摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-23页 |
·芍药概述 | 第10页 |
·乙烯与切花衰老 | 第10-12页 |
·乙烯的生物合成 | 第12-13页 |
·乙烯代谢关键基因 | 第13-15页 |
·乙烯信号转导关键基因的克隆研究 | 第15-18页 |
·ETR1 基因 | 第16-17页 |
·EIN3 基因 | 第17-18页 |
·肌动蛋白基因 | 第18-19页 |
·RACE 技术 | 第19-21页 |
·RACE 技术原理 | 第19-20页 |
·反应中涉及到的一些事项 | 第20-21页 |
·研究目的和意义与技术路线 | 第21-23页 |
·研究目的和意义 | 第21-22页 |
·技术路线 | 第22-23页 |
第2章 芍药肌动蛋白基因的克隆与分析 | 第23-37页 |
·材料、仪器与试剂 | 第23-25页 |
·材料 | 第23页 |
·仪器 | 第23页 |
·试剂 | 第23页 |
·菌株与质粒 | 第23-24页 |
·主要试剂及配制方法 | 第24-25页 |
·方法 | 第25-28页 |
·芍药总 RNA 的提取及纯化 | 第25页 |
·引物设计 | 第25页 |
·cDNA 合成 | 第25页 |
·RT-PCR 扩增 | 第25-26页 |
·PCR 产物的回收、克隆及测序 | 第26-27页 |
·芍药肌动蛋白序列分析 | 第27页 |
·芍药肌动蛋白结构及性质预测 | 第27-28页 |
·半定量 RT-PCR 表达分析 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-35页 |
·芍药总 RNA 的提取及纯化 | 第28-29页 |
·Actin 基因的 RT-PCR 扩增 | 第29页 |
·Actin 基因的克隆及鉴定 | 第29-33页 |
·芍药肌动蛋白序列分析 | 第33页 |
·芍药肌动蛋白结构及物理性质预测 | 第33-34页 |
·半定量 RT-PCR 分析 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
第3章 芍药花 ACO 基因的克隆与分析 | 第37-43页 |
·材料与试剂 | 第37页 |
·材料 | 第37页 |
·试剂 | 第37页 |
·方法 | 第37-38页 |
·芍药花瓣 RNA 的提取及纯化 | 第37页 |
·引物设计 | 第37页 |
·cDNA 的合成 | 第37页 |
·RT-PCR 扩增 | 第37页 |
·PCR 产物的回收、克隆、测序 | 第37-38页 |
·芍药 ACO 蛋白序列分析、结构、性质预测 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-41页 |
·芍药花瓣 RNA 的纯化 | 第38页 |
·ACO 基因的 RT-PCR 扩增 | 第38-39页 |
·芍药 ACO 基因的克隆及鉴定 | 第39页 |
·序列同源性分析 | 第39-41页 |
·芍药 ACO 蛋白序列分析 | 第41页 |
·芍药 ACO 蛋白物理性质预测 | 第41页 |
·讨论 | 第41-43页 |
第4章 芍药花 ACS 基因 CDNA 全长的克隆与分析 | 第43-59页 |
·材料、仪器与试剂 | 第43-44页 |
·材料 | 第43页 |
·仪器 | 第43页 |
·试剂 | 第43页 |
·引物 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-48页 |
·芍药花瓣总 RNA 的提取及纯化 | 第44页 |
·cDNA 的合成 | 第44页 |
·RT-PCR 扩增 | 第44页 |
·PCR 产物的回收、克隆、测序 | 第44页 |
·芍药 ACS 基因 3’ RACE 扩增 | 第44-45页 |
·芍药 ACS 基因 5’ RACE 扩增 | 第45-47页 |
·芍药 ACS 基因拼接的 cDNA 全长序列获得及序列分析 | 第47页 |
·芍药 ACS 蛋白结构及性质预测 | 第47页 |
·芍药 ACS 基因编码区的 RT-PCR 扩增 | 第47-48页 |
·芍药 ACS CDS PCR 产物的回收、克隆、测序 | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-58页 |
·芍药花瓣 RNA 的纯化 | 第48页 |
·ACS 基因保守区的 RT-PCR 扩增 | 第48页 |
·芍药 ACS 基因保守区的克隆及鉴定 | 第48-49页 |
·序列同源性分析 | 第49-50页 |
·ACS 基因的 3’RACE 片段扩增 | 第50页 |
·ACS 基因的 3’RACE 片段阳性鉴定 | 第50-52页 |
·芍药 ACS 基因 5’端片段扩增 | 第52页 |
·芍药 ACS 基因的 5’端片段阳性鉴定 | 第52-54页 |
·芍药 ACS 基因 cDNA 全长序列的获得与序列分析 | 第54-56页 |
·芍药 ACS 蛋白物理性质分析 | 第56页 |
·芍药 ACS CDS 的 RT-PCR 扩增 | 第56-57页 |
·芍药 ACS 基因编码区的阳性鉴定 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
第5章 芍药花 ETR1 基因 CDNA 全长的克隆与分析 | 第59-74页 |
·材料、仪器与试剂 | 第59-60页 |
·材料 | 第59页 |
·仪器 | 第59页 |
·试剂 | 第59页 |
·引物 | 第59-60页 |
·方法 | 第60-61页 |
·芍药花瓣 RNA 的提取与纯化 | 第60页 |
·cDNA 合成 | 第60页 |
·芍药 ETR1 基因 RT-PCR 扩增 | 第60页 |
·PCR 产物凝胶回收及克隆 | 第60页 |
·酶切鉴定 | 第60页 |
·芍药 ETR1 基因的 3’ RACE 扩增 | 第60页 |
·芍药 ETR1 基因的 5’ RACE 片段扩增 | 第60-61页 |
·芍药 ETR1 基因拼接序列的获得及序列分析 | 第61页 |
·芍药 ETR1 蛋白物理性质分析 | 第61页 |
·芍药 ETR1 基因编码区(ETR1 CDS)的 RT-PCR 扩增 | 第61页 |
·芍药 ETR1 CDS PCR 产物的回收、克隆、测序 | 第61页 |
·结果与分析 | 第61-73页 |
·芍药花瓣 RNA 的提取与纯化 | 第61页 |
·芍药 ETR1 基因的 RT-PCR 体系建立 | 第61-62页 |
·芍药 ETR1 基因 cDNA 阳性鉴定 | 第62-63页 |
·序列同源性分析 | 第63-64页 |
·ETR1 基因的 3’末端扩增 | 第64页 |
·芍药 ETR1 基因的 3’末端片段阳性鉴定 | 第64-66页 |
·芍药桃花飞雪 ETR1 基因的 5’末端扩增 | 第66-67页 |
·芍药 ETR1 基因的 5’末端片段阳性鉴定 | 第67-69页 |
·芍药 ETR1 基因 cDNA 全长序列获得与序列分析 | 第69-71页 |
·芍药 ETR1 蛋白物理性质分析 | 第71页 |
·芍药 ETR1 CDS 的 RT-PCR 扩增 | 第71-72页 |
·芍药 ETR1 基因编码区的阳性鉴定 | 第72-73页 |
·讨论 | 第73-74页 |
第6章 芍药花 EIN3 基因 CDNA 全长的克隆与分析 | 第74-90页 |
·材料、仪器与试剂 | 第74-75页 |
·试材 | 第74页 |
·仪器 | 第74页 |
·试剂 | 第74页 |
·引物合成 | 第74-75页 |
·方法 | 第75-76页 |
·芍药花瓣 RNA 的提取与纯化 | 第75页 |
·cDNA 合成 | 第75页 |
·芍药 EIN3 基因 RT-PCR 扩增 | 第75页 |
·PCR 产物凝胶回收及克隆 | 第75页 |
·酶切鉴定 | 第75页 |
·芍药 EIN3 基因的 3’ RACE 扩增 | 第75页 |
·芍药 EIN3 基因的 5’ RACE 扩增 | 第75页 |
·芍药 EIN3 基因 cDNA 全长序列的获得及序列分析 | 第75-76页 |
·芍药 EIN3 蛋白物理性质分析 | 第76页 |
·芍药 EIN3 基因编码区的 RT-PCR 扩增 | 第76页 |
·芍药 EIN3 CDS PCR 产物的回收、转化、阳性鉴定 | 第76页 |
·结果与分析 | 第76-89页 |
·芍药花瓣 RNA 的提取与纯化 | 第76-77页 |
·芍药 EIN3 基因的 RT-PCR 体系建立 | 第77页 |
·芍药 EIN3 基因 cDNA 的阳性鉴定 | 第77-78页 |
·芍药 EIN3 基因的序列同源性分析 | 第78-79页 |
·芍药 EIN3 基因的 3’末端扩增 | 第79-80页 |
·芍药 EIN3 基因的 3’RACE 片段阳性鉴定 | 第80-81页 |
·芍药 EIN3 基因的 5’RACE 片段扩增 | 第81页 |
·EIN3 基因的 5’RACE 片段阳性鉴定 | 第81-84页 |
·芍药 EIN3 基因 cDNA 全长序列的获得与序列分析 | 第84-87页 |
·芍药 EIN3 蛋白物理性质分析 | 第87页 |
·芍药 EIN3 CDS 的 RT-PCR 扩增 | 第87页 |
·芍药 EIN3 基因编码区的阳性鉴定 | 第87-89页 |
·讨论 | 第89-90页 |
第7章 结论 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-101页 |
缩略语词汇表 | 第101-102页 |
致谢 | 第102-103页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第103页 |