| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 引言 | 第9-20页 |
| 一、 细胞衰老 | 第9-12页 |
| （一） 细胞衰老的研究背景 | 第9页 |
| （二） 细胞衰老的研究进展 | 第9-10页 |
| （三） 细胞衰老与肿瘤的关系 | 第10-11页 |
| （四） 细胞衰老与表观修饰 | 第11-12页 |
| 二、 表观修饰酶类 | 第12-13页 |
| （一） 表观遗传学说 | 第12页 |
| （二） 组蛋白甲基转移酶 | 第12页 |
| （三） 组蛋白去甲基化酶 | 第12-13页 |
| （四） 染色质重塑复合物 | 第13页 |
| 三、 RNAi 文库筛选技术 | 第13-17页 |
| （一） RNAi 的作用机制 | 第13-14页 |
| （二） RNAi 研究的技术路线 | 第14-16页 |
| （三） RNAi 文库的构建及其应用 | 第16-17页 |
| 四、 RAD21 基因简介 | 第17-18页 |
| （一） RAD21 基因的概述 | 第17页 |
| （二） RAD21 功能研究进展 | 第17-18页 |
| 五、 CARM1 简介 | 第18页 |
| （一） CARM1 的概述 | 第18页 |
| （二） CARM1 功能研究进展 | 第18页 |
| 六、 TRIM28 简介 | 第18页 |
| （一） TRIM28 概述 | 第18页 |
| （二） TRIM28 功能研究进展 | 第18页 |
| 七、 本文的研究内容与意义 | 第18-20页 |
| （一） 立题依据 | 第18-19页 |
| （二） 本论文的研究内容和意义 | 第19-20页 |
| 实验材料与方法 | 第20-29页 |
| 一．实验材料 | 第20-21页 |
| （一） 干涉文库 | 第20页 |
| （二） 试剂 | 第20页 |
| （三） 抗体 | 第20页 |
| （四） 实验仪器 | 第20-21页 |
| 二、 实验方法 | 第21-29页 |
| Ⅰ 分子生物学实验方法 | 第21-23页 |
| （一） 分子克隆 | 第21页 |
| （二） DNA 的琼脂糖电泳 | 第21页 |
| （三） 哺乳动物细胞总 RNA 的提取和反转录 | 第21-22页 |
| （四） PCR 和荧光实时定量（real-time）PCR | 第22-23页 |
| Ⅱ 细胞生物学实验方法 | 第23-28页 |
| （一） siRNA 的转染 | 第23页 |
| （二） 细胞增殖实验 | 第23-24页 |
| （三） Western blotting 检测 | 第24-26页 |
| （四） SA-β-gal 染色法 | 第26页 |
| （五） SA-β-gal 活性检测（C12DFG 衰老检测） | 第26-27页 |
| （六） 结晶紫染色 | 第27页 |
| （七） 免疫荧光 | 第27-28页 |
| Ⅲ 统计分析 | 第28-29页 |
| 实验结果与分析 | 第29-41页 |
| 一、 siRNA 文库筛选模型的构建 | 第29-31页 |
| （一） 人工合成 siRNA 的干涉效率验证 | 第29页 |
| （二） HSP27 siRNA 诱导乳腺癌细胞 MDA-MB-231 衰老 | 第29-31页 |
| 二、 siRNA 文库的筛选流程 | 第31-33页 |
| （一） 初步筛选 | 第32-33页 |
| （二） 二次筛选 | 第33页 |
| 三、 验证 RAD21 siRNA、CARM1 siRNA、TRIM28 siRNA 诱导人乳腺癌细胞MDA-MB-231 衰老 | 第33-41页 |
| （一） RAD21 siRNA 诱导人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 发生衰老 | 第33-36页 |
| （二） CARM1 siRNA 对人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 衰老的影响 | 第36-39页 |
| （三） TRIM28 siRNA 诱导人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 发生衰老 | 第39-41页 |
| 讨论 | 第41-45页 |
| 一、 应用人乳腺癌细胞 MDA-MB-231 建立筛选模型 | 第41页 |
| 二、 siRNA 文库筛选衰老相关基因过程优化 | 第41-44页 |
| 三、 RAD21、CARM1、TRIM28参与人乳腺癌细胞MDA-MB-231衰老事件的机制初步探讨 | 第44-45页 |
| 主要结论和创新点 | 第45-46页 |
| 一、 主要结论 | 第45页 |
| 二、 主要创新点 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-54页 |
| 附录 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第56页 |
