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盾壳霉产孢相关基因的克隆及液体产孢条件的优化

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 文献综述第10-18页
 1 核盘菌及其作物菌核病第10-11页
   ·核盘菌的分类地位及危害第10页
   ·核盘菌的生物学特性第10页
   ·作物菌核病的防治第10-11页
 2 盾壳霉的研究进展第11-15页
   ·盾壳霉的生物学特性第12页
   ·盾壳霉的生态学特性第12-13页
   ·盾壳霉的分子生物学研究第13页
   ·盾壳霉的规模化生产第13-14页
     ·国内外一些常见生防真菌发酵条件的研究第13-14页
     ·盾壳霉的规模化生产第14页
   ·盾壳霉的生防前景第14-15页
 3 真菌孢子形成机理的研究第15-17页
 4 本项研究的意义第17-18页
第二章 盾壳霉产孢相关基因的克隆第18-39页
 1 材料与方法第18-26页
   ·材料第18-20页
     ·菌株第18页
     ·培养基、载体、抗性标记、缓冲液及其它试剂第18-19页
     ·酶、试剂盒及其它试剂第19页
     ·引物第19-20页
   ·方法第20-26页
     ·菌株的形态特征观察第20页
     ·生长速度测定第20页
     ·产生抗生物质的测定第20-21页
     ·菌株培养(用于基因组DNA的提取)第21页
     ·基因组DNA的提取第21页
     ·Southern杂交分析第21-23页
       ·酶切、电泳、转膜及固定第21-22页
       ·预杂交第22页
       ·探针标记及杂交第22-23页
     ·TAIL-PCR克隆T-DNA侧端序列第23-24页
     ·目的片段的回收及纯化第24-25页
     ·回收产物与克隆载体连接第25页
     ·利用大肠杆菌感受态细胞转化连接产物第25页
     ·重组质粒的筛选、提取及鉴定第25-26页
     ·克隆序列分析第26页
     ·CMPEX2功能初步验证第26页
 2.结果与分析第26-36页
   ·菌株的形态特征观察第26-27页
   ·生长速度测定结果第27-28页
   ·产生抗生物质能力的测定结果第28页
   ·菌株培养与DNA的提取第28页
   ·盾壳霉产孢缺陷型突变体菌株ZS-1T16229的DNA杂交分析第28-29页
   ·TAIL-PCR产物电泳分析第29页
   ·TAIL-PCR扩增T-DNA标记右端基因组DNA的克隆鉴定第29-31页
   ·TAIL-PCR扩增DNA的序列分析第31页
   ·CMPEX2功能分析第31页
   ·T-DNA标记插入破坏CMPEX2位点预测第31页
   ·CMPEX2功能初步验证结果第31-36页
 3 结论和讨论第36-39页
   ·结论第36-37页
   ·讨论第37-39页
第三章 盾壳霉ZS-1菌株液体产孢条件的优化第39-55页
 1 材料及方法第39-41页
   ·菌种与培养基第39页
     ·菌种第39页
     ·培养基第39页
   ·方法第39-41页
     ·盾壳霉孢子悬液的制备第39-40页
     ·琼脂粉对ZS-1菌株在PDB-la中生长和产孢影响的测定第40页
     ·PDB-Ia对盾壳霉ZS-1菌株分生孢子生长周期的影响第40页
     ·不同装液量对盾壳霉ZS-1菌株孢子产量的影响第40页
     ·不同接种量对盾壳霉ZS-1菌株孢子产量的影响第40-41页
     ·促进盾壳霉ZS-1菌株产孢的复合因子筛选第41页
     ·0.75%PDB-la对盾壳霉不同菌株生物产量及产孢量的影响第41页
 2.结果与分析第41-51页
   ·不同琼脂粉添加量对盾壳霉ZS-1菌丝生长及产孢的影响第41-43页
   ·盾壳霉ZS-1菌株在0.75%PDB-la中生长和产孢动态第43-44页
   ·装液量对盾壳霉ZS-1菌株分生孢子产生及生物量的影响第44-46页
   ·不同接种量对盾壳霉ZS-1分生孢子及菌丝产量的影响第46-47页
   ·促进盾壳霉ZS-1产孢的复合因子的筛选第47-49页
   ·0.75%PDB-la对盾壳霉不同菌株分生孢子及菌丝产量的影响第49-51页
 3 结论和讨论第51-55页
   ·结论第51-52页
   ·讨论第52-55页
结论与展望第55-57页
参考文献第57-64页
致谢第64页

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