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柑橘雄性不育胞质杂种创造及相关基础研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
缩略词表(ABBREVIATIONS)第12-13页
1 前言第13-31页
   ·问题的提出第13-15页
   ·前人研究进展第15-30页
     ·植物原生质体及原生质体融合研究概况第15-16页
     ·杂种早期筛选技术及发展第16-17页
     ·杂种鉴定技术及发展第17-21页
       ·形态学鉴定第17-18页
       ·细胞学鉴定第18页
       ·生化鉴定第18页
       ·分子标记鉴定第18-21页
     ·柑橘体细胞杂种或胞质杂种胞质基因组的遗传模式第21-22页
       ·叶绿体基因组遗传第21-22页
       ·线粒体基因组遗传第22页
     ·胞质体杂交与CMS性状转移第22-29页
       ·胞质杂种的产生方式第23-24页
       ·对称融合中胞质杂种产生的可能机理第24页
       ·原生质体融合转移CMS性状的研究现状第24-28页
       ·CMS性状的转移在作物育种上的应用第28-29页
     ·体细胞杂种的生长优势现象第29-30页
   ·本研究的目的和内容第30-31页
2 材料与方法第31-40页
   ·材料第31页
   ·方法第31-40页
     ·材料准备第31页
       ·胚性悬浮系建立第31页
       ·叶肉亲本准备第31页
     ·原生质体相关操作第31-35页
       ·原生质体分离与纯化第31-33页
       ·原生质体活性测定第33页
       ·植板率统计第33-34页
       ·原生质体融合第34页
       ·融合产物培养第34页
       ·植株移栽第34-35页
     ·GFP荧光检测及杂种的早期筛选第35页
     ·体细胞杂种的鉴定第35-40页
       ·形态学特征第35页
       ·倍性分析第35页
       ·DNA提取及检测第35-36页
       ·SSR分析第36-37页
       ·CAPS分析第37-39页
       ·cpSSR分析第39-40页
3 结果与分析第40-72页
   ·转GFP基因国庆1号愈伤组织原生质体的培养及胚状体诱导第40-41页
   ·不同亲本组合融合及再生进程第41页
   ·对称融合转移国庆1号温州蜜柑CMS性状第41-49页
     ·国庆1号+沙田柚第41-46页
       ·原生质体融合、培养及植株再生第41-44页
       ·两类植株的倍性确定第44页
       ·两类植株的核DNA和胞质DNA来源分析第44-46页
     ·国庆1号+冰糖橙第46-47页
       ·原生质体培养及植株再生第46-47页
       ·再生产物倍性分析第47页
       ·胞质杂种特性确定第47页
     ·国庆1号+佩奇橘柚第47-49页
       ·原生质体培养及植株再生第47-48页
       ·倍性分析及胞质杂种的分子鉴定第48-49页
     ·小结第49页
   ·转GFP基因柑橘材料在原生质体融合中的应用第49-66页
     ·胚状体阶段GFP表达与否与再生杂种倍性的关系(转GFP标记国庆1号+四季橘)第49-53页
       ·GFP激发下原生质体培养及植株的再生过程第51-52页
       ·再生愈伤组织和植株的倍性分析第52页
       ·再生产物的分子鉴定第52-53页
     ·国庆1号+转GFP基因伏令夏橙第53-55页
       ·原生质体培养及植株再生第53-54页
       ·自根苗倍性分析第54页
       ·自根苗分子鉴定第54-55页
     ·默科特橘橙+转GFP基因伏令夏橙第55-60页
       ·默科特橘橙胚性愈伤组织原生质体的培养第55-56页
       ·体细胞杂种植株的再生第56-58页
       ·再生植株倍性分析第58页
       ·二倍体与六倍体杂种胚状体GFP表达强弱的比较第58-59页
       ·分子鉴定第59-60页
     ·澳洲指橘+转GFP基因伏令夏橙第60-63页
       ·原生质体分离第60页
       ·原生质体融合及胚状体再生第60-62页
       ·倍性分析第62页
       ·杂种分子鉴定第62-63页
     ·伏令夏橙+转GFP基因伏令夏橙的同源融合第63-66页
       ·胚状体及完整植株的再生第63-64页
       ·倍性分析第64-65页
       ·有GFP荧光表达植株再生机理的推测第65-66页
     ·小结第66页
   ·异源四倍体体细胞杂种的创造第66-72页
     ·冰糖橙+四季橘第67-69页
       ·原生质体培养及植株再生第67-68页
       ·体细胞杂种的倍性分析第68页
       ·体细胞杂种植株细胞核和胞质基因组的分子鉴定第68-69页
     ·默科特橘橙+HB柚第69-71页
       ·植株再生第69-70页
       ·倍性确定第70页
       ·体细胞杂种细胞核和胞质基因组的来源分析第70-71页
     ·小结第71-72页
4 讨论第72-81页
   ·对称融合转移CMS性状为柑橘无核育种提供了新思路第72-73页
   ·柑橘体细胞杂种再生优势与早期筛选第73-77页
     ·再生愈伤团的生长势与杂种与否无关第74-75页
     ·以丧失胚性愈伤组织为悬浮系亲本,再生胚状体可确定为杂种来源第75-76页
     ·杂种细胞团往往较悬浮系亲本再生产物较早进入胚状体阶段第76页
     ·不能确定悬浮系亲本是否丧失胚性时,最早成胚可确定为杂种来源第76-77页
   ·转GFP基因愈伤组织在柑橘细胞融合中的应用第77-78页
   ·柑橘对称融合中胞质杂种形成的影响因素第78-79页
   ·柑橘对称融合中胞质基因组的遗传第79-81页
参考文献第81-95页
图版和说明(PLATES AND EXPLANATIONS)第95-116页
致谢第116-117页
附录 攻读博士学位期间发表论文第117页

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