| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表(ABBREVIATIONS) | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-31页 |
| ·问题的提出 | 第13-15页 |
| ·前人研究进展 | 第15-30页 |
| ·植物原生质体及原生质体融合研究概况 | 第15-16页 |
| ·杂种早期筛选技术及发展 | 第16-17页 |
| ·杂种鉴定技术及发展 | 第17-21页 |
| ·形态学鉴定 | 第17-18页 |
| ·细胞学鉴定 | 第18页 |
| ·生化鉴定 | 第18页 |
| ·分子标记鉴定 | 第18-21页 |
| ·柑橘体细胞杂种或胞质杂种胞质基因组的遗传模式 | 第21-22页 |
| ·叶绿体基因组遗传 | 第21-22页 |
| ·线粒体基因组遗传 | 第22页 |
| ·胞质体杂交与CMS性状转移 | 第22-29页 |
| ·胞质杂种的产生方式 | 第23-24页 |
| ·对称融合中胞质杂种产生的可能机理 | 第24页 |
| ·原生质体融合转移CMS性状的研究现状 | 第24-28页 |
| ·CMS性状的转移在作物育种上的应用 | 第28-29页 |
| ·体细胞杂种的生长优势现象 | 第29-30页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第30-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-40页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·方法 | 第31-40页 |
| ·材料准备 | 第31页 |
| ·胚性悬浮系建立 | 第31页 |
| ·叶肉亲本准备 | 第31页 |
| ·原生质体相关操作 | 第31-35页 |
| ·原生质体分离与纯化 | 第31-33页 |
| ·原生质体活性测定 | 第33页 |
| ·植板率统计 | 第33-34页 |
| ·原生质体融合 | 第34页 |
| ·融合产物培养 | 第34页 |
| ·植株移栽 | 第34-35页 |
| ·GFP荧光检测及杂种的早期筛选 | 第35页 |
| ·体细胞杂种的鉴定 | 第35-40页 |
| ·形态学特征 | 第35页 |
| ·倍性分析 | 第35页 |
| ·DNA提取及检测 | 第35-36页 |
| ·SSR分析 | 第36-37页 |
| ·CAPS分析 | 第37-39页 |
| ·cpSSR分析 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-72页 |
| ·转GFP基因国庆1号愈伤组织原生质体的培养及胚状体诱导 | 第40-41页 |
| ·不同亲本组合融合及再生进程 | 第41页 |
| ·对称融合转移国庆1号温州蜜柑CMS性状 | 第41-49页 |
| ·国庆1号+沙田柚 | 第41-46页 |
| ·原生质体融合、培养及植株再生 | 第41-44页 |
| ·两类植株的倍性确定 | 第44页 |
| ·两类植株的核DNA和胞质DNA来源分析 | 第44-46页 |
| ·国庆1号+冰糖橙 | 第46-47页 |
| ·原生质体培养及植株再生 | 第46-47页 |
| ·再生产物倍性分析 | 第47页 |
| ·胞质杂种特性确定 | 第47页 |
| ·国庆1号+佩奇橘柚 | 第47-49页 |
| ·原生质体培养及植株再生 | 第47-48页 |
| ·倍性分析及胞质杂种的分子鉴定 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49页 |
| ·转GFP基因柑橘材料在原生质体融合中的应用 | 第49-66页 |
| ·胚状体阶段GFP表达与否与再生杂种倍性的关系(转GFP标记国庆1号+四季橘) | 第49-53页 |
| ·GFP激发下原生质体培养及植株的再生过程 | 第51-52页 |
| ·再生愈伤组织和植株的倍性分析 | 第52页 |
| ·再生产物的分子鉴定 | 第52-53页 |
| ·国庆1号+转GFP基因伏令夏橙 | 第53-55页 |
| ·原生质体培养及植株再生 | 第53-54页 |
| ·自根苗倍性分析 | 第54页 |
| ·自根苗分子鉴定 | 第54-55页 |
| ·默科特橘橙+转GFP基因伏令夏橙 | 第55-60页 |
| ·默科特橘橙胚性愈伤组织原生质体的培养 | 第55-56页 |
| ·体细胞杂种植株的再生 | 第56-58页 |
| ·再生植株倍性分析 | 第58页 |
| ·二倍体与六倍体杂种胚状体GFP表达强弱的比较 | 第58-59页 |
| ·分子鉴定 | 第59-60页 |
| ·澳洲指橘+转GFP基因伏令夏橙 | 第60-63页 |
| ·原生质体分离 | 第60页 |
| ·原生质体融合及胚状体再生 | 第60-62页 |
| ·倍性分析 | 第62页 |
| ·杂种分子鉴定 | 第62-63页 |
| ·伏令夏橙+转GFP基因伏令夏橙的同源融合 | 第63-66页 |
| ·胚状体及完整植株的再生 | 第63-64页 |
| ·倍性分析 | 第64-65页 |
| ·有GFP荧光表达植株再生机理的推测 | 第65-66页 |
| ·小结 | 第66页 |
| ·异源四倍体体细胞杂种的创造 | 第66-72页 |
| ·冰糖橙+四季橘 | 第67-69页 |
| ·原生质体培养及植株再生 | 第67-68页 |
| ·体细胞杂种的倍性分析 | 第68页 |
| ·体细胞杂种植株细胞核和胞质基因组的分子鉴定 | 第68-69页 |
| ·默科特橘橙+HB柚 | 第69-71页 |
| ·植株再生 | 第69-70页 |
| ·倍性确定 | 第70页 |
| ·体细胞杂种细胞核和胞质基因组的来源分析 | 第70-71页 |
| ·小结 | 第71-72页 |
| 4 讨论 | 第72-81页 |
| ·对称融合转移CMS性状为柑橘无核育种提供了新思路 | 第72-73页 |
| ·柑橘体细胞杂种再生优势与早期筛选 | 第73-77页 |
| ·再生愈伤团的生长势与杂种与否无关 | 第74-75页 |
| ·以丧失胚性愈伤组织为悬浮系亲本,再生胚状体可确定为杂种来源 | 第75-76页 |
| ·杂种细胞团往往较悬浮系亲本再生产物较早进入胚状体阶段 | 第76页 |
| ·不能确定悬浮系亲本是否丧失胚性时,最早成胚可确定为杂种来源 | 第76-77页 |
| ·转GFP基因愈伤组织在柑橘细胞融合中的应用 | 第77-78页 |
| ·柑橘对称融合中胞质杂种形成的影响因素 | 第78-79页 |
| ·柑橘对称融合中胞质基因组的遗传 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-95页 |
| 图版和说明(PLATES AND EXPLANATIONS) | 第95-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 附录 攻读博士学位期间发表论文 | 第117页 |