| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 1 前言 | 第14-24页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒的研究进展 | 第14-18页 |
| ·TGEV 的形态结构 | 第14-15页 |
| ·TGEV 的培养特性和理化特性 | 第15页 |
| ·TGEV 的结构蛋白与功能 | 第15-17页 |
| ·N 蛋白作为靶物质的优势 | 第17-18页 |
| ·猪传染性胃肠炎流行病学研究进展 | 第18页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒诊断方法 | 第18-20页 |
| ·TGEV 常规诊断方法 | 第18-20页 |
| ·TGEV 分子生物学诊断方法 | 第20页 |
| ·免疫胶体金概述 | 第20-23页 |
| ·免疫胶体金技术的原理 | 第21页 |
| ·免疫胶体金技术的主要特点 | 第21页 |
| ·免疫胶体金在兽医快速检测中的应用 | 第21-23页 |
| ·研究目的与意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-33页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·细胞与病毒 | 第24页 |
| ·免疫原及动物 | 第24页 |
| ·主要试剂和溶液 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·方法 | 第26-33页 |
| ·TGEV N 蛋白单抗腹水的制备与纯化 | 第26-27页 |
| ·兔抗 TGEV N 蛋白多克隆抗体的制备与纯化 | 第27-28页 |
| ·病毒蛋白裂解液制备及双抗体夹心法初步应用 | 第28页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 方法建立及优化 | 第28-29页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 方法初步评价 | 第29页 |
| ·免疫胶体金颗粒的制备与纯化 | 第29-30页 |
| ·胶体金试纸条的制备 | 第30-31页 |
| ·胶体金试纸条各种反应条件的优化及性能评价 | 第31-32页 |
| ·病毒蛋白裂解液优化及在试纸条上应用 | 第32-33页 |
| 3 结果 | 第33-49页 |
| ·TGEV N 蛋白单抗的纯化结果 | 第33页 |
| ·抗 TGEV N 蛋白多克隆抗血清的制备和纯化结果 | 第33-35页 |
| ·重组 TGEV N 蛋白在大肠杆菌的表达及纯化结果 | 第33-35页 |
| ·抗猪传染性胃肠炎病毒多克隆抗血清的纯化结果 | 第35页 |
| ·病毒蛋白裂解液在双抗体夹心 ELISA 方法初步应用 | 第35-36页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 方法建立及优化结果 | 第36-37页 |
| ·最佳反应条件的确定 | 第36页 |
| ·ELISA 判定标准的确定 | 第36-37页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 方法初步评价结果 | 第37-39页 |
| ·特异性试验 | 第37页 |
| ·灵敏性试验 | 第37-38页 |
| ·重复性试验 | 第38页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 检测方法与 RT-PCR 试验的比较结果 | 第38-39页 |
| ·胶体金和金标抗体的质量鉴定结果 | 第39-40页 |
| ·胶体金颗粒的质量鉴定 | 第39-40页 |
| ·金标抗体的鉴定 | 第40页 |
| ·金标抗体制备过程中条件的确定结果 | 第40-41页 |
| ·胶体金标记抗体最适量的确定 | 第40-41页 |
| ·单抗与胶体金结合最佳 pH 测定 | 第41页 |
| ·免疫胶体金试纸条各种反应条件优化及性能评价结果 | 第41-47页 |
| ·硝酸纤维素薄膜的选择结果 | 第41-42页 |
| ·玻璃纤维素膜的选择结果 | 第42页 |
| ·样品垫和吸水纸的选择结果 | 第42-43页 |
| ·封闭剂处理结果和封闭时间的选择结果 | 第43-44页 |
| ·金标稀释液最佳量的选择结果 | 第44页 |
| ·特异性实验结果 | 第44-45页 |
| ·稳定性实验结果 | 第45页 |
| ·重复性实验结果 | 第45-46页 |
| ·临床样品检测结果 | 第46-47页 |
| ·病毒蛋白裂解液在试纸条上应用结果 | 第47-48页 |
| ·病毒蛋白裂解液在成品试纸条上应用结果 | 第47页 |
| ·病毒蛋白裂解液在自制试纸条上应用结果 | 第47-48页 |
| ·临床样品在试纸条上应用结果 | 第48-49页 |
| ·临床样品在成品试纸条上应用结果 | 第48页 |
| ·临床样品在自制试纸条上应用结果 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-54页 |
| ·关于双抗体夹心 ELISA 方法 | 第49-50页 |
| ·抗体 IgG 的纯化和选择 | 第49页 |
| ·双抗体夹心 ELISA 方法判定标准的选择 | 第49-50页 |
| ·裂解液的选择及其影响因素 | 第50页 |
| ·金颗粒的制备与标记过程中的影响因素 | 第50-51页 |
| ·试纸条的制作 | 第51-52页 |
| ·试纸条材料的选择 | 第51-52页 |
| ·试纸条优化试剂的选择 | 第52页 |
| ·胶体金免疫层析试纸条在检测 TGEV 的潜在应用价值 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 附录 | 第63-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65页 |
