中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-12页 |
英文缩略词 | 第12-15页 |
1 前言 | 第15-27页 |
·扩展蛋白的发现 | 第15-16页 |
·扩展蛋白的结构 | 第16-17页 |
·扩展蛋白的基因家族 | 第17-18页 |
·扩展蛋白的功能 | 第18-20页 |
·扩展蛋白在根系发育中的作用 | 第20-21页 |
·扩展蛋白在果实完熟中的作用 | 第21-22页 |
·扩展蛋白与激素的关系 | 第22-24页 |
·植物质膜ATPases 的功能与作用机理 | 第24-26页 |
·质膜H~+-ATPase 功能与作用机理 | 第24-25页 |
·质膜Ca~(2+)-ATPase 生化特性和生理功能 | 第25-26页 |
·本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
2. 材料与方法 | 第27-39页 |
·实验材料 | 第27-28页 |
·植物材料及处理 | 第27页 |
·菌株与质粒 | 第27-28页 |
·酶及生化试剂 | 第28页 |
·PCR 引物 | 第28页 |
·试验方法 | 第28-39页 |
·植物材料总RNA 的提取 | 第28-29页 |
·反转录cDNA 第一条链的合成 | 第29页 |
·cDNA 纯化(用于5′RACE) | 第29页 |
·对cDNA 进行末端加尾(用于5′RACE) | 第29-30页 |
·cDNA 全长序列的获得 | 第30-31页 |
·扩展蛋白 3′ 端基因片段的克隆 | 第30页 |
·5′RACE 获得5′端序列 | 第30-31页 |
·DNA 片段与克隆载体的连接 | 第31页 |
·凝胶电泳中DNA 片段的回收 | 第31页 |
·碱法小量质粒DNA 的提取 | 第31-32页 |
·DNA 序列测定 | 第32页 |
·地高辛(DIG)标记的Northern 杂交 | 第32-35页 |
·MhEXP2 基因原核表达载体的构建 | 第35-36页 |
·MhEXP2 基因正义表达载体的构建 | 第36-37页 |
·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第37-38页 |
·农杆菌感受态细胞制备 | 第37-38页 |
·冻融法转化农杆菌 | 第38页 |
·农杆菌介导的烟草的转化 | 第38页 |
·质膜H~+-ATPase 活性的测定 | 第38页 |
·质膜Ca~(2+)-ATPase 活性的测定 | 第38页 |
·内源激素分析采用 HPLC 方法 | 第38-39页 |
3. 结果与分析 | 第39-57页 |
·基因的分离 | 第39-40页 |
·MhEXP 3′片段的分离 | 第39页 |
·MhEXP 5′片段的分离(以MhEXP1 为例) | 第39页 |
·MhEXP 全长cDNA 的分离(以MhEXP1 为例) | 第39-40页 |
·平邑甜茶扩展蛋白基因(MhEXP)的序列分析 | 第40-49页 |
·基因的表达分析 | 第49-51页 |
·MhEXP1 基因Northern blot 分析 | 第49-50页 |
·MhEXP1 基因在平邑甜茶根叶中的表达 | 第49-50页 |
·IBA 处理时间对平邑甜茶MhEXP1 基因表达的影响 | 第50页 |
·MhEXP2 基因Northern blot 分析 | 第50-51页 |
·MhEXP2 基因在平邑甜茶根叶中的表达 | 第50-51页 |
·IBA 处理时间对平邑甜茶MhEXP2 基因表达的影响 | 第51页 |
·IBA 对根系ATPase 活性的影响 | 第51-52页 |
·IBA 对根系质膜Ca~(2+)-ATPase 活性的影响 | 第51页 |
·IBA 对根系质膜H~+-ATPase 活性的影响 | 第51-52页 |
·外源IBA 处理对平邑甜茶白色新根内源激素的影响 | 第52-54页 |
·IAA 含量的变化 | 第52-53页 |
·ZT 含量的变化 | 第53页 |
·ABA 含量的变化 | 第53-54页 |
·IAA/ABA 值的变化 | 第54页 |
·MhEXP2 在大肠杆菌中的表达 | 第54-55页 |
·原核表达载体的构建 | 第54-55页 |
·重组蛋白表达与SDS-PAGE 分析 | 第55页 |
·转基因烟草表达载体pBI121- MhEXP2 的构建 | 第55-57页 |
4. 讨论 | 第57-61页 |
·扩展蛋白基因与平邑甜茶根系的生长发育 | 第57-58页 |
·IBA 对平邑甜茶根系质膜ATPases 活性的调控 | 第58-59页 |
·IBA 对平邑甜茶内源激素的调控 | 第59-61页 |
5. 结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第74页 |