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芍药花乙烯代谢及信号转导主要基因的克隆与分析

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-10页
第1章 文献综述第10-23页
   ·芍药概述第10页
   ·乙烯与切花衰老第10-12页
   ·乙烯的生物合成第12-13页
   ·乙烯代谢关键基因第13-15页
   ·乙烯信号转导关键基因的克隆研究第15-18页
     ·ETR1 基因第16-17页
     ·EIN3 基因第17-18页
   ·肌动蛋白基因第18-19页
   ·RACE 技术第19-21页
     ·RACE 技术原理第19-20页
     ·反应中涉及到的一些事项第20-21页
   ·研究目的和意义与技术路线第21-23页
     ·研究目的和意义第21-22页
     ·技术路线第22-23页
第2章 芍药肌动蛋白基因的克隆与分析第23-37页
   ·材料、仪器与试剂第23-25页
     ·材料第23页
     ·仪器第23页
     ·试剂第23页
     ·菌株与质粒第23-24页
     ·主要试剂及配制方法第24-25页
   ·方法第25-28页
     ·芍药总 RNA 的提取及纯化第25页
     ·引物设计第25页
     ·cDNA 合成第25页
     ·RT-PCR 扩增第25-26页
     ·PCR 产物的回收、克隆及测序第26-27页
     ·芍药肌动蛋白序列分析第27页
     ·芍药肌动蛋白结构及性质预测第27-28页
     ·半定量 RT-PCR 表达分析第28页
   ·结果与分析第28-35页
     ·芍药总 RNA 的提取及纯化第28-29页
     ·Actin 基因的 RT-PCR 扩增第29页
     ·Actin 基因的克隆及鉴定第29-33页
     ·芍药肌动蛋白序列分析第33页
     ·芍药肌动蛋白结构及物理性质预测第33-34页
     ·半定量 RT-PCR 分析第34-35页
   ·讨论第35-37页
第3章 芍药花 ACO 基因的克隆与分析第37-43页
   ·材料与试剂第37页
     ·材料第37页
     ·试剂第37页
   ·方法第37-38页
     ·芍药花瓣 RNA 的提取及纯化第37页
     ·引物设计第37页
     ·cDNA 的合成第37页
     ·RT-PCR 扩增第37页
     ·PCR 产物的回收、克隆、测序第37-38页
     ·芍药 ACO 蛋白序列分析、结构、性质预测第38页
   ·结果与分析第38-41页
     ·芍药花瓣 RNA 的纯化第38页
     ·ACO 基因的 RT-PCR 扩增第38-39页
     ·芍药 ACO 基因的克隆及鉴定第39页
     ·序列同源性分析第39-41页
     ·芍药 ACO 蛋白序列分析第41页
     ·芍药 ACO 蛋白物理性质预测第41页
   ·讨论第41-43页
第4章 芍药花 ACS 基因 CDNA 全长的克隆与分析第43-59页
   ·材料、仪器与试剂第43-44页
     ·材料第43页
     ·仪器第43页
     ·试剂第43页
     ·引物第43-44页
   ·方法第44-48页
     ·芍药花瓣总 RNA 的提取及纯化第44页
     ·cDNA 的合成第44页
     ·RT-PCR 扩增第44页
     ·PCR 产物的回收、克隆、测序第44页
     ·芍药 ACS 基因 3’ RACE 扩增第44-45页
     ·芍药 ACS 基因 5’ RACE 扩增第45-47页
     ·芍药 ACS 基因拼接的 cDNA 全长序列获得及序列分析第47页
     ·芍药 ACS 蛋白结构及性质预测第47页
     ·芍药 ACS 基因编码区的 RT-PCR 扩增第47-48页
     ·芍药 ACS CDS PCR 产物的回收、克隆、测序第48页
   ·结果与分析第48-58页
     ·芍药花瓣 RNA 的纯化第48页
     ·ACS 基因保守区的 RT-PCR 扩增第48页
     ·芍药 ACS 基因保守区的克隆及鉴定第48-49页
     ·序列同源性分析第49-50页
     ·ACS 基因的 3’RACE 片段扩增第50页
     ·ACS 基因的 3’RACE 片段阳性鉴定第50-52页
     ·芍药 ACS 基因 5’端片段扩增第52页
     ·芍药 ACS 基因的 5’端片段阳性鉴定第52-54页
     ·芍药 ACS 基因 cDNA 全长序列的获得与序列分析第54-56页
     ·芍药 ACS 蛋白物理性质分析第56页
     ·芍药 ACS CDS 的 RT-PCR 扩增第56-57页
     ·芍药 ACS 基因编码区的阳性鉴定第57-58页
   ·讨论第58-59页
第5章 芍药花 ETR1 基因 CDNA 全长的克隆与分析第59-74页
   ·材料、仪器与试剂第59-60页
     ·材料第59页
     ·仪器第59页
     ·试剂第59页
     ·引物第59-60页
   ·方法第60-61页
     ·芍药花瓣 RNA 的提取与纯化第60页
     ·cDNA 合成第60页
     ·芍药 ETR1 基因 RT-PCR 扩增第60页
     ·PCR 产物凝胶回收及克隆第60页
     ·酶切鉴定第60页
     ·芍药 ETR1 基因的 3’ RACE 扩增第60页
     ·芍药 ETR1 基因的 5’ RACE 片段扩增第60-61页
     ·芍药 ETR1 基因拼接序列的获得及序列分析第61页
     ·芍药 ETR1 蛋白物理性质分析第61页
     ·芍药 ETR1 基因编码区(ETR1 CDS)的 RT-PCR 扩增第61页
     ·芍药 ETR1 CDS PCR 产物的回收、克隆、测序第61页
   ·结果与分析第61-73页
     ·芍药花瓣 RNA 的提取与纯化第61页
     ·芍药 ETR1 基因的 RT-PCR 体系建立第61-62页
     ·芍药 ETR1 基因 cDNA 阳性鉴定第62-63页
     ·序列同源性分析第63-64页
     ·ETR1 基因的 3’末端扩增第64页
     ·芍药 ETR1 基因的 3’末端片段阳性鉴定第64-66页
     ·芍药桃花飞雪 ETR1 基因的 5’末端扩增第66-67页
     ·芍药 ETR1 基因的 5’末端片段阳性鉴定第67-69页
     ·芍药 ETR1 基因 cDNA 全长序列获得与序列分析第69-71页
     ·芍药 ETR1 蛋白物理性质分析第71页
     ·芍药 ETR1 CDS 的 RT-PCR 扩增第71-72页
     ·芍药 ETR1 基因编码区的阳性鉴定第72-73页
   ·讨论第73-74页
第6章 芍药花 EIN3 基因 CDNA 全长的克隆与分析第74-90页
   ·材料、仪器与试剂第74-75页
     ·试材第74页
     ·仪器第74页
     ·试剂第74页
     ·引物合成第74-75页
   ·方法第75-76页
     ·芍药花瓣 RNA 的提取与纯化第75页
     ·cDNA 合成第75页
     ·芍药 EIN3 基因 RT-PCR 扩增第75页
     ·PCR 产物凝胶回收及克隆第75页
     ·酶切鉴定第75页
     ·芍药 EIN3 基因的 3’ RACE 扩增第75页
     ·芍药 EIN3 基因的 5’ RACE 扩增第75页
     ·芍药 EIN3 基因 cDNA 全长序列的获得及序列分析第75-76页
     ·芍药 EIN3 蛋白物理性质分析第76页
     ·芍药 EIN3 基因编码区的 RT-PCR 扩增第76页
     ·芍药 EIN3 CDS PCR 产物的回收、转化、阳性鉴定第76页
   ·结果与分析第76-89页
     ·芍药花瓣 RNA 的提取与纯化第76-77页
     ·芍药 EIN3 基因的 RT-PCR 体系建立第77页
     ·芍药 EIN3 基因 cDNA 的阳性鉴定第77-78页
     ·芍药 EIN3 基因的序列同源性分析第78-79页
     ·芍药 EIN3 基因的 3’末端扩增第79-80页
     ·芍药 EIN3 基因的 3’RACE 片段阳性鉴定第80-81页
     ·芍药 EIN3 基因的 5’RACE 片段扩增第81页
     ·EIN3 基因的 5’RACE 片段阳性鉴定第81-84页
     ·芍药 EIN3 基因 cDNA 全长序列的获得与序列分析第84-87页
     ·芍药 EIN3 蛋白物理性质分析第87页
     ·芍药 EIN3 CDS 的 RT-PCR 扩增第87页
     ·芍药 EIN3 基因编码区的阳性鉴定第87-89页
   ·讨论第89-90页
第7章 结论第90-92页
参考文献第92-101页
缩略语词汇表第101-102页
致谢第102-103页
攻读硕士学位期间的研究成果第103页

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