| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-15页 |
| 第一章 应激与热休克蛋白 | 第15-39页 |
| 1 应激概述 | 第15-17页 |
| ·应激的概念 | 第15页 |
| ·应激时机体的神经内分泌反应 | 第15-16页 |
| ·应激时机体呈现的全身性适应综合征 | 第16-17页 |
| 2 猪的运输应激 | 第17-19页 |
| ·猪的运输应激 | 第17-18页 |
| ·猪常见的应激性疾病 | 第18-19页 |
| 3 热休克蛋白概述 | 第19-30页 |
| ·热休克蛋白的概念 | 第19页 |
| ·热休克蛋白的分类 | 第19-20页 |
| ·热休克蛋白的生物学特点 | 第20-21页 |
| ·高度保守 | 第20-21页 |
| ·普遍存在 | 第21页 |
| ·非特异性 | 第21页 |
| ·其他特点 | 第21页 |
| ·热休克蛋白的生物学功能 | 第21-25页 |
| ·分子伴侣(Molcuar chaperones) | 第21-22页 |
| ·提高细胞抗应激能力 | 第22页 |
| ·调节细胞凋亡 | 第22-23页 |
| ·参与免疫调节 | 第23-25页 |
| ·抗氧化作用 | 第25页 |
| ·抗辐射作用 | 第25页 |
| ·热休克蛋白的表达与调控 | 第25-27页 |
| ·HSF1的结构及功能 | 第26页 |
| ·HSF1的作用机制 | 第26-27页 |
| ·热休克蛋白在翻译水平上的调控 | 第27页 |
| ·Hsp27和αB-crystallin的研究进展 | 第27-30页 |
| ·Hsp27和αB-crystallin的结构 | 第27-28页 |
| ·Hsp27和αB-crystallin的磷酸化 | 第28页 |
| ·Hsp27和αB-crystallin与疾病 | 第28-30页 |
| 参考文献 | 第30-39页 |
| 第二章 运输应激过程中猪心脏和肝脏中Hsp27和αB-crystallin及其相应mRNA的表达变化与应激性损伤的研究 | 第39-59页 |
| 1 材料与方法 | 第41-45页 |
| ·试验设计 | 第41页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第41-42页 |
| ·试验方法 | 第42-45页 |
| ·血液中ALT、AST、CK、LDH、Cr和BUN的检测 | 第42页 |
| ·病理组织学检测 | 第42页 |
| ·ELISA检测组织中的Hsp27和αB-crystallin水平 | 第42-43页 |
| ·实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测组织中HSPs mRNA | 第43-45页 |
| ·统计分析 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-56页 |
| ·运输应激后猪血清中ALT、AST、CK、LDH、Cr和BUN的变化 | 第45-48页 |
| ·运输应激受试猪主要脏器组织的组织病理学变化 | 第48-50页 |
| ·运输应激受试猪主要脏器组织中HSPs的表达变化 | 第50-52页 |
| ·运输应激受试猪心脏中Hsp27和αB-c的表达变化 | 第50-51页 |
| ·肝脏中Hsp27和αB-c的表达变化 | 第51-52页 |
| ·实时荧光定量PCR(FQ RT-PCR)检测各脏器组织中hsp27 mRNA和αB-cmRNA的转录变化 | 第52-56页 |
| ·hsp27 mRNA和αB-c mRNA及内参GAPDH的标准曲线 | 第52-54页 |
| ·hsp27 mRNA和αB-c mRNA在主要脏器组织中的转录变化 | 第54-56页 |
| 3 讨论 | 第56-59页 |
| 第三章 运输应激过程中HSPs在猪胃中的表达与应激性损伤研究 | 第59-69页 |
| 1 材料与方法 | 第61-63页 |
| ·试验设计 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·试验方法 | 第61-63页 |
| ·ELISA检测HSPs在胃中的表达 | 第61-62页 |
| ·病理组织学检测 | 第62-63页 |
| 2 结果 | 第63-66页 |
| ·运输应激后猪胃的病理组织学变化 | 第63页 |
| ·HSPs及HSF-1在胃组织中的表达 | 第63-66页 |
| 3 讨论 | 第66-69页 |
| 第四章 运输应激对受试猪肉品品质的影响 | 第69-77页 |
| 1 材料与方法 | 第70-72页 |
| ·试验动物及试验设计 | 第70页 |
| ·主要仪器 | 第70页 |
| ·实验方法 | 第70-71页 |
| ·pH值测定 | 第70-71页 |
| ·持水性 | 第71页 |
| ·嫩度 | 第71页 |
| ·肉色 | 第71页 |
| ·统计分析 | 第71-72页 |
| 2 结果 | 第72-74页 |
| ·肉质检测 | 第72-73页 |
| ·不同家族HSPs在肌肉组织中的表达 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-77页 |
| 第五章 持续热应激对离体培养大鼠心肌细胞中Hsp27表达及其相应mRNA转录变化的影响 | 第77-91页 |
| 1 材料与方法 | 第78-82页 |
| ·实验动物及主要试剂 | 第78-79页 |
| ·大鼠心肌细胞的原代培养及热应激处理 | 第79页 |
| ·心肌细胞的分离 | 第79页 |
| ·心肌细胞的培养及热应激处理 | 第79页 |
| ·实验方法 | 第79-82页 |
| ·细胞培养液中细胞特异性酶的检测 | 第79页 |
| ·免疫组织化学定位离体培养心肌细胞中HSPs | 第79-80页 |
| ·Western Blot检测法定量检测离体培养心肌细胞中HSPs表达量 | 第80-81页 |
| ·实时荧光定量PCR检测离体培养心肌细胞中HSPs转录水平 | 第81-82页 |
| ·统计分析 | 第82页 |
| 2 结果 | 第82-87页 |
| ·培养液中反映细胞损伤的特异性酶的变化 | 第82-83页 |
| ·HSPs的免疫组织化学定位检测结果 | 第83-84页 |
| ·Western Blot定量检测热应激处理心肌细胞中HSPs的表达水平 | 第84-86页 |
| ·FQ-RT PCR检测离体培养心肌细胞中HSPs转录水平 | 第86-87页 |
| 3 讨论 | 第87-91页 |
| 第六章 持续热应激诱导离体培养大鼠心肌细胞凋亡及相关信号转导分子表达的变化 | 第91-101页 |
| 1 材料与方法 | 第92-95页 |
| ·实验动物及主要试剂 | 第92-93页 |
| ·大鼠心肌细胞的原代培养及热应激处理 | 第93页 |
| ·心肌细胞的分离 | 第93页 |
| ·心肌细胞的培养及热应激处理 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-95页 |
| ·Western Blot检测法定量检测离体培养心肌细胞中细胞凋亡特异性蛋白的表达量 | 第93-94页 |
| ·流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第94-95页 |
| ·统计分析 | 第95页 |
| 2 结果 | 第95-98页 |
| ·流式细胞仪检测凋亡结果 | 第95-96页 |
| ·Western Blot | 第96-98页 |
| 3 讨论 | 第98-101页 |
| 参考文献 | 第101-115页 |
| 全文总结 | 第115-117页 |
| 附录 | 第117-119页 |
| 致谢 | 第119-121页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第121页 |
