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电化学基因分型及免疫分析方法的研究

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
第1章 诸论第16-29页
   ·电化学生物传感器的工作原理第16-17页
   ·生物分子在基础电极表面的固定第17-18页
   ·电化学生物传感器的分类第18-23页
     ·电化学酶传感器第18-19页
     ·电化学免疫传感器第19-21页
     ·电化学DNA 传感器第21-22页
     ·微生物传感器第22-23页
     ·组织电极与细胞器传感器第23页
   ·电化学生物传感器分析灵敏度提高的方法第23-26页
     ·基于酶的生物放大作用第23-24页
     ·基于纳米技术的信号增强第24-26页
   ·电化学生物传感器的发展前景第26-27页
   ·本研究论文的工作内容第27-29页
第2章 基于缺口-连接反应以及固相表面杂交检测的高灵敏电化学基因分型方法的研究第29-41页
   ·前言第29-30页
   ·实验部分第30-32页
     ·试剂和仪器第30-31页
       ·试剂第30页
       ·仪器第30-31页
     ·二茂铁和硫辛酸修饰氨基标记的核酸链第31页
     ·缺口-连接反应第31页
     ·捕获探针在金电极上的组装第31页
     ·固相表面杂交及电化学检测第31-32页
   ·结果与讨论第32-40页
     ·基于缺口-连接反应以及固相表面杂交的电化学检测原理第32-33页
     ·传感器的电流响应第33-34页
     ·传感器在不同扫描速度下的电化学行为第34页
     ·传感器在Fe(CN)_6~(3-/4-)溶液中的交流阻抗特性第34-35页
     ·引物探针序列的设计优化第35-37页
     ·工作曲线第37-38页
     ·干扰实验第38-39页
     ·基因组DNA 的分析第39-40页
   ·小结第40-41页
第3章 基于等位特异性延伸对电化学SNP 基因分型方法第41-51页
   ·前言第41-42页
   ·实验部分第42-43页
     ·试剂和仪器第42页
     ·二茂铁修饰NH_2-dUTP 以及硫辛酸修饰氨基标记的捕获探针第42-43页
     ·等位基因特异性延伸反应第43页
     ·传感器的制备及检测第43页
   ·结果与讨论第43-50页
     ·基于等位基因特异性延伸的电化学SNP 基因分型方法原理第43-44页
     ·探针的设计和 DNA 杂交反应条件的选择第44-45页
     ·等位基因特异性延伸反应中Fc-dUTP 掺入比例的优化第45-46页
     ·传感器对野生型目标链的检测第46-47页
     ·传感器在不同扫描速度下的电化学行为第47页
     ·传感器在Fe(CN)_6~(3-/4-)溶液中的交流阻抗特性第47-48页
     ·工作曲线第48-49页
     ·基因组DNA 的分析第49-50页
   ·小结第50-51页
第4章 聚合酶延伸形成适体启动的环形DNA 检测探针用于电化学免疫传感器的构建第51-61页
   ·前言第51-52页
   ·实验部分第52-53页
     ·试剂和仪器第52页
       ·试剂第52页
       ·仪器第52页
     ·由聚合酶延伸的适体启动的环形DNA 检测探针的制备第52-53页
     ·免疫传感器的制备第53页
     ·免疫分析过程及其电化学检测第53页
   ·结果与讨论第53-60页
     ·免疫传感器的分析原理第53-54页
     ·传感器的电流响应第54-55页
     ·免疫传感器表面的阻抗表征第55-56页
     ·电活性探针的选择第56-58页
     ·离子强度对响应电流的影响第58页
     ·PDGF-BB 定量分析第58-59页
     ·实际样品分析第59-60页
   ·小结第60-61页
第5章 基于微间距电极阵列上酶催化银沉积原理的电学免疫传感器用于蛋白质的超灵敏检测第61-73页
   ·前言第61-62页
   ·实验部分第62-65页
     ·试剂和仪器第62-63页
       ·试剂第62-63页
       ·仪器第63页
     ·碱性磷酸酶标记PSA 单克隆抗体的制备第63页
     ·抗体修饰微间距电极阵列的制备第63-64页
     ·基于微间距电极的免疫传感器的分析过程第64页
     ·传感器的电学检测第64页
     ·以纳米金为晶种的银增强方法的免疫分析过程第64-65页
       ·纳米金的制备第64-65页
       ·纳米金标记单克隆抗体第65页
       ·以纳米金为晶种的银增强方法的免疫分析PSA第65页
   ·结果与讨论第65-71页
     ·基于微间距插指电极阵列电学免疫传感器的分析原理第65-67页
     ·免疫传感器的扫描电镜(SEM)和能量散射谱(EDS)表征第67-69页
     ·基于微间距电极阵列的免疫传感器用于PSA 的检测第69页
     ·传感器的选择性及实际样品检测第69-71页
   ·小结第71-73页
第6章 基于铂纳米颗粒修饰电极上酶催化沉积铜抑制氢溶出的电化学免疫传感器第73-82页
   ·前言第73-74页
   ·实验部分第74-75页
     ·试剂与仪器第74页
       ·试剂第74页
       ·仪器第74页
       ·溶液的配制第74页
     ·实验过程第74-75页
       ·铂纳米颗米修饰的玻碳电极的制备第74-75页
       ·免疫分析过程第75页
       ·免疫测定过程第75页
   ·结果与讨论第75-81页
     ·分析原理第75-77页
     ·铂纳米颗粒修饰电极制备过程中H_2PtCl_6 浓度的优化第77-79页
     ·酶催化铜沉积反应条件的优化第79-80页
     ·免疫传感器分析性能的探讨第80-81页
   ·小结第81-82页
第7章 一种基于纳米金介导生物沉积铂催化氢还原的电化学免疫分析新方法第82-92页
   ·前言第82-83页
   ·实验部分第83-84页
     ·试剂与仪器第83页
       ·试剂第83页
       ·仪器第83页
       ·溶液的配制第83页
     ·实验过程第83-84页
       ·纳米金的制备第83页
       ·纳米金标记GAHIgG-ALP(GNP-GAHIgG-ALP)第83-84页
       ·GAHIgG 包被的微孔板的制备第84页
       ·免疫分析过程第84页
       ·测定方法第84页
   ·结果与讨论第84-91页
     ·分析过程的讨论与结果第84-86页
     ·富集时间和电位对催化电流大小的影响第86-87页
     ·纳米金上铂催化沉积反应条件的优化第87-89页
     ·GNP-GAHIgG-ALP 的培育时间第89-90页
     ·性能分析第90-91页
   ·小结第91-92页
结论第92-94页
参考文献第94-114页
附录A 攻读学位期间发表的学术论文目录第114-116页
致谢第116页

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