草酸青霉产β-葡萄糖苷酶发酵条件优化及其基因克隆的初步研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 前言 | 第9-19页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的来源 | 第9-10页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分类和结构 | 第10-11页 |
| ·β-葡萄糖苷酶活性的测定 | 第11页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分离纯化及理化性质 | 第11-13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分离纯化 | 第11-12页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的分子量大小及组成 | 第12页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的最适pH 及pI 值 | 第12-13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的最适反应温度及热稳定性 | 第13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的活性结构中心 | 第13页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的催化机理 | 第13-14页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的底物特异性 | 第14页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的应用 | 第14-17页 |
| ·降解纤维素 | 第14-15页 |
| ·风味酶 | 第15页 |
| ·脱苦 | 第15-16页 |
| ·大豆异黄酮 | 第16页 |
| ·栀子蓝和栀子红色素 | 第16页 |
| ·低聚龙胆糖 | 第16页 |
| ·防治病虫害 | 第16-17页 |
| ·其他 | 第17页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因的克隆与表达 | 第17-18页 |
| ·立题的背景及意义 | 第18页 |
| ·本课题的研究内容 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-35页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·供试菌种 | 第19页 |
| ·主要培养基 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器设备 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-35页 |
| ·产酶菌株的筛选 | 第20-21页 |
| ·酶活的测定 | 第21页 |
| ·发酵条件的优化 | 第21-22页 |
| ·酶学性质的研究 | 第22-23页 |
| ·β-葡萄糖苷酶基因的克隆 | 第23-35页 |
| 3 结果与讨论 | 第35-57页 |
| ·β-葡萄糖苷酶高产菌株的筛选 | 第35-36页 |
| ·初筛结果 | 第35页 |
| ·复筛结果 | 第35-36页 |
| ·小结 | 第36页 |
| ·青霉发酵产酶条件优化 | 第36-42页 |
| ·产酶曲线 | 第36-37页 |
| ·液体发酵培养基主要成分的优化 | 第37-39页 |
| ·液体发酵条件的优化 | 第39-40页 |
| ·均匀设计优化 | 第40-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| ·β-葡萄糖苷酶的酶学性质 | 第42-45页 |
| ·酶反应的最适pH | 第42页 |
| ·酶的pH 稳定性 | 第42-43页 |
| ·酶反应的最适温度 | 第43页 |
| ·酶的热稳定性 | 第43-44页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第44页 |
| ·有机溶剂对酶活性的影响 | 第44-45页 |
| ·小结 | 第45页 |
| ·草酸青霉中β-葡萄糖苷酶的基因克隆 | 第45-57页 |
| ·中间片段的扩增 | 第45-48页 |
| ·试剂盒进行5’-/3’-RACE | 第48-49页 |
| ·常规方法进行5’-/3’-PCR | 第49-51页 |
| ·GENOME WALKING 法扩增两端的基因 | 第51-56页 |
| ·β-葡萄糖苷酶全长基因的克隆 | 第56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 5 展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第64-66页 |
