| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-20页 |
| ·课题研究背景及意义 | 第9页 |
| ·国内外研究现状 | 第9-18页 |
| ·几丁质与壳聚糖 | 第9-10页 |
| ·壳聚糖的应用 | 第10-11页 |
| ·产几丁质脱乙酰酶的微生物 | 第11-12页 |
| ·CDA的酶学特性 | 第12-14页 |
| ·CDA的作用机制 | 第14-16页 |
| ·CDA基因的克隆和表达 | 第16-17页 |
| ·CDA的生物学作用 | 第17页 |
| ·利用微生物培养法制备壳聚糖 | 第17-18页 |
| ·课题来源及主要研究内容 | 第18-20页 |
| ·课题来源 | 第18页 |
| ·主要研究内容 | 第18-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-50页 |
| ·实验材料 | 第20-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·培养基 | 第20-22页 |
| ·酶与试剂 | 第22页 |
| ·所用软件 | 第22页 |
| ·引物设计 | 第22-24页 |
| ·常用贮液 | 第24-25页 |
| ·仪器设备 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-36页 |
| ·几丁质脱乙酰酶的基因克隆 | 第25-30页 |
| ·测序结果的生物信息学分析 | 第30-31页 |
| ·表达质粒 pYES2-cda 的构建及酿酒酵母转化 | 第31-33页 |
| ·转化子分子检测 | 第33-35页 |
| ·转化子的活性检测 | 第35-36页 |
| 第3章 构巢曲霉几丁质脱乙酰酶基因克隆和序列分析 | 第36页 |
| ·构巢曲霉几丁质脱乙酰酶基因（cda）克隆 | 第36-42页 |
| ·构巢曲霉含几丁质脱乙酰酶基因保守区DNA序列的搜索 | 第36页 |
| ·构巢曲霉基因组DNA和RNA的提取 | 第36-37页 |
| ·构巢曲霉含几丁质脱乙酰酶基因保守区DNA序列的克隆 | 第37-38页 |
| ·构巢曲霉cda cDNA的克隆 | 第38-39页 |
| ·克隆片段的测序及序列分析 | 第39-42页 |
| ·测序结果的序列分析 | 第42-48页 |
| ·an1852 的序列分析 | 第42-43页 |
| ·an9380 的序列分析 | 第43-45页 |
| ·几丁质脱乙酰酶氨基酸序列相似性分析 | 第45-46页 |
| ·系统进化分析 | 第46-48页 |
| ·本章小结 | 第48-50页 |
| 第4章 酿酒酵母转化及其表达研究 | 第50-59页 |
| ·酿酒酵母转化 | 第50-52页 |
| ·酿酒酵母表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·酿酒酵母转化及转化子鉴定 | 第51-52页 |
| ·酿酒酵母转化子分子检测 | 第52-55页 |
| ·酵母总RNA的提取 | 第52-53页 |
| ·杂交探针制备 | 第53-54页 |
| ·an1852 Northern 杂交的 | 第54-55页 |
| ·酿酒酵母转化子的酶活检测 | 第55-58页 |
| ·本章小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
