 第26页 |
| 4 讨论 | 第26页 |
| 5 小结 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-28页 |
| 第二章 抗肿瘤坏死因子-α抗体的筛选 | 第28-38页 |
| 1 材料 | 第28-29页 |
| 2 方法 | 第29-33页 |
| ·宿主细胞的活化 | 第29-30页 |
| ·辅助噬菌体(M13KO7)的制备 | 第30-31页 |
| ·噬菌体抗体库的淘洗 | 第31-32页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选(ELISA 筛选) | 第32-33页 |
| ·同源性比对 | 第33页 |
| ·抗原结合特异性 | 第33页 |
| 3 结果 | 第33-35页 |
| ·噬菌体抗体库的淘洗 | 第33-34页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选(ELISA 筛选) | 第34页 |
| ·同源性比对 | 第34页 |
| ·抗原结合特异性 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 5 小结 | 第36页 |
| 参考文献 | 第36-38页 |
| 第三章 抗肿瘤坏死因子-α Fab’抗体表达载体的构建及其在大肠杆菌中的分泌表达 | 第38-57页 |
| 1 材料 | 第38-41页 |
| 2 方法 | 第41-47页 |
| ·TNF-α Fab’抗体原核表达载体的构建 | 第41页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第41-42页 |
| ·Fab’抗体诱导表达条件优化 | 第42-43页 |
| ·Fab’抗体纯化 | 第43-45页 |
| ·分析与鉴定 | 第45-47页 |
| 3 结果 | 第47-55页 |
| ·TNF-α Fab’抗体原核表达载体的构建 | 第47页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第47-49页 |
| ·Fab’抗体诱导表达条件优化 | 第49-50页 |
| ·Fab’抗体纯化 | 第50-52页 |
| ·分析与鉴定 | 第52-55页 |
| 4 讨论 | 第55-56页 |
| 5 小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 附录 攻读硕士学位期间论文情况 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |