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水稻OsCIPK基因家族的克隆与转OsCBL8基因水稻的抗逆性分析

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
縮略表第11-12页
第一部分 文献综述第12-44页
 第一章 植物逆境肋迫下的钙信号转导途径第14-24页
  1 逆境胁迫下Ca~(2+)信号的产生第14-17页
   ·Ca~(2+)信号第15-16页
   ·Ca~(2+)通道第16-17页
   ·Ca~(2+)泵和Ca~(2+)/H~+逆向运输器第17页
  2 Ca~(2+)信号的解码第17-24页
   ·钙调素(CaM)第18-19页
   ·钙调素结合蛋白(CaMBP)第19-20页
   ·类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CBL)第20-21页
   ·钙依赖的蛋白激酶(CDPK)及CDPK相关的激酶(RCK)第21-24页
 第二章 植物抗逆相关CBL与CIPK基因家族的研究第24-44页
  1 拟南芥CBL与CIPK基因家族第25-29页
   ·AtCBL基因家族第25-27页
   ·AtCIPK基因家族第27-29页
  2 水稻CBL与CIPK基因家族第29-33页
   ·OsCBL基因家族第29-31页
   ·OsCIPK基因家族第31-33页
  3 其它植物的CBL与CIPK基因第33-34页
  4 逆境胁迫下植物CBL-CIPK信号网络第34-44页
   ·CBL与CIPK的特异性互作第35-37页
   ·逆境胁迫下CBL-CIPK的功能第37-44页
     ·盐胁迫应答途径第37-40页
     ·低钾胁迫应答途径第40-44页
第二部分 研究报告第44-90页
 第三章 12个水稻OsCIPK基因家族成员的克隆与表达分析第46-70页
  摘要第46-48页
  1 材料和方法第48-54页
   ·植物材料生长第48页
   ·菌种第48页
   ·逆境处理第48-49页
   ·总RNA的提取和cDNA第一链的合成第49页
   ·OsCIPK基因的序列拼接与克隆第49-50页
   ·OsCIPK基因的生物信息学分析第50-52页
   ·水稻OsCIPK基因的RT-PCR分析第52页
   ·水稻OsCIPK基因表达载体的构建第52-53页
   ·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化第53-54页
   ·转基因水稻阳性植株的PCR检测第54页
  2 结果与分析第54-65页
   ·OsCIPK基因的克隆和序列分析第54-57页
   ·OsCIPK蛋白的氨基酸序列比较和进化树分析第57-60页
   ·OsCIPK基因的表达特征第60-63页
   ·OsCIPK24过量表达载体的构建和转基因研究第63-65页
  3 讨论第65-70页
   ·OsCIPK基因的进化第65页
   ·OsCIPK的可变剪接第65-66页
   ·OsCIPK基因诱导表达存在组织特异性第66页
   ·OsCIPK与CBL/CIPK的网络节点第66-67页
   ·抗冷和抗白叶枯病可能存在相对独立的信号途径第67页
   ·不同的逆境诱导与OsCIPK基因结构的相关性第67-68页
   ·OsCIPK24的转基因分析第68-70页
 第四章 转OsCBL8基因水稻的抗逆性分析第70-90页
  摘要第70-72页
  1 材料与方法第72-75页
   ·植物材料第72页
   ·T_3代转基因植株农艺性状考察第72页
   ·TAIL-PCR法扩增转基因水稻中插入位点侧翼序列第72-73页
   ·转基因水稻植株的OsCBL8基因表达检测第73-74页
   ·转正反义OsCBL8水稻苗期的耐逆性分析第74-75页
     ·脯氨酸含量的测定第74-75页
     ·丙二醛含量的测定第75页
     ·Na~+、k~+含量的测定第75页
  2 结果与分析第75-85页
   ·转基因水稻农艺性状考察第75-76页
   ·转基因水稻中插入区域侧翼序列的克隆与测序第76-77页
   ·转正反义基因对植株内源OsCBL8基因表达的影响第77页
   ·转基因植株的耐盐性分析第77-80页
     ·转基因植株在盐胁迫下的生长第77-80页
     ·NaCl处理对转基因植株钾、钠离子含量的影响第80页
   ·转基因植株的抗旱性分析第80-83页
     ·转基因植株在20%PEG6000处理下的生长第80-81页
     ·PEG6000处理对转基因植株丙二醛(MDA)含量的影响第81页
     ·PEG6000处理对转基因植株脯氨酸含量的影响第81-83页
   ·转基因植株的耐冷性分析第83-85页
     ·转基因植株在低温处理下的生长第83页
     ·低温处理对转基因植株丙二醛含量的影响第83页
     ·低温处理对转基因植株脯氨酸含量的影响第83-85页
  3 讨论第85-90页
全文结论第90-92页
参考文献第92-104页
附录第104-106页
攻读博士期间发表或待发表的研究论文第106-107页
致谢第107页

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