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泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶及tRNA-异戊烯基焦磷酸转移酶基因研究

摘要第1-9页
Abstract第9-21页
第一章 绪论第21-60页
   ·植原体及植原体病害概述第21-22页
   ·植原体的检测、分类鉴定、发病规律及防控对策第22-24页
     ·植原体病害诊断与病原检测第22页
     ·植原体的分类鉴定第22-23页
     ·植原体的发病规律及防控对策第23-24页
   ·植原体基因组及功能基因研究进展第24-32页
     ·植原体基因组基本特征第24-25页
     ·植原体功能基因及基因缺失第25-26页
     ·植原体的物质运输通道及其编码基因第26-28页
     ·植原体基因组中特有的潜在移动单元第28-29页
     ·植原体进化以及假基因和新基因的形成第29-30页
     ·不同植原体代谢基因的共性和多样性第30-32页
   ·植原体与寄主的互作及致病机制研究第32-44页
     ·植原体导致的植物症状第32页
     ·植原体侵染导致的寄主植物生理生化变化第32-39页
     ·植原体病害症状形成的分子机理第39-44页
     ·植原体与寄主昆虫的互作研究进展第44页
   ·胸苷酸激酶及其编码基因研究第44-51页
     ·嘌呤和嘧啶代谢第44-47页
     ·胸苷酸激酶定义第47页
     ·胸苷酸激酶研究进展第47-51页
   ·异戊烯基焦磷酸转移酶研究第51-56页
     ·细胞分裂素概述第51页
     ·异戊二烯类 CTKs第51-52页
     ·Adenylate-异戊烯基焦磷酸转移酶及其编码基因研究第52-54页
     ·tRNA-异戊烯基焦磷酸转移酶及其编码基因研究第54-56页
   ·研究目的意义、目标和主要研究内容第56-59页
     ·研究目的意义第56-57页
     ·研究目标第57页
     ·主要研究内容第57-59页
   ·技术路线第59-60页
第二章 泡桐丛枝植原体河北平山和江西吉安株系胸苷酸激酶基因的克隆、序列测定及多态性分析第60-77页
   ·材料与方法第61-62页
     ·材料第61页
     ·植物基因组 DNA 的提取第61页
     ·PCR 扩增及序列测定第61-62页
     ·序列分析第62页
   ·结果与分析第62-73页
     ·tmk-a 和 tmk-b 基因的 PCR 扩增第62页
     ·tmk-a 和 tmk-b 的序列多样性第62-65页
     ·tmk 基因序列位点变异分析第65-67页
     ·TMK 功能域预测第67-69页
     ·tmk 基因序列相似性及系统进化分析第69-73页
   ·小结与讨论第73-77页
第三章 泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶的原核表达、纯化及体外酶活性测定第77-88页
   ·材料与方法第77-80页
     ·材料第77-78页
     ·方法第78-80页
   ·结果与分析第80-85页
     ·PaWB PS 株系三个 tmk 基因编码蛋白的氨基酸序列比对及相似性分析第80-82页
     ·TMK-a-1、TMK-a-2 和 TMK-b 原核表达载体的构建第82页
     ·PaWBPS TMK-a-1、TMK-a-2 和 TMK-b 蛋白的表达及纯化第82-84页
     ·PaWBPS TMK-a-1、TMK-a-2 和 TMK-b 酶活性的测定第84-85页
   ·小结与讨论第85-88页
第四章 过量表达泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶对大肠杆菌生长的影响第88-93页
   ·材料与方法第88-89页
     ·材料第88-89页
     ·方法第89页
   ·结果与分析第89-91页
     ·BL21(DE3)大肠杆菌生长曲线的测定及差异显著性分析第89-91页
   ·小结与讨论第91-93页
第五章 泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶基因的表达分析第93-121页
   ·材料与方法第93-98页
     ·材料第93页
     ·方法第93-98页
   ·结果与分析第98-117页
     ·泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶基因 mRNA 转录水平的检测第98-101页
     ·泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶抗血清制备以及蛋白表达的检测第101-113页
     ·泡桐丛枝植原体 Northern blot 及 Western blot 检测时出现非特异性信号的原因分析第113-117页
   ·小结与讨论第117-121页
第六章 泡桐丛枝植原体蛋白 TRNA-IPT 对大肠杆菌生长的影响及其编码基因转化拟南芥初探第121-128页
   ·材料与方法第121-123页
     ·材料第121页
     ·方法第121-123页
   ·结果与分析第123-127页
     ·tRNA-IPT 基因原核表达菌株及突变体生长曲线的测定第123-125页
     ·泡桐丛枝植原体 tRNA-IPT 基因与寄主泡桐同源基因序列比较第125-126页
     ·泡桐丛枝植原体 tRNA-IPT 植物转基因载体的构建和转化拟南芥第126-127页
   ·小结与讨论第127-128页
第七章 结论与讨论第128-135页
   ·结论第128-131页
     ·两个泡桐丛枝植原体株系胸苷酸激酶基因的克隆、测序及序列分析第128页
     ·泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶的原核表达、纯化及体外酶活性测定第128-129页
     ·泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶对转化大肠杆菌生长的影响第129页
     ·泡桐丛枝植原体胸苷酸激酶基因在植原体和染病植物体内的表达分析第129-130页
     ·泡桐丛枝植原体 tRNA-异戊烯基焦磷酸转移酶对转化大肠杆菌生长的影响第130-131页
   ·讨论与展望第131-135页
     ·植原体 TMK-a 和 TMK-b 酶活性、底物专化性及作为植原体治疗靶标的可能性第131页
     ·植原体生长、繁殖、致病与 TMK-a、TMK-b 及 tRNA-IPT 蛋白表达之间可能的相关性第131-132页
     ·本研究采用的技术、方法对解决问题的作用与优势、存在的问题及解决对策第132-133页
     ·植原体研究的难点及其中蕴藏的机遇和优势第133-135页
参考文献第135-155页
附录第155-161页
在读期间的学术研究第161-164页
致谢第164页

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