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地锦草黄酮醇抗肿瘤作用及其机理的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-18页
第1章 绪论第18-37页
   ·课题选取背景和目的及意义第18-19页
   ·宫颈癌的发病机理与现状第19-31页
     ·宫颈癌的发病因素第19-21页
     ·宫颈癌的发病机理第21-28页
     ·宫颈癌治疗的研究进展第28-31页
   ·地锦草的药理作用第31-35页
     ·地锦草研究现状第31-32页
     ·黄酮类化合物抑制肿瘤作用的研究进展第32-35页
   ·主要研究内容第35-37页
第2章 地锦草黄酮醇的提取和特性分析第37-48页
   ·引言第37页
   ·试验材料第37-38页
     ·药品和试剂第38页
     ·主要试验仪器第38页
   ·试验方法第38-42页
     ·地锦草黄酮醇(EHWF)的提取第38-40页
     ·地锦草黄酮醇(EHWF)的分析第40-41页
     ·数据处理第41-42页
   ·试验结果第42-45页
     ·地锦草中黄酮醇(EHWF)的制备第42页
     ·地锦草中黄酮醇(EHWF)的鉴定第42-45页
   ·讨论第45-47页
     ·地锦草中黄酮醇(EHWF)的提取第45-46页
     ·地锦草中黄酮醇(EHWF)特性分析第46-47页
   ·本章小结第47-48页
第3章 地锦草黄酮醇体内抗小鼠宫颈癌作用的研究第48-77页
   ·引言第48-49页
   ·试验材料第49-50页
     ·药品和试剂第49页
     ·主要试验仪器第49-50页
     ·试验动物和细胞株第50页
   ·试验方法第50-55页
     ·小鼠 U14 宫颈癌模型的建立第50页
     ·最佳剂量的筛选第50-51页
     ·试验分组和治疗方案第51页
     ·小鼠急性毒性试验第51页
     ·小鼠基本状态观察第51页
     ·肿瘤生长抑制率的测定第51-52页
     ·小鼠肝脏和肾脏的病理学分析第52页
     ·小鼠血常规、肝功能和肾功能的检测第52页
     ·EHWF 对宫颈癌小鼠免疫器官的影响第52页
     ·小鼠非特异性和特异性免疫细胞活性测定(MTT 法)第52-53页
     ·流式细胞技术检测小鼠外周血 T 淋巴细胞亚群第53-54页
     ·小鼠血清中 IL-2、TNF-α水平的测定第54页
     ·小鼠肿瘤组织细胞形态学变化的观察第54页
     ·小鼠肿瘤组织中 p53、Bcl-2、CerbB-2 和 Ki-67 的表达第54页
     ·数据处理第54-55页
   ·试验结果第55-69页
     ·小鼠 U14 宫颈癌模型的建立第55-56页
     ·EHWF 急性毒理试验和有效剂量结果第56页
     ·小鼠一般状态观察第56页
     ·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠肿瘤生长的影响第56-57页
     ·小鼠肝脏、肾脏病理学检测结果第57-58页
     ·血常规和肝肾功能的变化第58-59页
     ·EHWF 对宫颈癌小鼠免疫器官的影响第59-61页
     ·小鼠 NK 细胞活性的变化第61-62页
     ·小鼠脾淋巴细胞增殖能力检测第62-63页
     ·小鼠外周血 T 淋巴细胞亚群的变化第63-64页
     ·小鼠血清中 IL-2、TNF-α的含量变化第64-65页
     ·小鼠肿瘤组织的病理学观察第65页
     ·肿瘤组织中突变型 p53、Bcl-2、CerbB-2 和 Ki-67 的表达第65-69页
   ·讨论第69-76页
     ·U14 宫颈癌小鼠模型评价第69-70页
     ·EHWF 抑制 U14 宫颈癌小鼠肿瘤生长的作用第70页
     ·EHWF 对小鼠胸腺指数、脾指数的影响第70-71页
     ·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠非特异性免疫功能的影响第71-72页
     ·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠细胞免疫功能的影响第72页
     ·EHWF 对细胞因子 IL-2 和 TNF-α的影响第72-73页
     ·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠肿瘤细胞形态学的影响第73页
     ·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠肿瘤组织中突变型 p53、Bcl-2、CerbB-2 和 Ki-67基因表达的影响第73-75页
     ·EHWF 对 U14 宫颈癌小鼠的毒副作用第75-76页
   ·本章小结第76-77页
第4章 地锦草黄酮醇诱导 U14 宫颈癌小鼠肿瘤细胞凋亡作用及其机理研究第77-99页
   ·引言第77-78页
   ·试验材料第78-79页
     ·主要药品和试剂第78-79页
     ·主要试验仪器第79页
     ·细胞株和试验动物第79页
   ·试验方法第79-83页
     ·小鼠宫颈癌模型的建立和药物治疗第79页
     ·计算肿瘤生长抑制率第79页
     ·小鼠肿瘤组织细胞凋亡形态学的变化第79-80页
     ·TUNEL 染色分析小鼠肿瘤组织细胞凋亡第80页
     ·小鼠肿瘤细胞周期和细胞凋亡的检测第80页
     ·免疫组化法检测小鼠肿瘤组织 Fas、Bax、C-myc 和 PKC 的表达第80-81页
     ·肿瘤组织中 mRNA 的表达第81页
     ·肿瘤组织中 Bcl-2、Bax、Fas、FasL、caspase-8 和 caspase-3 mRNA 表达第81-83页
     ·肿瘤组织中 Bcl-2、Bax、caspase-8、caspase-3、CyclinD1 和 P16 的蛋白表达第83页
     ·统计学数据处理第83页
   ·试验结果第83-94页
     ·EHWF 对小鼠体重和肿瘤生长的影响第83-84页
     ·EHWF 对小鼠肿瘤细胞凋亡形态学的影响第84-85页
     ·小鼠肿瘤组织细胞凋亡检测第85-86页
     ·EHWF 对小鼠肿瘤组织细胞周期的影响第86-87页
     ·免疫组化法检测肿瘤组织中 Fas、Bax、C-myc 和 PKC 表达第87-90页
     ·小鼠肿瘤组织的总 RNA 提取和分析第90页
     ·肿瘤组织中 Bcl-2、Bax、Fas、FasL、caspase-8 和 caspase-3 mRNA 表达第90-91页
     ·肿瘤组织中 Bcl-2、Bax、caspase-8、caspase-3、CyclinD1 和 P16 蛋白表达第91-94页
   ·讨论第94-97页
     ·EHWF 诱导 U14 肿瘤小鼠细胞凋亡的形态学变化第94页
     ·EHWF 对 U14 肿瘤小鼠细胞周期的影响第94-95页
     ·EHWF 诱导肿瘤细胞凋亡的分子机理第95-97页
   ·本章小结第97-99页
第5章 地锦草黄酮醇诱导人宫颈癌 Hela 细胞凋亡的机理研究第99-120页
   ·引言第99页
   ·材料与仪器第99-101页
     ·细胞株第99-100页
     ·试剂和药品第100页
     ·主要仪器设备第100页
     ·试剂与配制第100-101页
   ·试验方法第101-105页
     ·细胞培养与制备第101页
     ·Hela 细胞增殖活性的 MTT 法检测第101-102页
     ·苏木精-伊红染色(H.E. staining)观察 Hela 细胞的形态学特征第102页
     ·Hoechst 33342 荧光单染试验第102页
     ·AO/EB 荧光双染试验第102-103页
     ·电镜观察 Hela 细胞的凋亡第103页
     ·Annexin V-FITC 染色检测 Hela 细胞凋亡第103页
     ·Hela 细胞 DNA Ladder 分析第103-104页
     ·EHWF 对 Hela 细胞周期的影响第104页
     ·比色法检测 Caspase-8 和 Caspase-3 活性的变化第104页
     ·Western blot 法测定 Bcl-2、Bax、CylinD1 和 P16 蛋白的表达第104-105页
     ·数据处理第105页
   ·试验结果第105-114页
     ·EHWF 对抑制 Hela 细胞增殖的作用第105-106页
     ·HE 光镜观察 EHWF 诱导 Hela 细胞凋亡的形态学特征第106-107页
     ·荧光单染法检测 Hela 细胞凋亡第107-108页
     ·荧光双染法观察 Hela 细胞凋亡第108-109页
     ·Hela 细胞凋亡的显微结构变化第109页
     ·Hela 细胞经 Annexin V -FITC 染色后流式细胞仪检测结果第109-110页
     ·Hela 细胞 DNA 片段化分析结果第110页
     ·Hela 细胞周期检测结果第110-111页
     ·EHWF 对 Caspase-8 和 Caspase-3 活性的影响第111-113页
     ·细胞凋亡相关基因 Bcl-2、Bax、CylinD1 和 P16 蛋白的表达第113-114页
   ·讨论第114-119页
     ·EHWF 对 Hela 细胞增殖能力的影响第115页
     ·EHWF 诱导 Hela 细胞凋亡形态学变化第115-116页
     ·EHWF 诱导 Hela 细胞凋亡结果评价第116-117页
     ·凋亡细胞 DNA 片断分析第117页
     ·EHWF 对 Hela 细胞周期的影响第117-118页
     ·EHWF 诱导 Hela 细胞凋亡的分子机制第118-119页
   ·本章小结第119-120页
结论第120-121页
参考文献第121-145页
附录第145-147页
攻读博士学位期间承担的科研任务与主要成果第147-149页
致谢第149-150页
作者简介第150页

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