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番茄斑萎病毒属的分子检测技术研究

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
第一章 文献综述第8-18页
   ·番茄斑萎病毒属病毒(Tospoviruses)简介第8-11页
     ·番茄斑萎病毒属的种类和分类依据第8-9页
     ·番茄斑萎病毒属病毒的基因组结构第9页
     ·番茄斑萎病毒属病毒的分子生物学特性第9-10页
     ·番茄斑萎病毒属病毒的生物学特性第10-11页
     ·番茄斑萎病毒属病毒的危害与症状第11页
   ·Tospovirus分子信息分析第11-12页
   ·植物病毒的检测方法第12-16页
     ·生物学方法第12页
     ·血清学方法第12-13页
     ·电镜技术检测第13-14页
       ·电镜负染检测法第13-14页
       ·免疫电镜(immunosorbent election microscopy,IEM)检测法第14页
       ·电镜超薄切片第14页
     ·分子生物学检测技术第14-16页
       ·核酸分子杂交技术第14页
       ·双链RNA(dsDNA)分析法第14-15页
       ·PCR技术第15-16页
       ·纳米磁珠技术第16页
   ·研究目的和意义第16-18页
第二章 多重PCR检测6种Tospovirus病毒第18-26页
   ·材料与方法第18-21页
     ·毒源第18页
     ·生化及分子生物学试剂第18页
     ·仪器设备第18页
     ·引物的设计第18-19页
     ·植物总RNA的提取第19页
     ·cDNA的合成第19-20页
     ·引物的特异性第20页
     ·多重PCR体系的优化第20页
     ·单、多重PCR灵敏度检测第20-21页
   ·结果与分析第21-25页
     ·引物的特异性检测第21页
     ·多重PCR体系的优化第21-24页
     ·多重PCR体系的确立第24页
     ·单、多重PCR的灵敏度第24-25页
   ·讨论第25-26页
第三章 实时荧光PCR法检测TSWV第26-31页
   ·材料与方法第26-29页
     ·毒源第26页
     ·生化及分子生物学试剂第26页
     ·仪器设备第26页
     ·引物的设计第26页
     ·植物总RNA的提取第26-28页
     ·cDNA的合成第28页
     ·实时荧光PCR第28-29页
   ·结果与分析第29-30页
     ·实时荧光PCR第29页
     ·实时荧光PCR Ct值对比第29-30页
   ·讨论第30-31页
第四章 甜瓜黄斑病毒S片段序列的测定第31-41页
   ·材料与方法第31-38页
     ·毒源第31页
     ·供试菌株与质粒第31页
     ·生化及分子生物学试剂第31页
     ·仪器设备第31页
     ·培养基及溶液配制第31-32页
     ·引物的设计第32-33页
     ·植物总RNA的提取与目的片段的克隆第33-38页
       ·植物总RNA的提取第33页
       ·cDNA的合成第33-34页
       ·PCR产物的回收纯化第34-37页
       ·连接反应第37页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第37页
       ·连接产物转化大肠杆菌第37页
       ·菌落PCR第37-38页
       ·OMEGA质粒小提试剂盒提取质粒DNA第38页
       ·DNA序列数据分析第38页
   ·结果与分析第38-40页
     ·序列分析第38-39页
     ·构建系统发育树第39-40页
   ·讨论第40-41页
参考文献第41-46页
缩略词第46-47页
附录1 MYSV S片段全长对比第47-53页
附录2 MYSV S片段编码蛋白序列对比第53-55页
作者简介第55-56页
致谢第56页

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