摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一篇 文献综述 | 第11-22页 |
第一章 腐烂茎线虫的发生、危害和分布 | 第12-14页 |
·腐烂茎线虫的分类地位 | 第12页 |
·发生分布 | 第12页 |
·危害 | 第12-14页 |
·寄主范围 | 第12-13页 |
·传播方式 | 第13页 |
·危害症状 | 第13-14页 |
第二章 腐烂茎线虫的形态学鉴定 | 第14-16页 |
·腐烂茎线虫的基本特征 | 第14-16页 |
·雌虫 | 第14页 |
·雄虫 | 第14-16页 |
第三章 腐烂茎线虫的生物学特性 | 第16-17页 |
·生活史 | 第16页 |
·人工培养 | 第16-17页 |
第四章 植物线虫的分子分类和鉴定 | 第17-22页 |
·生物化学分类 | 第17-18页 |
·电泳研究 | 第17-18页 |
·蛋白质单向电泳及双向电泳 | 第17页 |
·同工酶研究 | 第17-18页 |
·血清学技术 | 第18页 |
·以DNA为基础的分子鉴定法 | 第18-22页 |
·PCR特异性扩增 | 第20页 |
·随机扩增多态性分析(RAPD) | 第20页 |
·限制性内切酶片段长度多态性分析(RFLPs) | 第20-21页 |
·以基因组 DNA为靶序列 | 第21页 |
·以线粒体DNA(mtDNA)为靶序列 | 第21页 |
·以核糖体 DNA(rDNA)为靶序列 | 第21页 |
·DNA分子杂交技术 | 第21-22页 |
第二篇 研究内容 | 第22-51页 |
第五章 腐烂茎线虫的单异活体培养方法研究 | 第22-26页 |
·材料 | 第22页 |
·线虫样品 | 第22页 |
·供试菌株 | 第22页 |
·试剂及仪器 | 第22页 |
·方法 | 第22-24页 |
·玉米灰葡萄孢培养基的制备 | 第22页 |
·腐烂茎线虫的表面消毒 | 第22-23页 |
·腐烂茎线虫的接种 | 第23-24页 |
·腐烂茎线虫的转接 | 第24页 |
·结果分析 | 第24页 |
·讨论 | 第24-26页 |
第六章 不同地理群体腐烂茎线虫的形态学研究 | 第26-36页 |
·材料 | 第26页 |
·线虫标本 | 第26页 |
·试剂及仪器 | 第26页 |
·方法 | 第26-28页 |
·临时玻片的制作 | 第26页 |
·永久玻片的制作 | 第26-27页 |
·线虫的固定 | 第26-27页 |
·线虫的脱水 | 第27页 |
·制片 | 第27页 |
·电镜样品的制作 | 第27-28页 |
·形态学观察及数值测量 | 第28页 |
·结果分析 | 第28-34页 |
·受茎线虫寄生为害后寄主的症状 | 第28-29页 |
·腐烂茎线虫的基本形态特征 | 第29-32页 |
·形态测量值 | 第32-33页 |
·扫描电镜观察 | 第33-34页 |
·讨论 | 第34-36页 |
第七章 中国腐烂茎线虫不同地理群体rDNA的ITS区PCR-RFLPs及序列分析 | 第36-46页 |
·材料 | 第36页 |
·标本 | 第36页 |
·试剂及仪器 | 第36页 |
·方法 | 第36-40页 |
·DNA提取 | 第36-37页 |
·PCR扩增 | 第37页 |
·电泳 | 第37页 |
·产物纯化 | 第37-38页 |
·ITS区 DNA的克隆 | 第38-40页 |
·连接 | 第38页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备(CaCl_2) | 第38页 |
·转化 | 第38-39页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第39页 |
·重组质粒的PCR鉴定 | 第39-40页 |
·RFLPs分析 | 第40页 |
·序列分析 | 第40页 |
·结果分析 | 第40-45页 |
·腐烂茎线虫rDNA ITS区的 PCR扩增 | 第40-41页 |
·腐烂茎线虫rDNA ITS区的 RFLPs分析 | 第41-43页 |
·腐烂茎线虫rDNA ITS区 PCR扩增产物序列比较 | 第43-45页 |
·讨论 | 第45-46页 |
第八章 腐烂茎线虫特异性检测技术的研究 | 第46-51页 |
·材料 | 第46-47页 |
·标本 | 第46-47页 |
·试剂及仪器 | 第47页 |
·方法 | 第47-48页 |
·DNA的提取 | 第47页 |
·通用引物AB、TW扩增rDNA ITS区 | 第47页 |
·rDNA ITS区 PCR产物的纯化、克隆和测序 | 第47页 |
·特异性引物的设计 | 第47页 |
·特异性片段 PCR扩增及电泳检查 | 第47页 |
·特异性引物灵敏性研究 | 第47-48页 |
·结果分析 | 第48-49页 |
·讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-56页 |
附录A 主要试剂 | 第56-59页 |
附录B 主要仪器 | 第59页 |