| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-13页 |
| ·大肠杆菌为宿主的外源蛋白表达 | 第8-9页 |
| ·大肠杆菌作为外源蛋白表达宿主的优势 | 第8页 |
| ·大肠杆菌的外源蛋白产品 | 第8-9页 |
| ·大肠杆菌的糖代谢与外源蛋白表达 | 第9-12页 |
| ·糖代谢的意义 | 第9-10页 |
| ·糖酵解与外源蛋白表达 | 第10-12页 |
| ·立题意义与研究内容 | 第12-13页 |
| 第二章 材料与方法 | 第13-20页 |
| ·材料 | 第13-15页 |
| ·菌株与质粒 | 第13页 |
| ·寡核苷酸引物 | 第13-14页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14-15页 |
| ·质粒提取试剂 | 第15页 |
| ·主要仪器 | 第15页 |
| ·方法 | 第15-20页 |
| ·解淀粉芽孢杆菌基因组的提取 | 第15-16页 |
| ·解淀粉芽孢杆菌 -甘露聚糖酶基因的扩增 | 第16页 |
| ·解淀粉芽孢杆菌脱支酶基因的扩增 | 第16页 |
| ·大肠杆菌中质粒的大量提取 | 第16-17页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞转化 | 第17页 |
| ·大肠杆菌的电击转化 | 第17页 |
| ·目标基因的删除 | 第17页 |
| ·重组大肠杆菌发酵实验 | 第17-18页 |
| ·-甘露聚糖酶粗酶液的制备及酶活力测定 | 第18页 |
| ·脱支酶粗酶液的制备及酶活力测定 | 第18页 |
| ·葡萄糖及有机酸浓度测定 | 第18页 |
| ·菌体密度测定 | 第18页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第18页 |
| ·发酵参数计算 | 第18-19页 |
| ·其他细胞培养和分子操作 | 第19-20页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第20-43页 |
| ·大肠杆菌 B0013/pEtac-man 产酶特征 | 第20-21页 |
| ·-甘露聚糖酶重组质粒 pEtac-man 的构建 | 第20页 |
| ·大肠杆菌 B0013/pEtac-man 的产酶分析 | 第20-21页 |
| ·糖酵解分支代谢途径的基因删除对外源蛋白表达的影响 | 第21-36页 |
| ·乳酸合成途径基因删除对大肠杆菌外源蛋白表达影响 | 第22-24页 |
| ·乙酸合成途径基因删除对大肠杆菌外源蛋白表达影响 | 第24-26页 |
| ·甲酸合成途径基因删除对大肠杆菌外源蛋白表达影响 | 第26-28页 |
| ·乙醇合成途径基因删除对大肠杆菌外源蛋白表达影响 | 第28-29页 |
| ·PEP 合成途径基因删除对大肠杆菌外源蛋白表达影响 | 第29-31页 |
| ·琥珀酸合成途径基因删除对大肠杆菌外源蛋白表达影响 | 第31-33页 |
| ·丙酮酸氧化途径基因删除对大肠杆菌外源蛋白表达影响 | 第33-36页 |
| ·基因删除组合对大肠杆菌外源蛋白表达的影响 | 第36-40页 |
| ·基因 ldhA 与 pflB 删除组合对外源蛋白表达的影响 | 第36-37页 |
| ·基因 ldhA、pflB 和 pps 删除组合对外源蛋白表达的影响 | 第37-38页 |
| ·基因 ldhA、pflB、pps 和 poxB 删除组合对外源蛋白表达的影响 | 第38-40页 |
| ·菌株 B0013-213/pKK223-3-isa 产酶性能验证 | 第40-43页 |
| ·脱支酶重组质粒 pKK223-3-isa 的构建 | 第40-41页 |
| ·菌株 B0013-213/pKK223-3-isa 产酶性能 | 第41-43页 |
| 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| 主要结论 | 第43-44页 |
| 展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录 | 第50页 |
