| 缩略词表 | 第1-13页 |
| 中文摘要 | 第13-16页 |
| Abstract | 第16-19页 |
| 前言 | 第19-43页 |
| 1.α-Synuclein与帕金森氏病 | 第20-28页 |
| ·α-Synuclein基因 | 第20-21页 |
| ·α-Synuclein蛋白 | 第21-23页 |
| ·α-Synuclein与LB | 第23-26页 |
| ·α-Synuclein与PD | 第26-28页 |
| 2.小蜡树及三种分离自小蜡树皮的小分子单体化合物简介 | 第28-31页 |
| ·小蜡树 | 第28页 |
| ·小蜡树皮(秦皮)的药理作用及临床应用 | 第28-29页 |
| ·三种分离自小蜡树皮的小分子单体化合物 | 第29-31页 |
| 3.凋亡及其相关通路 | 第31-40页 |
| ·凋亡通路的调节机制 | 第31-40页 |
| ·细胞凋亡与PD | 第40页 |
| 4.PD的细胞及动物模型 | 第40-43页 |
| ·神经毒素制备的细胞及动物模型 | 第40-41页 |
| ·PD遗传模型 | 第41-42页 |
| ·PD黑质免疫损伤模型 | 第42-43页 |
| 第一部分:人G209A突变型α-synuclein转基因细胞模型的建立 | 第43-89页 |
| 1.实验材料 | 第43-46页 |
| 2.实验方法 | 第46-72页 |
| ·细胞培养 | 第46-49页 |
| ·真核表达载体构建 | 第49-59页 |
| ·真核细胞转染 | 第59页 |
| ·G418筛选 | 第59-61页 |
| ·有限稀释法单克隆筛选 | 第61-62页 |
| ·Western blot检测稳定转染细胞外源基因表达 | 第62-67页 |
| ·Immunocytochemistry检测稳定转染细胞外源基因表达 | 第67-68页 |
| ·RT-PCR检测稳定转染细胞外源基因转录水平 | 第68-69页 |
| ·MTT法检测细胞存活率 | 第69页 |
| ·Annexin V和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡 | 第69-70页 |
| ·DNA Ladder检测细胞核染色体 | 第70-71页 |
| ·统计方法 | 第71-72页 |
| 3.实验结果 | 第72-85页 |
| ·真核表达质粒构建 | 第72-77页 |
| ·G418筛选浓度及维持浓度确定 | 第77页 |
| ·Western blot检测稳定转染细胞外源基因表达 | 第77页 |
| ·Immunocytochemistry检测稳定转染细胞外源基因表达 | 第77页 |
| ·RT-PCR检测稳定转染细胞外源基因转录水平 | 第77-79页 |
| ·MTT法检测细胞存活率 | 第79-82页 |
| ·Annexin V和PI双染流式细胞术检测细胞凋亡 | 第82页 |
| ·DNA Ladder检测细胞核染色体 | 第82-85页 |
| 4.讨论 | 第85-89页 |
| 第二部分:化合物筛选及分离自小蜡树皮的三个单体化合物的细胞保护作用研究 | 第89-129页 |
| 1.实验材料 | 第89-92页 |
| 2.实验方法 | 第92-103页 |
| ·化合物筛选 | 第92-93页 |
| ·三个化合物自身对于细胞存活率的影响 | 第93页 |
| ·三个化合物对DA诱导的细胞存活率下降的影响 | 第93页 |
| ·细胞LDH释放测定 | 第93-94页 |
| ·Annexin V-FITC与PI双染流式细胞术检测细胞凋亡 | 第94-95页 |
| ·荧光显微镜观察细胞核形态变化 | 第95页 |
| ·细胞内GSH水平测定 | 第95-96页 |
| ·细胞内总SOD活性测定 | 第96-97页 |
| ·细胞内ROS水平测定 | 第97-98页 |
| ·细胞⊿Ψm测定 | 第98-99页 |
| ·RT-PCR测定P53和Bax/Bcl-2转录水平 | 第99-101页 |
| ·Western blot法检测线粒体内Cyt C,AIF释放及活性Caspase-3表达量 | 第101-102页 |
| ·统计方法 | 第102-103页 |
| 3.实验结果 | 第103-121页 |
| ·化合物筛选 | 第103-105页 |
| ·三个化合物自身对于细胞存活率的影响 | 第105-106页 |
| ·三个化合物对DA诱导的细胞存活率下降的影响 | 第106-107页 |
| ·细胞LDH释放测定 | 第107-108页 |
| ·Annexin V-FITC与PI双染流式细胞术检测细胞凋亡 | 第108-109页 |
| ·荧光显微镜观察细胞核形态变化 | 第109-111页 |
| ·细胞内GSH水平测定 | 第111-112页 |
| ·细胞内总SOD活性测定 | 第112-113页 |
| ·细胞内ROS水平测定 | 第113-115页 |
| ·细胞⊿Ψm测定 | 第115-116页 |
| ·RT-PCR测定P53和Bax/Bcl-2 mRNA水平 | 第116-118页 |
| ·Western blot法检测线粒体内Cyt C,AIF释放及活性caspase-3表达量 | 第118-121页 |
| 4.讨论 | 第121-129页 |
| 结论与展望 | 第129-131页 |
| 通过本研究得到如下结论 | 第129页 |
| 对本研究的展望 | 第129-131页 |
| 参考文献 | 第131-152页 |
| 致谢 | 第152-153页 |
| 博士在读期间投稿论文题录及专利申请 | 第153-154页 |
| 作者简历 | 第154页 |
