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平邑甜茶根系MhEXP基因的克隆、表达及其生理功能的初步研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-12页
英文缩略词第12-15页
1 前言第15-27页
   ·扩展蛋白的发现第15-16页
   ·扩展蛋白的结构第16-17页
   ·扩展蛋白的基因家族第17-18页
   ·扩展蛋白的功能第18-20页
   ·扩展蛋白在根系发育中的作用第20-21页
   ·扩展蛋白在果实完熟中的作用第21-22页
   ·扩展蛋白与激素的关系第22-24页
   ·植物质膜ATPases 的功能与作用机理第24-26页
     ·质膜H~+-ATPase 功能与作用机理第24-25页
     ·质膜Ca~(2+)-ATPase 生化特性和生理功能第25-26页
   ·本研究的目的和意义第26-27页
2. 材料与方法第27-39页
   ·实验材料第27-28页
     ·植物材料及处理第27页
     ·菌株与质粒第27-28页
     ·酶及生化试剂第28页
     ·PCR 引物第28页
   ·试验方法第28-39页
     ·植物材料总RNA 的提取第28-29页
     ·反转录cDNA 第一条链的合成第29页
     ·cDNA 纯化(用于5′RACE)第29页
     ·对cDNA 进行末端加尾(用于5′RACE)第29-30页
     ·cDNA 全长序列的获得第30-31页
       ·扩展蛋白 3′ 端基因片段的克隆第30页
       ·5′RACE 获得5′端序列第30-31页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第31页
     ·凝胶电泳中DNA 片段的回收第31页
     ·碱法小量质粒DNA 的提取第31-32页
     ·DNA 序列测定第32页
     ·地高辛(DIG)标记的Northern 杂交第32-35页
     ·MhEXP2 基因原核表达载体的构建第35-36页
     ·MhEXP2 基因正义表达载体的构建第36-37页
     ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化第37-38页
       ·农杆菌感受态细胞制备第37-38页
       ·冻融法转化农杆菌第38页
       ·农杆菌介导的烟草的转化第38页
     ·质膜H~+-ATPase 活性的测定第38页
     ·质膜Ca~(2+)-ATPase 活性的测定第38页
     ·内源激素分析采用 HPLC 方法第38-39页
3. 结果与分析第39-57页
   ·基因的分离第39-40页
     ·MhEXP 3′片段的分离第39页
     ·MhEXP 5′片段的分离(以MhEXP1 为例)第39页
     ·MhEXP 全长cDNA 的分离(以MhEXP1 为例)第39-40页
   ·平邑甜茶扩展蛋白基因(MhEXP)的序列分析第40-49页
   ·基因的表达分析第49-51页
     ·MhEXP1 基因Northern blot 分析第49-50页
       ·MhEXP1 基因在平邑甜茶根叶中的表达第49-50页
       ·IBA 处理时间对平邑甜茶MhEXP1 基因表达的影响第50页
     ·MhEXP2 基因Northern blot 分析第50-51页
       ·MhEXP2 基因在平邑甜茶根叶中的表达第50-51页
       ·IBA 处理时间对平邑甜茶MhEXP2 基因表达的影响第51页
   ·IBA 对根系ATPase 活性的影响第51-52页
     ·IBA 对根系质膜Ca~(2+)-ATPase 活性的影响第51页
     ·IBA 对根系质膜H~+-ATPase 活性的影响第51-52页
   ·外源IBA 处理对平邑甜茶白色新根内源激素的影响第52-54页
     ·IAA 含量的变化第52-53页
     ·ZT 含量的变化第53页
     ·ABA 含量的变化第53-54页
     ·IAA/ABA 值的变化第54页
   ·MhEXP2 在大肠杆菌中的表达第54-55页
     ·原核表达载体的构建第54-55页
     ·重组蛋白表达与SDS-PAGE 分析第55页
   ·转基因烟草表达载体pBI121- MhEXP2 的构建第55-57页
4. 讨论第57-61页
   ·扩展蛋白基因与平邑甜茶根系的生长发育第57-58页
   ·IBA 对平邑甜茶根系质膜ATPases 活性的调控第58-59页
   ·IBA 对平邑甜茶内源激素的调控第59-61页
5. 结论第61-62页
参考文献第62-73页
致谢第73-74页
攻读硕士学位期间发表论文情况第74页

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