| 英文缩略词表 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 前言 | 第12-18页 |
| 第一章 野生革耳漆酶工程菌株的构建及产酶条件的研究 | 第18-39页 |
| 一 材料与方法 | 第18-28页 |
| 二 结果 | 第28-35页 |
| 1 重组质粒的构建及鉴定 | 第28-31页 |
| 2 重组转化子的构建及菌落PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 3 不同温度和不同铜离子浓度对漆酶活性的影响 | 第32-35页 |
| 三 讨论 | 第35-37页 |
| 参考文献 | 第37-39页 |
| 第二章 野生革耳漆酶在毕赤酵母中的表达纯化及部分酶学性质研究 | 第39-50页 |
| 一 材料与方法 | 第39-42页 |
| 二 结果 | 第42-47页 |
| 1 重组转化子(pPICZαA／lcc-X-33)和(pPICZαA／lccT-X-33)的诱导培养 | 第42-44页 |
| 2 重组漆酶LCCT的分离与纯化 | 第44-45页 |
| 3 漆酶的部分酶学性质 | 第45-47页 |
| 三 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| 第三章 野生革耳漆酶的定点突变及部分酶学性质研究 | 第50-63页 |
| 一 材料与方法 | 第50-54页 |
| 二 结果 | 第54-60页 |
| 1 重组质粒的构建及鉴定 | 第54-56页 |
| 2 转化子的构建及菌落PCR鉴定 | 第56页 |
| 3 转化子(pPICZαA／lccTM459-X-33)在摇瓶中的诱导培养 | 第56-57页 |
| 4 重组漆酶LCCTM459的分离与纯化 | 第57-58页 |
| 5 漆酶的部分酶学性质 | 第58-60页 |
| 三 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-63页 |
| 第四章 野生革耳漆酶基因的易错突变及高活性突变体的筛选和部分酶学性质研究 | 第63-79页 |
| 一 材料与方法 | 第63-69页 |
| 二 结果 | 第69-76页 |
| 1 用易错PCR(error-prone PCR)技术扩增出野生革耳漆酶基因lccTE | 第69页 |
| 2 重组质粒pPICZαA／lccTE构建和PmeI酶切线性化 | 第69页 |
| 3 线性化重组质粒pPICZαA／lccTE转化酵母宿主菌以及活性表达漆酶的转化子pPICZαA／lccTE-X-33的筛选 | 第69-71页 |
| 4 转化子pPICZαA／lccTE-X-33的诱导表达 | 第71页 |
| 5 转化子pPICZαA／lccTE-X-33的菌落PCR与重组质粒pPMD18T／lccTE的构建 | 第71-73页 |
| 6 lccTE基因的突变结果 | 第73页 |
| 7 重组漆酶LCCTE的分离与纯化 | 第73页 |
| 8 漆酶的部分酶学性质 | 第73-76页 |
| 三 讨论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-79页 |
| 第五章 野生革耳漆酶在大肠杆菌中的表达 | 第79-90页 |
| 一 材料与方法 | 第79-81页 |
| 二 结果 | 第81-88页 |
| 1 重组质粒pET-22b(+)／lccT的构建与酶切鉴定 | 第81-82页 |
| 2 转化子pET-22b(+)／lccT-Rosetta~(TM)的诱导和表达 | 第82-84页 |
| 3 胞质上清中的可溶性重组漆酶LCCT的孵育复性 | 第84页 |
| 4 不同温度条件下转化子pET-22b(+)／lccT-Rosetta~(TM)的诱导表达量 | 第84-85页 |
| 5 相同培养温度，不同孵育时间对重组漆酶复性的影响 | 第85-87页 |
| 6 一定孵育时间内，不同的培养温度对重组漆酶复性的影响 | 第87-88页 |
| 三 讨论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-90页 |
| 总结 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92-94页 |
| 文献综述 | 第94-103页 |
