摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-18页 |
第1章 绪论 | 第18-37页 |
·课题选取背景和目的及意义 | 第18-19页 |
·宫颈癌的发病机理与现状 | 第19-31页 |
·宫颈癌的发病因素 | 第19-21页 |
·宫颈癌的发病机理 | 第21-28页 |
·宫颈癌治疗的研究进展 | 第28-31页 |
·地锦草的药理作用 | 第31-35页 |
·地锦草研究现状 | 第31-32页 |
·黄酮类化合物抑制肿瘤作用的研究进展 | 第32-35页 |
·主要研究内容 | 第35-37页 |
第2章 地锦草黄酮醇的提取和特性分析 | 第37-48页 |
·引言 | 第37页 |
·试验材料 | 第37-38页 |
·药品和试剂 | 第38页 |
·主要试验仪器 | 第38页 |
·试验方法 | 第38-42页 |
·地锦草黄酮醇(EHWF)的提取 | 第38-40页 |
·地锦草黄酮醇(EHWF)的分析 | 第40-41页 |
·数据处理 | 第41-42页 |
·试验结果 | 第42-45页 |
·地锦草中黄酮醇(EHWF)的制备 | 第42页 |
·地锦草中黄酮醇(EHWF)的鉴定 | 第42-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
·地锦草中黄酮醇(EHWF)的提取 | 第45-46页 |
·地锦草中黄酮醇(EHWF)特性分析 | 第46-47页 |
·本章小结 | 第47-48页 |
第3章 地锦草黄酮醇体内抗小鼠宫颈癌作用的研究 | 第48-77页 |
·引言 | 第48-49页 |
·试验材料 | 第49-50页 |
·药品和试剂 | 第49页 |
·主要试验仪器 | 第49-50页 |
·试验动物和细胞株 | 第50页 |
·试验方法 | 第50-55页 |
·小鼠 U14 宫颈癌模型的建立 | 第50页 |
·最佳剂量的筛选 | 第50-51页 |
·试验分组和治疗方案 | 第51页 |
·小鼠急性毒性试验 | 第51页 |
·小鼠基本状态观察 | 第51页 |
·肿瘤生长抑制率的测定 | 第51-52页 |
·小鼠肝脏和肾脏的病理学分析 | 第52页 |
·小鼠血常规、肝功能和肾功能的检测 | 第52页 |
·EHWF 对宫颈癌小鼠免疫器官的影响 | 第52页 |
·小鼠非特异性和特异性免疫细胞活性测定(MTT 法) | 第52-53页 |
·流式细胞技术检测小鼠外周血 T 淋巴细胞亚群 | 第53-54页 |
·小鼠血清中 IL-2、TNF-α水平的测定 | 第54页 |
·小鼠肿瘤组织细胞形态学变化的观察 | 第54页 |
·小鼠肿瘤组织中 p53、Bcl-2、CerbB-2 和 Ki-67 的表达 | 第54页 |
·数据处理 | 第54-55页 |
·试验结果 | 第55-69页 |
·小鼠 U14 宫颈癌模型的建立 | 第55-56页 |
·EHWF 急性毒理试验和有效剂量结果 | 第56页 |
·小鼠一般状态观察 | 第56页 |
·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠肿瘤生长的影响 | 第56-57页 |
·小鼠肝脏、肾脏病理学检测结果 | 第57-58页 |
·血常规和肝肾功能的变化 | 第58-59页 |
·EHWF 对宫颈癌小鼠免疫器官的影响 | 第59-61页 |
·小鼠 NK 细胞活性的变化 | 第61-62页 |
·小鼠脾淋巴细胞增殖能力检测 | 第62-63页 |
·小鼠外周血 T 淋巴细胞亚群的变化 | 第63-64页 |
·小鼠血清中 IL-2、TNF-α的含量变化 | 第64-65页 |
·小鼠肿瘤组织的病理学观察 | 第65页 |
·肿瘤组织中突变型 p53、Bcl-2、CerbB-2 和 Ki-67 的表达 | 第65-69页 |
·讨论 | 第69-76页 |
·U14 宫颈癌小鼠模型评价 | 第69-70页 |
·EHWF 抑制 U14 宫颈癌小鼠肿瘤生长的作用 | 第70页 |
·EHWF 对小鼠胸腺指数、脾指数的影响 | 第70-71页 |
·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠非特异性免疫功能的影响 | 第71-72页 |
·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠细胞免疫功能的影响 | 第72页 |
·EHWF 对细胞因子 IL-2 和 TNF-α的影响 | 第72-73页 |
·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠肿瘤细胞形态学的影响 | 第73页 |
·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠肿瘤组织中突变型 p53、Bcl-2、CerbB-2 和 Ki-67基因表达的影响 | 第73-75页 |
·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠的毒副作用 | 第75-76页 |
·本章小结 | 第76-77页 |
第4章 地锦草黄酮醇诱导 U14 宫颈癌小鼠肿瘤细胞凋亡作用及其机理研究 | 第77-99页 |
·引言 | 第77-78页 |
·试验材料 | 第78-79页 |
·主要药品和试剂 | 第78-79页 |
·主要试验仪器 | 第79页 |
·细胞株和试验动物 | 第79页 |
·试验方法 | 第79-83页 |
·小鼠宫颈癌模型的建立和药物治疗 | 第79页 |
·计算肿瘤生长抑制率 | 第79页 |
·小鼠肿瘤组织细胞凋亡形态学的变化 | 第79-80页 |
·TUNEL 染色分析小鼠肿瘤组织细胞凋亡 | 第80页 |
·小鼠肿瘤细胞周期和细胞凋亡的检测 | 第80页 |
·免疫组化法检测小鼠肿瘤组织 Fas、Bax、C-myc 和 PKC 的表达 | 第80-81页 |
·肿瘤组织中 mRNA 的表达 | 第81页 |
·肿瘤组织中 Bcl-2、Bax、Fas、FasL、caspase-8 和 caspase-3 mRNA 表达 | 第81-83页 |
·肿瘤组织中 Bcl-2、Bax、caspase-8、caspase-3、CyclinD1 和 P16 的蛋白表达 | 第83页 |
·统计学数据处理 | 第83页 |
·试验结果 | 第83-94页 |
·EHWF 对小鼠体重和肿瘤生长的影响 | 第83-84页 |
·EHWF 对小鼠肿瘤细胞凋亡形态学的影响 | 第84-85页 |
·小鼠肿瘤组织细胞凋亡检测 | 第85-86页 |
·EHWF 对小鼠肿瘤组织细胞周期的影响 | 第86-87页 |
·免疫组化法检测肿瘤组织中 Fas、Bax、C-myc 和 PKC 表达 | 第87-90页 |
·小鼠肿瘤组织的总 RNA 提取和分析 | 第90页 |
·肿瘤组织中 Bcl-2、Bax、Fas、FasL、caspase-8 和 caspase-3 mRNA 表达 | 第90-91页 |
·肿瘤组织中 Bcl-2、Bax、caspase-8、caspase-3、CyclinD1 和 P16 蛋白表达 | 第91-94页 |
·讨论 | 第94-97页 |
·EHWF 诱导 U14 肿瘤小鼠细胞凋亡的形态学变化 | 第94页 |
·EHWF 对 U14 肿瘤小鼠细胞周期的影响 | 第94-95页 |
·EHWF 诱导肿瘤细胞凋亡的分子机理 | 第95-97页 |
·本章小结 | 第97-99页 |
第5章 地锦草黄酮醇诱导人宫颈癌 Hela 细胞凋亡的机理研究 | 第99-120页 |
·引言 | 第99页 |
·材料与仪器 | 第99-101页 |
·细胞株 | 第99-100页 |
·试剂和药品 | 第100页 |
·主要仪器设备 | 第100页 |
·试剂与配制 | 第100-101页 |
·试验方法 | 第101-105页 |
·细胞培养与制备 | 第101页 |
·Hela 细胞增殖活性的 MTT 法检测 | 第101-102页 |
·苏木精-伊红染色(H.E. staining)观察 Hela 细胞的形态学特征 | 第102页 |
·Hoechst 33342 荧光单染试验 | 第102页 |
·AO/EB 荧光双染试验 | 第102-103页 |
·电镜观察 Hela 细胞的凋亡 | 第103页 |
·Annexin V-FITC 染色检测 Hela 细胞凋亡 | 第103页 |
·Hela 细胞 DNA Ladder 分析 | 第103-104页 |
·EHWF 对 Hela 细胞周期的影响 | 第104页 |
·比色法检测 Caspase-8 和 Caspase-3 活性的变化 | 第104页 |
·Western blot 法测定 Bcl-2、Bax、CylinD1 和 P16 蛋白的表达 | 第104-105页 |
·数据处理 | 第105页 |
·试验结果 | 第105-114页 |
·EHWF 对抑制 Hela 细胞增殖的作用 | 第105-106页 |
·HE 光镜观察 EHWF 诱导 Hela 细胞凋亡的形态学特征 | 第106-107页 |
·荧光单染法检测 Hela 细胞凋亡 | 第107-108页 |
·荧光双染法观察 Hela 细胞凋亡 | 第108-109页 |
·Hela 细胞凋亡的显微结构变化 | 第109页 |
·Hela 细胞经 Annexin V -FITC 染色后流式细胞仪检测结果 | 第109-110页 |
·Hela 细胞 DNA 片段化分析结果 | 第110页 |
·Hela 细胞周期检测结果 | 第110-111页 |
·EHWF 对 Caspase-8 和 Caspase-3 活性的影响 | 第111-113页 |
·细胞凋亡相关基因 Bcl-2、Bax、CylinD1 和 P16 蛋白的表达 | 第113-114页 |
·讨论 | 第114-119页 |
·EHWF 对 Hela 细胞增殖能力的影响 | 第115页 |
·EHWF 诱导 Hela 细胞凋亡形态学变化 | 第115-116页 |
·EHWF 诱导 Hela 细胞凋亡结果评价 | 第116-117页 |
·凋亡细胞 DNA 片断分析 | 第117页 |
·EHWF 对 Hela 细胞周期的影响 | 第117-118页 |
·EHWF 诱导 Hela 细胞凋亡的分子机制 | 第118-119页 |
·本章小结 | 第119-120页 |
结论 | 第120-121页 |
参考文献 | 第121-145页 |
附录 | 第145-147页 |
攻读博士学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第147-149页 |
致谢 | 第149-150页 |
作者简介 | 第150页 |