| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-26页 |
| ·猪体内脂肪沉积的QTL定位研究现状 | 第11-13页 |
| ·与脂肪沉积相关的候选基因 | 第13-16页 |
| ·根据EST分离基因 | 第16-19页 |
| ·EST简介及其应用 | 第16-18页 |
| ·db EST的电子克隆技术 | 第18页 |
| ·EST筛选和克隆新基因 | 第18-19页 |
| ·比较基因组学在分离新基因中的应用 | 第19-20页 |
| ·位置克隆在分离新基因中的应用 | 第20-23页 |
| ·基因图谱 | 第20-21页 |
| ·基因定位 | 第21-23页 |
| ·体细胞杂种板(SCHP)用于染色体区域定位 | 第21页 |
| ·辐射杂种板(RH)用于染色体精细定位 | 第21-23页 |
| ·三个拟分离基因的研究现状 | 第23-26页 |
| ·烯酰—CoA异构酶简介 | 第23页 |
| ·WNT10B基因 | 第23-24页 |
| ·DKK1基因 | 第24-26页 |
| 2 研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 3 材料与方法 | 第27-38页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·样品 | 第27-28页 |
| ·DNA样品 | 第27-28页 |
| ·组织样品 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28页 |
| ·主要试剂及配制 | 第28-29页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·主要试剂配制 | 第28-29页 |
| ·主要分子生物学软件和统计软件 | 第29页 |
| ·常用的分子生物学数据库 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-38页 |
| ·猪PECI、WNT10B和DKK1基因的分离 | 第30-33页 |
| ·猪EST信息筛选和引物设计 | 第30页 |
| ·总RNA的提取和检测 | 第30-31页 |
| ·总RNA的无RNase的DNase-Ⅰ处理及其纯化 | 第31页 |
| ·RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction) | 第31-32页 |
| ·PCR扩增条件 | 第32页 |
| ·PCR产物的纯化、克隆和测序 | 第32-33页 |
| ·DNA序列同源性检索鉴定 | 第33页 |
| ·基因定位的SCHP和RH法 | 第33-35页 |
| ·引物设计 | 第33-34页 |
| ·PCR扩增分型方法 | 第34页 |
| ·数据分析方法 | 第34-35页 |
| ·采用5’-RACE和电脑克隆的方法获取PECI基因的全长cDNA及序列分析 | 第35页 |
| ·采用EST信息进行DKK1基因在全基因组中扩增 | 第35页 |
| ·PCR-RFLP方法检测猪PECI和WNT10B基因的多态性和遗传组成 | 第35-36页 |
| ·PCR扩增引物 | 第35页 |
| ·酶切条件 | 第35-36页 |
| ·基因分型 | 第36页 |
| ·PECI和WNT10B基因多态位点遗传组成的检测方法 | 第36页 |
| ·多态标记与性状的关联分析方法 | 第36页 |
| ·利用RT-PCR进行PECI、WNT10B和DKK1基因组织表达谱研究的方法 | 第36-38页 |
| 4 结果 | 第38-62页 |
| ·三个猪基因片段的分离、序列分析与鉴定结果 | 第38-45页 |
| ·根据猪EST信息设计特异性引物扩增结果 | 第38-39页 |
| ·猪烯酰CoA异构酶基因(PECI)的分离 | 第38页 |
| ·猪WNT10B基因的分离 | 第38-39页 |
| ·猪DKK1基因的分离 | 第39页 |
| ·基因分离片段的分析结果 | 第39-44页 |
| ·扩增产物的鉴定结果 | 第44-45页 |
| ·猪PECI基因、WNT10B基因和DKK1基因cDNA分析结果 | 第45-56页 |
| ·总RNA的提取和检测结果 | 第45-46页 |
| ·猪PECI基因RACE扩增结果 | 第46页 |
| ·猪PECI基因的氨基酸序列分析结果 | 第46-50页 |
| ·猪PECI基因的组织表达分析结果 | 第50-51页 |
| ·猪WNT10B基因部分氨基酸序列分析结果 | 第51-52页 |
| ·猪WNT10B基因的组织表达分析结果 | 第52页 |
| ·猪DKK1基因的氨基酸序列分析结果 | 第52-56页 |
| ·猪DKK1基因的组织表达分析结果 | 第56页 |
| ·利用杂种板进行的染色体定位结果 | 第56-57页 |
| ·猪PECI和WNT10B基因的遗传变异与遗传组成的检测结果 | 第57-62页 |
| ·PECI基因的遗传变异与遗传组成 | 第57-59页 |
| ·PECI基因3’-UTR区SNP的发现 | 第57-58页 |
| ·PECI基因3’-UTR区PvuⅡ酶切位点多态性的检测结果 | 第58-59页 |
| ·WNT10B基因的遗传变异与遗传组成 | 第59-62页 |
| ·WNT10B基因3’-UTR区SNP的发现 | 第59-60页 |
| ·WNT10B基因3’-UTR区Cfr42I酶切位点多态性的检测结果 | 第60-62页 |
| 5 讨论 | 第62-66页 |
| ·关于特异性引物的设计 | 第62页 |
| ·关于三个新基因的定位 | 第62-63页 |
| ·关于SNP检测 | 第63页 |
| ·关于基因与性状关联分析 | 第63-64页 |
| ·关于PECI和DKK1基因结构功能域的预测 | 第64-65页 |
| ·关于PECI、WNT10B和DKK1基因的组织表达谱分析 | 第65-66页 |
| 6 小结 | 第66-68页 |
| ·本研究获得的主要研究结果 | 第66页 |
| ·本研究的创新点与特色 | 第66-67页 |
| ·本研究的不足和引出的问题 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录1 缩略词表 | 第74-75页 |
| 附录2 主要性状的中英文对照和缩写 | 第75-76页 |
| 在读期间发表和待发表的论文题录 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
