| 中文摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 符号说明 | 第15-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-45页 |
| 1 植物生长素的研究进展 | 第17-29页 |
| ·植物激素的概念及其发现 | 第17-18页 |
| ·生长素的特点 | 第18-19页 |
| ·生长素的存在形式 | 第19-20页 |
| ·生长素在植物体内的分布与运输 | 第20-21页 |
| ·生长素的生理效应 | 第21-22页 |
| ·生长素的代谢 | 第22-26页 |
| ·生长素的作用机理 | 第26-29页 |
| 2 植物小分子的糖基化修饰与糖基转移酶 | 第29-42页 |
| ·植物糖基转移酶的分类 | 第29-33页 |
| ·小分子糖基转移酶的生物学功能 | 第33-39页 |
| ·植物糖基转移酶的应用 | 第39-41页 |
| ·小结 | 第41-42页 |
| 3 研究的目的及立题意义 | 第42-45页 |
| ·研究内容 | 第42-43页 |
| ·研究的目的及立题意义 | 第43-45页 |
| 第二章 生长素糖基转移酶UGT74D1的鉴定及其生化特征 | 第45-89页 |
| 1 前言 | 第45-46页 |
| 2 实验材料 | 第46-48页 |
| ·载体与菌株 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46页 |
| ·主要培养基 | 第46-47页 |
| ·主要溶液配方 | 第47-48页 |
| 3 实验方法 | 第48-65页 |
| ·植物RNA的提取 | 第48页 |
| ·RNA的反转录 | 第48-49页 |
| ·PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第50页 |
| ·克隆基因片断的纯化回收(天根试剂盒) | 第50-51页 |
| ·克隆基因的连接 | 第51页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒转化 | 第51-53页 |
| ·原核表达载体构建 | 第53-55页 |
| ·GST融合蛋白的表达纯化 | 第55-58页 |
| ·酶促反应条件 | 第58-60页 |
| ·HPLC以及LC-MS分析条件 | 第60-61页 |
| ·标准曲线的制作 | 第61-65页 |
| 4 结果与分析 | 第65-86页 |
| ·酶活性筛选 | 第65-66页 |
| ·克隆载体的构建 | 第66-68页 |
| ·原核表达载体构建 | 第68-71页 |
| ·酶蛋白的原核表达与纯化 | 第71-79页 |
| ·UGT74D1对不同生长素相对转化率的比较 | 第79-81页 |
| ·UGT74D1催化形成的生长素糖酯的质谱检测 | 第81-83页 |
| ·影响酶活性的因素分析 | 第83-85页 |
| ·动力学常数 | 第85-86页 |
| 5 讨论 | 第86-89页 |
| ·生长素糖基转移酶UGT74D1的酶活性 | 第86-87页 |
| ·生长素糖基转移酶UGT74D1的酶学性质 | 第87-88页 |
| ·本研究的意义 | 第88-89页 |
| 第三章 生长素糖基转移酶基因UGT74D1的遗传学分析 | 第89-141页 |
| 1 前言 | 第89-90页 |
| 2 实验材料 | 第90-92页 |
| ·植物材料 | 第90页 |
| ·菌种和载体 | 第90页 |
| ·实验试剂与仪器 | 第90-92页 |
| 3 实验方法 | 第92-102页 |
| ·植物材料种植 | 第92-93页 |
| ·拟南芥T-DNA插入突变纯合体ugt74d1,ugt74e2鉴定 | 第93-94页 |
| ·植物RNA的提取 | 第94页 |
| ·RNA的反转录 | 第94页 |
| ·PCR扩增 | 第94-95页 |
| ·克隆基因片断的纯化回收(天根试剂盒) | 第95页 |
| ·克隆基因的连接 | 第95页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒转化 | 第95页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和质粒转化 | 第95-96页 |
| ·拟南芥过表达转基因植株的获得与筛选 | 第96-97页 |
| ·植物总蛋白的提取 | 第97页 |
| ·表型分析实验 | 第97-98页 |
| ·突变体和过表达体的根抑制实验 | 第98-99页 |
| ·拟南芥的杂交 | 第99页 |
| ·生长素代谢物含量分析 | 第99页 |
| ·生长素糖酯的提取和分析 | 第99-100页 |
| ·GUS染色分析 | 第100页 |
| ·基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第100-102页 |
| 4 结果与分析 | 第102-137页 |
| ·拟南芥UGT74D1基因的表达特异性研究 | 第102-105页 |
| ·拟南芥UGT74D1糖基转移酶蛋白的亚细胞定位 | 第105-107页 |
| ·突变体纯合体的筛选,双突变纯合体的构建 | 第107-109页 |
| ·拟南芥UGT74D1过表达株系的获得及纯合体筛选 | 第109-113页 |
| ·双突变体和过表达体中生长素糖基转移酶活性比较 | 第113-115页 |
| ·双突变体和过表达体中生长素糖酯的含量 | 第115-116页 |
| ·拟南芥UGT74D1过表达纯合体株系及突变体的表型和生理分析 | 第116-131页 |
| ·UGT74D1的表达对于生长素信号响应的影响 | 第131-132页 |
| ·突变体和过表达体生长素代谢相关基因的表达分析 | 第132-134页 |
| ·突变体和过表达体卷叶及叶柄角度有关的基因表达变化 | 第134-136页 |
| ·内源生长素代谢物含量分析 | 第136-137页 |
| 5 讨论 | 第137-141页 |
| ·来自植物体内的UGT74D1对生长素的糖基化修饰活性 | 第137页 |
| ·UGT74D1在植物体内调节生长素的代谢平衡 | 第137页 |
| ·UGT74D1基因对生长发育的影响 | 第137-139页 |
| ·UGT74D1的亚细胞定位 | 第139页 |
| ·本研究的意义 | 第139-141页 |
| 总结及本论文的创新点 | 第141-142页 |
| 参考文献 | 第142-159页 |
| 致谢 | 第159-160页 |
| 在学期间发表论文与专利 | 第160-161页 |
| 研究生在读期间参与科研项目情况 | 第161-162页 |
| 附表 | 第162页 |
