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SDF-1/CXCR7在内皮祖细胞参与血管生成中的作用研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-13页
英文缩略词对照表第13-14页
1 绪论第14-26页
   ·问题的提出与研究意义第14-15页
     ·问题的提出第14-15页
     ·研究意义第15页
   ·国内外研究现状第15-23页
     ·新生血管的形成机制第15-16页
     ·EPCs 的来源、鉴定和特点第16-17页
     ·EPCs 在出生后血管发生中的作用第17-18页
     ·SDF-1/CXCR4 在EPCs 参与血管生成中的作用第18-20页
     ·SDF-1 新作用受体CXCR7 的主要功能第20-22页
     ·微流控技术在体外构建血管生成模型中的应用第22-23页
   ·课题的研究目的、研究内容及创新性第23-26页
     ·课题的研究目的第23页
     ·课题的研究内容第23-25页
     ·课题的技术路线第25页
     ·课题的特色及创新点第25-26页
2 大鼠骨髓来源内皮祖细胞的分离培养及鉴定第26-34页
   ·引言第26-27页
   ·主要实验材料第27-28页
     ·实验动物第27页
     ·主要试验试剂及抗体第27页
     ·主要实验仪器设备第27-28页
     ·主要实验试剂的配制第28页
   ·实验方法第28-30页
     ·EPCs 的分离培养第28-29页
     ·EPCs 的鉴定第29-30页
   ·实验结果第30-32页
     ·细胞形态观察第30页
     ·细胞表型分析第30-31页
     ·DiI-ac-LDL 摄取和UEA-1 结合功能鉴定第31-32页
   ·讨论与分析第32-33页
   ·本章小结第33-34页
3 体外考察 CXCR7 对 EPCs 生物学行为的调节作用第34-60页
   ·引言第34-35页
   ·实验材料第35-37页
     ·主要仪器和耗材第35页
     ·主要试剂第35-36页
     ·主要试剂配制第36-37页
   ·实验方法第37-45页
     ·EPCs 中CXCR4 和CXCR7 的m RNA 表达检测第37-39页
     ·West-bloting 检测EPCs 中CXCR4, CXCR7 的表达第39-41页
     ·流式细胞术检测CXCR4 和CXCR7 的表面表达第41页
     ·体外考察CXCR4,CXCR7 在SDF-1 诱导EPCs 粘附中的作用第41-42页
     ·Transwell 法考察CXCR4,CXCR7 在SDF-1 诱导EPCs 迁移中的作用第42-43页
     ·考察CXCR4,CXCR7 在SDF-1 诱导EPCs 跨内皮转移的作用第43页
     ·考察CXCR4,CXCR7 在SDF-1 诱导EPCs 增殖中的作用第43-44页
     ·考察CXCR4,CXCR7 在SDF-1 阻止EPCs 凋亡中的作用第44页
     ·考察CXCR4,CXCR7 在SDF-1 在诱导EPCs 管样结构形成中的作用第44-45页
     ·结果分析第45页
   ·实验结果第45-55页
     ·CXCR4,CXCR7 在EPCs 中的表达第45-46页
     ·CXCR4,CXCR7 在EPCs 粘附中的作用第46-47页
     ·SDF-1 在调节EPCs 迁移时主要是通过与受体CXCR4 相互作用第47-50页
     ·CXCR4 和CXCR7 两者均在SDF-1 调节EPCs 跨内皮转移过程中起着重要作用第50-51页
     ·CXCR4 和CXCR7 在SDF-1 促进EPCs 增殖行为中的作用第51-53页
     ·CXCR4 和CXCR7 对EPCs 应激条件下存活能力的影响第53页
     ·CXCR4 和CXCR7 对EPCs 管样结构形成能力的影响第53-55页
   ·讨论与分析第55-58页
     ·CXCR7 在EPCs 粘附和迁移中的作用第57-58页
     ·CXCR7 在EPCs 参与血管样结构形成中的作用第58页
   ·本章小结第58-60页
4 基于微流控芯片的体外血管生成模型的建立第60-80页
   ·引言第60-61页
   ·主要实验材料及仪器设备第61-62页
     ·实验材料第61-62页
     ·仪器设备第62页
   ·实验方法第62-68页
     ·微流控芯片的设计第62-63页
     ·微流控芯片的制作第63页
     ·基质胶的灌注第63-64页
     ·在三维凝胶中可溶性因子浓度梯度形成及表征分析第64页
     ·微流控通道中细胞的培养及其活性检测第64-65页
     ·内皮细胞在促血管生长因子的诱导下增殖能力的考察第65-66页
     ·内皮细胞在促血管生长因子浓度梯度的诱导下迁移能力的考察第66-67页
     ·促血管生长因子对内皮细胞在三维凝胶中形成管样结构能力的影响第67页
     ·实验结果统计分析第67-68页
   ·实验结果第68-75页
     ·微流控芯片的特征第68页
     ·基质胶的灌注第68-69页
     ·可溶性因子浓度梯度的形成第69-70页
     ·内皮细胞在微流控芯片中的活性分析第70-71页
     ·促血管生长因子对3D 生长内皮细胞增殖能力的影响第71-72页
     ·在促血管生长因子浓度梯度诱导下,内皮细胞定向迁移到基质胶中第72-74页
     ·管样结构的形成第74-75页
   ·讨论与分析第75-77页
   ·本章小结第77-80页
5 基于微流控系统考察 CXCR7 在 EPCS 在血管生成中的作用第80-94页
   ·引言第80-81页
   ·主要实验材料和仪器设备第81页
     ·主要试剂第81页
     ·主要仪器设备第81页
   ·实验方法第81-83页
     ·微流控芯片的加工及灭菌处理第81-82页
     ·微流控芯片内基质胶的灌注和平衡处理第82页
     ·CXCR7 对EPCs 掺入基质能力的影响第82页
     ·CXCR7 对EPCs 在3D 凝胶中形成管样结构能力的影响第82-83页
     ·MMP 抑制剂对SDF-1 诱导EPCs 掺入基质能力的影响第83页
     ·MMP 抑制剂对SDF-1 诱导EPCs 形成管腔样结构能力的影响第83页
   ·实验结果第83-90页
     ·EPCs 在微流控芯片内的培养第83-84页
     ·CXCR4 和CXCR7 在SDF-1 诱导EPCs 掺入胞外基质的过程中均起着重要的调节作用第84-87页
     ·CXCR4 和CXCR7 在SDF-1 诱导EPCs 形成管样结构的能力中均起着重要的调节作用第87-88页
     ·MMP 抑制剂阻止SDF-1 诱导EPCs 掺入基质和形成血管样结构第88-89页
     ·MMP 抑制剂阻止SDF-1 诱导EPCs 形成血管样结构第89-90页
   ·讨论与分析第90-92页
   ·本章小结第92-94页
6 结论与展望第94-96页
   ·主要结论第94-95页
   ·后续工作展望第95-96页
致谢第96-98页
参考文献第98-108页
附录第108-109页

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