| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 英文缩略词 | 第6-7页 |
| 目录 | 第7-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| ·茶氨酸的主要生理功能 | 第9-10页 |
| ·茶氨酸合成酶的研究进展 | 第10-11页 |
| ·RACE 技术的研究 | 第11-12页 |
| ·启动子克隆方法的研究进展 | 第12-13页 |
| ·基因克隆与表达的研究进展 | 第13-15页 |
| ·梨离体再生体系的研究 | 第15-17页 |
| 2 引言 | 第17-19页 |
| ·研究目的与意义 | 第17页 |
| ·研究内容 | 第17-19页 |
| ·通过 RACE 技术扩增出茶氨酸合成酶基因的 3’端 | 第17页 |
| ·反向 PCR 技术扩增目的基因的启动子序列 | 第17-18页 |
| ·“新高”梨增殖体系的建立 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-25页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-25页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第19-20页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第20页 |
| ·RNA 及 DNA 的质量与浓度的检测 | 第20页 |
| ·大肠杆菌 DH5a 感受态细胞的制备及质粒的转化 | 第20-21页 |
| ·目的产物的回收与纯化 | 第21页 |
| ·回收产物与 pMD18-T 载体的连接 | 第21页 |
| ·引物设计及合成 | 第21-22页 |
| ·RNA 反转录成 cDNA | 第22-23页 |
| ·RACE 技术扩增 3’端 | 第23页 |
| ·PCR 产物的检测 | 第23页 |
| ·IPCR 技术扩增目的基因的启动子序列 | 第23-24页 |
| ·“新高”梨增值体系的建立 | 第24-25页 |
| 4 结果与分析 | 第25-38页 |
| ·茶愈伤组织 RNA 检测 | 第25-26页 |
| ·茶愈伤组织基因组检测 | 第26页 |
| ·ACTIN 引物检测 CDNA | 第26-27页 |
| ·RACE 技术扩增 3’端序列 | 第27-34页 |
| ·利用降落 PCR 扩增目的片段 3’端 | 第27-28页 |
| ·目的片段的克隆和测序结果 | 第28-31页 |
| ·目的片段的同源性分析 | 第31-34页 |
| ·反向 PCR 克隆目的片段启动子序列 | 第34-35页 |
| ·目的基因启动子序列的扩增 | 第34-35页 |
| ·目的基因启动子的分析 | 第35页 |
| ·“新高”梨增殖体系的建立 | 第35-38页 |
| ·不同浓度植物生长调节剂 6-BA、IBA、GA3 对外植体增殖状况的影响 | 第36页 |
| ·不同处理的极差分析 | 第36-38页 |
| 5 讨论 | 第38-40页 |
| ·RACE 技术克隆茶氨酸合成酶基因 3’端可能存在的问题 | 第38页 |
| ·克隆目的基因启动子过程中可能存在的问题 | 第38-39页 |
| ·不同植物生长调节剂对“新高”梨离体增殖的影响 | 第39-40页 |
| 6 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 作者简介 | 第46页 |
