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水稻T-DNA插入突变体的筛选和SDP1基因功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-12页
第一章 文献综述第12-31页
 1. 水稻基因组学研究现状第12-13页
 2. 水稻 T-DNA插入突变体库的构建第13-20页
   ·T-DNA转移和整合的特性第13-15页
     ·T-DNA转移的特性第13-14页
     ·T-DNA整合的特性第14-15页
   ·T-DNA插入突变的几种策略第15-20页
     ·基因敲除(Gene knock-out)技术第17页
     ·基因捕获(Gene trap)技术第17-19页
     ·激活标签(Activation tagging)第19页
     ·多功能标签第19-20页
 3. 水稻 T-DNA插入突变体侧翼序列的分离第20-23页
   ·热循环不对称 PCR(Thermal Asymmetric Interlaced PCR,简称TAIL-PCR)第21页
   ·反向PCR(Inverse PCR)第21-22页
   ·质粒拯救(Plasmid rescue)第22页
   ·几种分离侧翼序列方法的比较第22-23页
 4. T-DNA插入突变在水稻功能基因组学研究中的应用现状第23-25页
 5. 矮化的机理及矮化重要基因的克隆第25-29页
   ·水稻矮秆性状的遗传研究第25-26页
   ·水稻植株矮化机制研究第26-29页
     ·水稻植株矮化与植物激素的关系第27-28页
       ·参与调控水稻植株高矮的GA相关基因的克隆第27页
       ·参与调控水稻植株高矮的BR相关基因的克隆第27-28页
     ·其它类型的植物矮化突变体第28-29页
 6. 本研究的研究目的、意义和创新之处第29-31页
   ·本研究的研究目的第29页
   ·本研究的意义第29-30页
   ·本研究的创新之处第30-31页
第二章 T-DNA突变体材料的筛选和侧翼序列的分离第31-47页
 1. 材料第31-32页
   ·植物材料第31-32页
   ·主要试剂第32页
   ·主要设备第32页
 2. 方法第32-37页
   ·DNA小样抽提(CTAB法)第32页
   ·DNA大样抽提(CTAB法)第32-33页
   ·转基因植株的PCR阳性检测第33页
   ·转基因植株的T_1代筛选第33页
   ·T-DNA侧翼序列的分离第33-36页
   ·侧翼序列的共分离检测第36页
   ·转基因植株的T_2代筛选第36-37页
 3. 结果第37-44页
   ·转基因植株的T_1代筛选第37-39页
   ·转基因植株的 PCR阳性检测第39-41页
   ·T-DNA侧翼序列分离第41-44页
     ·T-DNA侧翼序列的分离第41页
     ·T-DNA侧翼序列的验证及利用第41-44页
   ·转基因植株的T_2代筛选第44页
 4. 讨论第44-47页
   ·突变体的田间筛选第44-45页
   ·T-DNA侧翼序列的分离第45-47页
第三章 SDP1基因的功能分析第47-66页
 1. 材料第47-49页
   ·植物材料和细菌菌株第47页
   ·质粒载体第47-49页
   ·主要试剂第49页
   ·主要设备第49页
 2. 方法第49-54页
   ·DNA的抽提和 Southern杂交第49-50页
   ·RNA的抽提与反转录第50页
   ·SDP1基因的计算机分析第50-51页
   ·SDP1基因的功能分析第51-53页
     ·T_3代遗传稳定性分析第51页
     ·拷贝数检测第51页
     ·互补载体后代表型观察及基因型检测第51页
     ·GUS基因在植株中的表达第51-52页
     ·RT-PCR表达分析第52页
     ·pSDP1::GFP融合表达载体构建及转化第52-53页
   ·生理功能分析第53页
     ·激素敏感性实验第53页
       ·激素大田处理材料第53页
       ·GA室内处理材料第53页
       ·暗室处理材料第53页
     ·色素含量的测定第53页
   ·农艺性状分析第53-54页
     ·不同时期株高的测定第53-54页
     ·考种第54页
 3. 结果第54-62页
   ·SDP1基因的计算机分析第54页
   ·SDP1基因的功能分析第54-57页
     ·T_3代遗传稳定性分析第54-56页
     ·Southern杂交检测拷贝数第56页
     ·互补载体后代表型观察及验证第56页
     ·GUS基因在植株中的表达第56-57页
     ·RT-PCR表达分析第57页
     ·pSDP1::GFP融合表达载体的验证及转化第57页
   ·生理功能分析第57-60页
     ·激素敏感性实验第57-59页
       ·激素处理大田材料第57-58页
       ·GA室内处理材料第58-59页
       ·暗室处理材料第59页
     ·色素含量的测定第59-60页
   ·农艺性状考查第60-62页
     ·不同时期株高的测定第60-61页
     ·考种第61-62页
 4. 讨论第62-65页
   ·互补载体的构建第62-63页
   ·基因的表达分析第63页
   ·基因的功能分析第63-65页
     ·突变可能与控制株高的基因有关第63-64页
     ·突变可能与控制叶色的基因有关第64页
     ·突变可能与控制抽穗期基因有关第64-65页
     ·SDP1基因功能探讨小结第65页
 5. 进一步研究设想第65-66页
参考文献第66-76页
致谢第76-77页
附录第77-89页

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