迟钝爱德华氏菌EsrB突变体对T3SS和T6SS的差异性调控
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·水产养殖业病害 | 第11页 |
| ·迟钝爱德华氏菌的危害及防治 | 第11-12页 |
| ·迟钝爱德华氏菌的危害 | 第11-12页 |
| ·迟钝爱德华氏菌的检测与防治 | 第12页 |
| ·迟钝爱德华氏菌的主要毒力因子 | 第12-15页 |
| ·Ⅲ型分泌系统 | 第12-14页 |
| ·Ⅵ型分泌系统 | 第14-15页 |
| ·溶血素 | 第15页 |
| ·EsrA-EsrB双组分系统 | 第15-16页 |
| ·相关的重要调控元件 | 第16-20页 |
| ·PhoP-PhoQ双组分系统 | 第16-17页 |
| ·转录激活因子 | 第17页 |
| ·铁摄取调控蛋白 | 第17-18页 |
| ·未知的调控元件 | 第18-20页 |
| ·课题研究内容与意义 | 第20-21页 |
| 第2章 esrB回补株和替代株的构建 | 第21-33页 |
| ·前言 | 第21页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·菌株、质粒与引物 | 第21-22页 |
| ·培养基与溶液 | 第22-23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·钙转感受态的制备及转化 | 第23页 |
| ·电转感受态的制备及转化 | 第23-24页 |
| ·易错PCR | 第24-25页 |
| ·回补株和替代株的构建 | 第25页 |
| ·自动聚集实验 | 第25页 |
| ·回补株中EvpC蛋白的检测 | 第25-26页 |
| ·同源建模 | 第26页 |
| ·实验结果 | 第26-29页 |
| ·回补株的验证 | 第26页 |
| ·替代株的突变位点与突变频率 | 第26-27页 |
| ·EsrB的同源建模分析 | 第27-29页 |
| ·讨论 | 第29-32页 |
| ·本章小结 | 第32-33页 |
| 第3章 esrB替代株的筛选 | 第33-43页 |
| ·前言 | 第33页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·实验试剂 | 第33页 |
| ·菌株 | 第33页 |
| ·培养基与溶液 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-35页 |
| ·血平板溶血活性检测 | 第34页 |
| ·动态溶血活性测定 | 第34-35页 |
| ·酶联免疫吸附 | 第35页 |
| ·同源建模 | 第35页 |
| ·实验结果 | 第35-39页 |
| ·血平板溶血活性检测 | 第35页 |
| ·替代株的毒力蛋白表达能力 | 第35-37页 |
| ·动态溶血活性测定 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| ·本章小结 | 第41-43页 |
| 第4章 T6SS缺失株的构建 | 第43-51页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·实验材料 | 第43-44页 |
| ·实验试剂 | 第43-44页 |
| ·菌株、质粒与引物 | 第44页 |
| ·实验方法 | 第44-46页 |
| ·同源臂的构建 | 第44-45页 |
| ·接合 | 第45-46页 |
| ·双交换及验证 | 第46页 |
| ·胞外蛋白抽提与检测 | 第46页 |
| ·实验结果 | 第46-47页 |
| ·PCR验证 | 第46-47页 |
| ·胞外蛋白谱 | 第47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| ·本章小结 | 第49-51页 |
| 第5章 各菌株对大菱鲆的致病能力 | 第51-58页 |
| ·前言 | 第51页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-53页 |
| ·各菌株对大菱鲆的毒力 | 第51-52页 |
| ·各菌株的感染动力学 | 第52-53页 |
| ·实验结果 | 第53-54页 |
| ·各菌株对大菱鲆的毒力 | 第53页 |
| ·各菌株的感染动力学 | 第53-54页 |
| ·讨论 | 第54-57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 第6章 各菌株致病机制的比较 | 第58-68页 |
| ·前言 | 第58页 |
| ·实验材料 | 第58-59页 |
| ·实验试剂 | 第58-59页 |
| ·菌株、质粒与引物 | 第59页 |
| ·培养基与溶液 | 第59页 |
| ·实验方法 | 第59-61页 |
| ·荧光定量PCR | 第59-60页 |
| ·巨噬细胞内的存活复制 | 第60-61页 |
| ·巨噬细胞内荧光标记菌株的存活复制 | 第61页 |
| ·实验结果 | 第61-64页 |
| ·胞外蛋白谱 | 第61-62页 |
| ·致病基因的转录水平 | 第62-64页 |
| ·巨噬细胞内的存活复制 | 第64页 |
| ·巨噬细胞内荧光标记菌株的存活复制 | 第64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第7章 结论与展望 | 第68-70页 |
| ·主要结论 | 第68页 |
| ·展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
