桃树中β-半乳糖苷酶基因cDNA克隆和表达分析
| 第一章 文献综述 | 第1-15页 |
| ·β-半乳糖苷酶的来源 | 第9-10页 |
| ·β-半乳糖苷酶的催化机理 | 第10页 |
| ·β-半乳糖苷酶的生产 | 第10-12页 |
| ·原生质体融合 | 第10-11页 |
| ·基因重组产酶菌株及酶的释放 | 第11页 |
| ·通过融合蛋白体系进行高纯度β-半乳糖苷酶的制备 | 第11页 |
| ·植物来源β-半乳糖苷酶的生产 | 第11-12页 |
| ·β-半乳糖苷酶的应用 | 第12-14页 |
| ·β-半乳糖苷酶在食品工业中的应用 | 第12-13页 |
| ·β-半乳糖苷酶在医学和生化分析中的应用 | 第13页 |
| ·促进果蔬成熟及软化 | 第13-14页 |
| ·β-半乳糖苷酶的国内外研究动态 | 第14-15页 |
| 第二章 引言 | 第15-17页 |
| ·研究目的和意义 | 第15页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第15-17页 |
| ·研究内容 | 第15-16页 |
| ·技术路线 | 第16-17页 |
| 第三章 材料与方法 | 第17-33页 |
| ·材料 | 第17页 |
| ·仪器与试剂 | 第17-18页 |
| ·主要仪器设备 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-33页 |
| ·RNA 提取和检测 | 第18-19页 |
| ·RT-PCR 扩增cDNA 特异片段 | 第19-23页 |
| ·cDNA 的3’/5’RACE 反应 | 第23-28页 |
| ·cDNA 全长的扩增 | 第28-29页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因cDNA 的原核表达 | 第29-33页 |
| 第四章 结果与分析 | 第33-43页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第33页 |
| ·RT-PCR 扩增及其产物的克隆与测序 | 第33-35页 |
| ·RT-PCR 扩增 | 第33-34页 |
| ·特异性片段的连接、转化和酶切鉴定 | 第34页 |
| ·RT-PCR 产物的测序 | 第34-35页 |
| ·3’/5’RACE 扩增 | 第35-38页 |
| ·3’RACE 扩增 | 第35-37页 |
| ·5’RACE 扩增 | 第37-38页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因全长序列的扩增 | 第38-40页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因cDNA 的原核表达 | 第40-42页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第40-41页 |
| ·细胞总蛋白分析 | 第41-42页 |
| ·酶活检测 | 第42-43页 |
| 第五章 讨论 | 第43-47页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第43页 |
| ·RT-PCR 扩增及其产物的克隆与测序 | 第43-44页 |
| ·RACE 反应 | 第44页 |
| ·RACE 产物的转化与克隆 | 第44-45页 |
| ·cDNA 全长的扩增 | 第45页 |
| ·蛋白表达和酶活检测 | 第45-47页 |
| 第六章 结论 | 第47-48页 |
| ·β-半乳糖苷酶基因cDNA 全长的克隆 | 第47页 |
| ·蛋白表达和酶活检测 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56页 |
