| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第13-23页 |
| ·细胞凋亡概述 | 第13-17页 |
| ·细胞凋亡 | 第13页 |
| ·细胞凋亡的形态学和生物化学特征 | 第13-14页 |
| ·细胞凋亡的过程及机理 | 第14-17页 |
| ·凋亡相关基因研究进展 | 第17-19页 |
| ·p53基因 | 第17-18页 |
| ·Bcl-2家族 | 第18页 |
| ·c-myc基因 | 第18-19页 |
| ·乳腺细胞凋亡研究进展 | 第19页 |
| ·奶牛乳腺细胞凋亡的研究进展 | 第19-20页 |
| ·细胞凋亡的检测方法 | 第20-22页 |
| ·细胞凋亡的形态学检测 | 第20-21页 |
| ·磷脂酰丝氨酸外翻分析(Annexin Ⅴ法) | 第21页 |
| ·线粒体膜势能的检测 | 第21页 |
| ·DNA凝胶电泳 | 第21页 |
| ·TUNEL法 | 第21页 |
| ·Caspase-3活性的检测 | 第21-22页 |
| ·凋亡相关蛋白TFAR19蛋白的表达和细胞定位分析 | 第22页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第22页 |
| ·研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·奶牛发育过程中乳腺细胞凋亡的检测 | 第23-26页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·实验试剂 | 第23页 |
| ·试验步骤 | 第23-26页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第26页 |
| ·奶牛乳腺组织总RNA提取 | 第26-27页 |
| ·实验试剂 | 第26页 |
| ·实验仪器 | 第26页 |
| ·实验动物的选取 | 第26-27页 |
| ·乳腺组织处理 | 第27页 |
| ·RNA提取步骤 | 第27页 |
| ·RNA质量检测 | 第27页 |
| ·实时荧光定量PCR检测不同时期凋亡相关基因蛋白的表达 | 第27-30页 |
| ·引物设计 | 第27-29页 |
| ·反转录生成cDNA | 第29页 |
| ·实时荧光定量PCR反应 | 第29-30页 |
| ·数据处理与统计分析 | 第30页 |
| ·Western blotting印迹法检测不同时期凋亡相关蛋白的表达 | 第30-35页 |
| ·实验材料 | 第30页 |
| ·实验仪器 | 第30页 |
| ·实验试剂 | 第30-32页 |
| ·实验方法 | 第32-34页 |
| ·数据处理和统计分析 | 第34-35页 |
| 3 结果 | 第35-52页 |
| ·TUNEL法检测奶牛乳腺发育过程中乳腺细胞凋亡 | 第35-41页 |
| ·TUENL法检测奶牛乳腺发育过程中乳腺细胞凋亡变化 | 第35-40页 |
| ·奶牛乳腺发育过程中乳腺细胞的凋亡变化规律 | 第40-41页 |
| ·奶牛乳腺组织总RNA的提取及检测 | 第41-43页 |
| ·实时荧光定量PCR检测凋亡相关基因的表达 | 第43-48页 |
| ·目的基因和内参的熔解曲线及扩增曲线 | 第43-45页 |
| ·目的基因在乳腺发育各个时期的mRNA表达情况 | 第45-48页 |
| ·Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达 | 第48-52页 |
| ·奶牛乳腺发育不同时期蛋白浓度标准曲线 | 第48页 |
| ·奶牛乳腺发育不同时期凋亡相关蛋白表达量变化 | 第48-52页 |
| 4 讨论 | 第52-58页 |
| ·奶牛乳腺发育过程中乳腺细胞的凋亡 | 第52-54页 |
| ·青春期奶牛乳腺细胞凋亡 | 第52-53页 |
| ·妊娠期奶牛乳腺细胞凋亡 | 第53页 |
| ·泌乳期奶牛乳腺细胞凋亡 | 第53页 |
| ·退化期奶牛乳腺细胞凋亡 | 第53-54页 |
| ·TUNEL检测奶牛乳腺细胞凋亡 | 第54-55页 |
| ·TUNEL检测凋亡细胞的原理 | 第54页 |
| ·TUNEL法改进 | 第54-55页 |
| ·奶牛乳腺发育不同时期凋亡相关基因的表达 | 第55-56页 |
| ·奶牛乳腺发育不同时期凋亡相关蛋白的表达 | 第56-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 附录：缩略语表 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67页 |
