| 中文摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-16页 |
| ·小麦赤霉病的研究进展 | 第10-11页 |
| ·小麦赤霉病在国内外的首次记载 | 第10页 |
| ·小麦赤霉菌基因功能的研究 | 第10-11页 |
| ·小麦赤霉菌的生物学特征 | 第11-12页 |
| ·小麦赤霉菌毒素 | 第12-13页 |
| ·小麦赤霉病病害 | 第13-14页 |
| ·FgCPKR 基因研究背景 | 第14页 |
| ·研究意义 | 第14-16页 |
| 2 FgCPKR 基因敲除盒的构建 | 第16-29页 |
| ·材料、主要试剂及培养基配方和仪器 | 第16-18页 |
| ·材料 | 第16页 |
| ·主要试剂及培养基配方 | 第16-18页 |
| ·仪器 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-25页 |
| ·CTAB 法提取野生型 PH-1 的基因组 DNA | 第18-19页 |
| ·质粒 pCB1003 DNA 的提取 | 第19-21页 |
| ·大肠杆菌 DH5α的划线培养 | 第19页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌 DH5α与质粒 pCB1003 的转化 | 第20页 |
| ·质粒 pCB1003 的单菌落的菌液培养 | 第20页 |
| ·质粒 pCB1003 的 DNA 提取 | 第20-21页 |
| ·FgCPKR 基因敲除盒的构建—Split Marker 法 | 第21-25页 |
| ·Split Marker 法技术流程 | 第21-22页 |
| ·FgCPKR 基因及相关引物设计 | 第22-23页 |
| ·FgCPKR 基因敲除盒构建过程 | 第23-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-27页 |
| ·野生型菌株 PH-1 基因组 DNA 的获得 | 第25页 |
| ·质粒 pCB1003 的获得 | 第25-26页 |
| ·Split Marker 法构建 FgCPKR 基因敲除盒 | 第26-27页 |
| ·PCR 扩增 FgCPKR 基因上、下游序列 | 第26页 |
| ·PCR 扩增 hph 基因上、下游序列 | 第26-27页 |
| ·重叠 PCR 扩增 Split-marker 重组片段 | 第27页 |
| ·结论 | 第27-29页 |
| 3 FgCPKR 基因敲除和转化子的鉴定 | 第29-39页 |
| ·材料、主要试剂及培养基配方和仪器 | 第29-30页 |
| ·材料 | 第29页 |
| ·主要试剂及培养基配方 | 第29-30页 |
| ·仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-34页 |
| ·野生型菌株 PH-1 原生质体的制备与转化 | 第30-31页 |
| ·原生质体的制备 | 第30-31页 |
| ·原生质体的转化 | 第31页 |
| ·缺失突变体的筛选和鉴定 | 第31-34页 |
| ·潮霉素初筛 | 第31-32页 |
| ·单孢分离 | 第32页 |
| ·缺失突变体的 PCR 筛选 | 第32-34页 |
| ·结果与分析 | 第34-37页 |
| ·原生质体的制备 | 第34-35页 |
| ·原生质体的转化 | 第35页 |
| ·筛选鉴定获得 3 个阳性 FgCPKR 缺失突变体 | 第35-37页 |
| ·缺失突变体的 PCR 负筛选 | 第35-36页 |
| ·缺失突变体的 PCR 正筛选 | 第36-37页 |
| ·菌种保存 | 第37-38页 |
| ·结论 | 第38-39页 |
| 4 FgCPKR 缺失突变体表型观察和致病力检测 | 第39-49页 |
| ·材料、主要试剂及培养基配方和仪器 | 第39页 |
| ·材料 | 第39页 |
| ·主要试剂及培养基配方 | 第39页 |
| ·仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·菌落形态观察 | 第39页 |
| ·菌落生长速度测定 | 第39-40页 |
| ·分生孢子形态及产孢量观察 | 第40页 |
| ·菌株培养滤液颜色观察 | 第40页 |
| ·小麦赤霉菌的温度敏感实验 | 第40页 |
| ·有性杂交实验 | 第40-41页 |
| ·玉米丝侵染实验 | 第41页 |
| ·小麦花期侵染实验 | 第41页 |
| ·玉米秸秆侵染实验 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-48页 |
| ·菌落形态变化 | 第41-42页 |
| ·菌落生长速度测定 | 第42-43页 |
| ·分生孢子形态及产孢量观察 | 第43-44页 |
| ·菌株培养滤液颜色变化 | 第44页 |
| ·小麦赤霉菌的温度敏感实验 | 第44-45页 |
| ·有性杂交实验 | 第45-46页 |
| ·FgCPKR 缺失突变体对玉米和小麦的致病力下降 | 第46-48页 |
| ·室内玉米丝侵染实验 | 第46页 |
| ·室外小麦穗侵染实验 | 第46-47页 |
| ·室外玉米秆侵染实验 | 第47-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 5 结论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 附录 1 | 第57-60页 |
| 附录 2 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61页 |
