| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-39页 |
| §1.1 OPs的结构 | 第14-15页 |
| §1.2 OPs的发展史 | 第15-16页 |
| §1.3 OPs引发的问题 | 第16-19页 |
| §1.4 生物修复法消除有机磷农药污染 | 第19-29页 |
| §1.4.1 微生物法降解OPs | 第20-22页 |
| §1.4.2 酶法降解OPs | 第22-29页 |
| §1.4.2.1 OPs降解酶 | 第22-24页 |
| §1.4.2.2 酶固定化方法 | 第24-27页 |
| §1.4.2.3 固定化酶的载体——高分子材料 | 第27-29页 |
| §1.4.3 酶膜生物反应器 | 第29页 |
| §1.5 OPs的酶法检测和生物传感器检测技术 | 第29-36页 |
| §1.5.1 识别OPs的酶及识别原理 | 第30-32页 |
| §1.5.1.1 胆碱酯酶和OPs对其酶活的抑制作用 | 第30-32页 |
| §1.5.1.2 OPH和对OPs的水解作用 | 第32页 |
| §1.5.2 检测OPs的酶生物传感器 | 第32-36页 |
| §1.6 课题的提出和实验方案 | 第36-39页 |
| §1.6.1 课题的意义 | 第36-37页 |
| §1.6.2 实验方案 | 第37-39页 |
| §1.6.2.1 三唑磷降解菌的筛选及其降解途径研究 | 第37页 |
| §1.6.2.2 有机磷水解酶的分离纯化 | 第37页 |
| §1.6.2.3 降解OPs的OPH膜反应器 | 第37页 |
| §1.6.2.4 OPH游离酶检测甲基对硫磷 | 第37-38页 |
| §1.6.2.5 pH电极型OPH传感器数学模拟 | 第38-39页 |
| 第二章 三唑磷降解菌的筛选及其降解途径研究 | 第39-61页 |
| §2.1 前言 | 第39-40页 |
| §2.2 实验部分 | 第40-46页 |
| §2.2.1 实验原料与仪器 | 第40页 |
| §2.2.1.1 实验原料 | 第40页 |
| §2.2.1.2 实验仪器 | 第40页 |
| §2.2.2 TAP降解菌的筛选 | 第40-41页 |
| §2.2.2.1 筛选用培养基 | 第40-41页 |
| §2.2.2.2 筛选过程 | 第41页 |
| §2.2.3 菌种鉴定 | 第41-44页 |
| §2.2.3.1 Tris平衡酚法提取菌种基因组DNA | 第42页 |
| §2.2.3.2 基因组DNA的PCR扩增 | 第42-43页 |
| §2.2.3.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第43-44页 |
| §2.2.4 降解菌生长条件的确定 | 第44页 |
| §2.2.4.1 不同碳源对生长的影响 | 第44页 |
| §2.2.4.2 甲醇浓度对降解菌生长的影响 | 第44页 |
| §2.2.4.3 pH和温度对降解菌生长的影响 | 第44页 |
| §2.2.5 降解菌对TAP的降解 | 第44-46页 |
| §2.2.5.1 降解菌以TAP为不同营养时的降解 | 第44-45页 |
| §2.2.5.2 菌体对不同浓度TAP的降解 | 第45页 |
| §2.2.5.3 气相色谱分析 | 第45-46页 |
| §2.2.6 降解菌降解TAP的降解途径 | 第46页 |
| §2.2.6.1 降解实验 | 第46页 |
| §2.2.6.2 培养液组分分析 | 第46页 |
| §2.3 结果与讨论 | 第46-59页 |
| §2.3.1 TAP降解菌的筛选和菌种鉴定 | 第46-50页 |
| §2.3.2 降解菌的生长条件 | 第50-53页 |
| §2.3.2.1 碳源 | 第50-52页 |
| §2.3.2.2 甲醇浓度影响 | 第52页 |
| §2.3.2.3 pH和温度影响 | 第52-53页 |
| §2.3.3 降解菌对TAP的降解 | 第53-56页 |
| §2.3.4 降解菌对TAP的降解途径 | 第56-59页 |
| §2.4 小结 | 第59-61页 |
| 第三章 有机磷水解酶的分离纯化 | 第61-78页 |
| §3.1 前言 | 第61-62页 |
| §3.2 实验部分 | 第62-73页 |
| §3.2.1 实验原料与仪器 | 第62页 |
| §3.2.1.1 实验原料 | 第62页 |
| §3.2.1.2 实验仪器 | 第62页 |
| §3.2.2 分析方法 | 第62-67页 |
| §3.2.2.1 考马斯亮蓝法测蛋白含量 | 第62-64页 |
| §3.2.2.1.1 考马斯亮蓝试剂配制 | 第63页 |
| §3.2.2.1.2 蛋白质含量测定 | 第63页 |
| §3.2.2.1.3 BSA标准曲线的绘制 | 第63-64页 |
| §3.2.2.2 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第64-67页 |
| §3.2.2.2.1 SDS-PAGE有关试剂配制 | 第64-65页 |
| §3.2.2.2.2 SDS-PAGE电泳 | 第65-67页 |
| §3.2.3 OPH的分离纯化 | 第67-73页 |
| §3.2.3.1 粗酶液制备 | 第68页 |
| §3.2.3.2 (NH_4)_2SO_4分级沉淀 | 第68-69页 |
| §3.2.3.3 透析脱盐 | 第69页 |
| §3.2.3.4 凝胶过滤层析 | 第69-71页 |
| §3.2.3.4.1 MA99—1自动核酸蛋白分离层析仪组装 | 第69页 |
| §3.2.3.4.2 装柱、加样和洗脱 | 第69-71页 |
| §3.2.3.5 酶活测定 | 第71-73页 |
| §3.2.3.5.1 酶活测定方法 | 第71页 |
| §3.2.3.5.2 对硝基酚标准曲线的绘制 | 第71-73页 |
| §3.2.3.5.3 酶活计算 | 第73页 |
| §3.3 结果与讨论 | 第73-77页 |
| §3.3.1 粗酶液SDS-PAGE | 第73-74页 |
| §3.3.2 (NH_4)_2SO_4分级沉淀 | 第74-75页 |
| §3.3.3 凝胶过滤层析 | 第75-76页 |
| §3.3.4 酶活 | 第76-77页 |
| §3.4 小结 | 第77-78页 |
| 第四章 降解OPs的OPH膜反应器 | 第78-96页 |
| §4.1 前言 | 第78-79页 |
| §4.2 实验部分 | 第79-85页 |
| §4.2.1 实验原料与仪器 | 第79-81页 |
| §4.2.1.1 实验原料 | 第79页 |
| §4.2.1.2 实验仪器 | 第79页 |
| §4.2.1.3 酶膜反应器装置 | 第79-80页 |
| §4.2.1.4 不同浓度和不同pH的磷酸缓冲液配制 | 第80-81页 |
| §4.2.2 OPH在高分子微孔滤膜上的固定化 | 第81-83页 |
| §4.2.2.1 微孔膜材料的选择 | 第81页 |
| §4.2.2.2 不同固定方法比较 | 第81-82页 |
| §4.2.2.3 交联组分对固定化的影响 | 第82页 |
| §4.2.2.3.1 10％BSA溶液的量对固定化影响 | 第82页 |
| §4.2.2.3.2 交联剂的量对固定化影响 | 第82页 |
| §4.2.2.4 固定化酶膜的酶活损失情况 | 第82-83页 |
| §4.2.2.5 固定化OPH酶活的测定 | 第83页 |
| §4.2.3 OPH酶膜降解甲基对硫磷 | 第83-85页 |
| §4.2.3.1 固定化酶量对降解的影响 | 第83-84页 |
| §4.2.3.2 蠕动泵流速对降解的影响 | 第84页 |
| §4.2.3.3 原料液的pH对降解的影响 | 第84页 |
| §4.2.3.4 酶膜降解甲基对硫磷的效果评价 | 第84-85页 |
| §4.2.3.5 甲基对硫磷浓度对降解的影响 | 第85页 |
| §4.2.3.6 固定化酶降解甲基对硫磷的降解曲线 | 第85页 |
| §4.3 结果与讨论 | 第85-94页 |
| §4.3.1 OPH在高分子微孔滤膜上的固定化 | 第85-91页 |
| §4.3.1.1 膜材料亲疏水性对固定化的影响 | 第85-88页 |
| §4.3.1.2 不同固定方法比较 | 第88-89页 |
| §4.3.1.3 交联组分对固定化的影响 | 第89-91页 |
| §4.3.1.3.1 10％BSA溶液的量对固定化影响 | 第89-90页 |
| §4.3.1.3.2 交联剂的量对固定化影响 | 第90-91页 |
| §4.3.1.4 固定化酶膜的酶活损失情况 | 第91页 |
| §4.3.2 OPH酶膜降解甲基对硫磷 | 第91-94页 |
| §4.3.2.1 固定化酶量对降解的影响 | 第91-92页 |
| §4.3.2.2 蠕动泵流速对降解的影响 | 第92页 |
| §4.3.2.3 原料液pH对降解的影响 | 第92-93页 |
| §4.3.2.4 原料液浓度对降解的影响 | 第93-94页 |
| §4.3.2.5 固定化酶降解甲基对硫磷的降解曲线 | 第94页 |
| §4.4 小结 | 第94-96页 |
| 第五章 游离OPH检测甲基对硫磷 | 第96-106页 |
| §5.1 前言 | 第96页 |
| §5.2 实验部分 | 第96-100页 |
| §5.2.1 实验材料与仪器 | 第96-97页 |
| §5.2.2 OPH游离酶的酶活及动力学参数 | 第97-98页 |
| §5.2.2.1 酶活测定 | 第97页 |
| §5.2.2.2 OPH的反应动力学参数 | 第97-98页 |
| §5.2.3 游离的OPH检测甲基对硫磷浓度 | 第98-100页 |
| §5.2.3.1 酶反应曲线 | 第98页 |
| §5.2.3.2 缓冲液浓度和pH对反应速度的影响 | 第98-99页 |
| §5.2.3.3 酶量对反应速度的影响 | 第99页 |
| §5.2.3.4 温度对反应速度的影响 | 第99-100页 |
| §5.2.3.5 OPH检测甲基对硫磷的检测曲线 | 第100页 |
| §5.3 结果与讨论 | 第100-104页 |
| §5.3.1 OPH游离酶的酶活及动力学参数 | 第100-101页 |
| §5.3.2 OPH游离酶检测甲基对硫磷浓度 | 第101-104页 |
| §5.3.2.1 酶反应曲线 | 第101页 |
| §5.3.2.2 缓冲液浓度和pH对反应速度的影响 | 第101-102页 |
| §5.3.2.3 酶量对反应速度的影响 | 第102-103页 |
| §5.3.2.4 温度对反应速度的影响 | 第103-104页 |
| §5.3.2.5 OPH检测甲基对硫磷的检测曲线 | 第104页 |
| §5.4 小结 | 第104-106页 |
| 第六章 pH电极型OPH传感器数学模型 | 第106-130页 |
| §6.1 前言 | 第106-107页 |
| §6.2 OPH-pH酶电极模型 | 第107-122页 |
| §6.2.1 OPH-pH酶电极的检测原理 | 第107-108页 |
| §6.2.2 模型推导 | 第108-122页 |
| §6.2.2.1 模型推导中所作的假设 | 第108-109页 |
| §6.2.2.2 检测过程中的反应 | 第109页 |
| §6.2.2.3 描述过程的微分方程组 | 第109-111页 |
| §6.2.2.4 微分方程组中各反应速率的表达式 | 第111-113页 |
| §6.2.2.4.1 水解反应R | 第111-112页 |
| §6.2.2.4.2 电离反应r_(P_hH)，r_(ZH)，r_(AH) | 第112-113页 |
| §6.2.2.5 描述稳态过程的微分方程组及求解 | 第113-122页 |
| §6.2.2.5.1 稳态过程的微分方程组 | 第113-114页 |
| §6.2.2.5.2 稳态过程方程组的简化 | 第114-121页 |
| §6.2.2.5.3 稳态过程方程组的求解 | 第121-122页 |
| §6.3 模型的检验实验 | 第122页 |
| §6.4 结果与讨论 | 第122-128页 |
| §6.4.1 模型计算结果与讨论 | 第122-126页 |
| §6.4.2 模型计算结果与实验结果的比较 | 第126-128页 |
| §6.5 小结 | 第128-130页 |
| 第七章 总结 | 第130-133页 |
| §7.1 论文小结 | 第130-131页 |
| §7.2 本论文的创新点 | 第131-132页 |
| §7.3 不足与展望 | 第132-133页 |
| 附录Ⅰ | 第133-134页 |
| 附录Ⅱ | 第134-140页 |
| 符号说明 | 第140-142页 |
| 参考文献 | 第142-152页 |
| 博士论文工作期间发表文章和科研成果 | 第152-153页 |
| 致谢 | 第153页 |
