中文摘要 | 第1-14页 |
Abstract | 第14-19页 |
第一章 文献综述 | 第19-45页 |
·棉花纤维发育的分子生物学研究进展 | 第19-32页 |
·棉花概述 | 第19-20页 |
·棉花的植物学分类 | 第19页 |
·棉花纤维的发育过程 | 第19-20页 |
·棉花纤维及其分子生物学研究的意义 | 第20页 |
·纤维发育相关基因的克隆和功能分析 | 第20-25页 |
·棉花纤维的基因表达分析 | 第21-22页 |
·棉花纤维特异或优势表达基因的克隆 | 第22-24页 |
·棉花纤维特异或优势表达基因的功能研究 | 第24-25页 |
·棉花纤维发育的分子生理学研究 | 第25-32页 |
·MYB基因与棉花纤维的分化起始 | 第25-27页 |
·棉花纤维伸长的分子机理 | 第27-29页 |
·棉花纤维次生壁合成的启动 | 第29页 |
·棉花纤维的纤维素合成 | 第29-32页 |
·植物激素在棉花纤维发育中的作用 | 第32-45页 |
·赤霉素的分子生物学研究进展 | 第33-44页 |
·植物赤霉素的代谢 | 第34-39页 |
·赤霉素的信号传导 | 第39-44页 |
·生长素生物合成酶基因与棉花纤维发育 | 第44-45页 |
第二章 引言 | 第45-48页 |
·论文的立论依据 | 第45-47页 |
·论文的技术路线 | 第47-48页 |
第三章 棉花GA 20-氧化酶基因的克隆及特征分析 | 第48-83页 |
·材料 | 第48-50页 |
·植物材料 | 第48页 |
·菌株和载体 | 第48页 |
·主要试剂 | 第48-49页 |
·主要仪器设备 | 第49页 |
·主要试剂和缓冲液配方 | 第49-50页 |
·方法 | 第50-56页 |
·RNA的提取 | 第50-51页 |
·DNA的提取 | 第51页 |
·EST序列的筛选和扩增 | 第51页 |
·相邻序列的YADE扩增 | 第51-53页 |
·cDNA序列的3′-RACE扩增 | 第53-54页 |
·基因组序列的扩增 | 第54页 |
·扩增产物的回收、克隆和序列测定 | 第54页 |
·序列分析 | 第54-55页 |
·RT-PCR分析 | 第55页 |
·Northern分析 | 第55-56页 |
·Southern分析 | 第56页 |
·结果与分析 | 第56-79页 |
·EST序列的筛选和扩增 | 第56-57页 |
·g20EST相邻上游序列的YADE扩增 | 第57-60页 |
·棉花GA 20-氧化酶cDNA基因的RACE扩增 | 第60-62页 |
·GhGA20ox2基因的基因组序列的扩增 | 第62-63页 |
·GhGA20ox1基因的基因组序列的扩增 | 第63-70页 |
·GhGA20ox1基因5′-上游序列的YADE扩增 | 第63-66页 |
·GhGA20ox1基因3′-下游序列的YADE扩增 | 第66-70页 |
·GhGA20ox1和GhGA20ox2的基因组序列的克隆 | 第70页 |
·棉花GA 20-氧化酶的氨基酸序列分析 | 第70-71页 |
·棉花GA 20-氧化酶的同源性分析 | 第71-75页 |
·棉花GA 20-氧化酶的同源蛋白查询 | 第71-73页 |
·棉花GA 20-氧化酶及其同源蛋白的进化树分析 | 第73页 |
·棉花GA 20-氧化酶及其同源蛋白的序列多重比较 | 第73-75页 |
·棉花GA 20-氧化酶基因的基因组结构分析 | 第75-76页 |
·棉花GA 20-氧化酶基因的表达分析 | 第76-79页 |
·讨论 | 第79-81页 |
·YADE方法的原理与应用 | 第79-80页 |
·基因表达分析的方法 | 第80-81页 |
·棉花GA 20-氧化酶基因家族 | 第81页 |
·小结 | 第81-83页 |
第四章 棉花GA 20-氧化基因的启动子克隆及表达特性分析 | 第83-100页 |
·材料 | 第83-85页 |
·植物材料 | 第83页 |
·菌株和载体 | 第83页 |
·主要试剂 | 第83页 |
·主要缓冲液和培养基配方 | 第83-85页 |
·方法 | 第85-88页 |
·棉花GA 20-氧化酶基因的启动子克隆和序列分析 | 第85页 |
·启动子表达载体构建 | 第85页 |
·根癌农杆菌菌株LBA4404感受态的制备及DNA转化 | 第85-86页 |
·质粒DNA的提取 | 第86页 |
·烟草遗传转化 | 第86-87页 |
·棉花遗传转化 | 第87页 |
·转化烟草的PCR鉴定 | 第87-88页 |
·转化植株的GUS表达特性分析 | 第88页 |
·结果与分析 | 第88-98页 |
·GhGA20ox1基因的启动子克隆 | 第88-89页 |
·GhGA20ox2基因的启动子克隆 | 第89-91页 |
·pGhGA20ox1和pGhGA20ox2的启动子序列分析 | 第91-92页 |
·启动子表达特性分析载体构建 | 第92-95页 |
·pGhGA20ox1的表达特性分析载体的构建 | 第92页 |
·pGhGA20ox2的表达特性分析载体的构建 | 第92-95页 |
·pGhGA20ox2在植物中的表达特性分析 | 第95-98页 |
·pGhGA20ox2在烟草中的表达特性 | 第95-97页 |
·pGhGA20ox2在棉花中的表达特性 | 第97-98页 |
·讨论 | 第98-99页 |
·小结 | 第99-100页 |
第五章 棉花GA 20-氧化酶基因在烟草中的超量表达 | 第100-114页 |
·材料 | 第100-101页 |
·植物材料 | 第100页 |
·菌株和载体 | 第100页 |
·主要试剂 | 第100页 |
·主要缓冲液和培养基配方 | 第100-101页 |
·主要仪器设备 | 第101页 |
·方法 | 第101-103页 |
·超量表达载体的构建 | 第101页 |
·烟草遗传转化及转化植株的鉴定 | 第101页 |
·转基因表达分析 | 第101-102页 |
·转基因烟草的性状变异分析 | 第102页 |
·赤霉素含量的ELISA测定 | 第102-103页 |
·激素的提取 | 第102页 |
·样品测定 | 第102-103页 |
·结果计算与分析 | 第103页 |
·结果与分析 | 第103-112页 |
·载体构建 | 第103-105页 |
·GhGA20ox1超量表达载体的构建 | 第103-105页 |
·GhGA20ox2超量表达载体的构建 | 第105页 |
·GhGA20ox1基因在本明烟中的超量表达 | 第105-110页 |
·本明烟的遗传转化 | 第105-107页 |
·超量表达GhGA20ox1基因的本明烟的性状变化 | 第107-109页 |
·超量表达GhGA20ox1基因对本明烟GA合成的影响 | 第109-110页 |
·GhGA20ox1和GhGA20ox2在普通烟草中的超量表达 | 第110-112页 |
·讨论 | 第112-113页 |
·小结 | 第113-114页 |
第六章 GhGA20ox1基因的棉花转基因功能分析 | 第114-134页 |
·材料 | 第114-115页 |
·植物材料 | 第114页 |
·菌株和载体 | 第114页 |
·主要试剂 | 第114页 |
·主要缓冲液配方 | 第114-115页 |
·主要仪器设备 | 第115页 |
·方法 | 第115-117页 |
·反义抑制载体的构建 | 第115页 |
·棉花遗传转化 | 第115页 |
·表达分析 | 第115-116页 |
·性状分析 | 第116页 |
·显微观察 | 第116-117页 |
·材料的固定、脱水和包埋 | 第116-117页 |
·切片、染色和观察 | 第117页 |
·扫描电镜观察 | 第117页 |
·结果与分析 | 第117-130页 |
·反义抑制载体构建 | 第117-118页 |
·棉花遗传转化 | 第118-120页 |
·转基因棉花的获得 | 第118-119页 |
·GA 20-氧化酶基因在转基因棉花叶片中的表达 | 第119-120页 |
·GhGA20ox1基因的超量表达和反义抑制对棉花生长的影响 | 第120-122页 |
·GhGA20ox1基因的超量表达和反义抑制对棉花花发育的影响 | 第122-125页 |
·转基因棉花的花形态和花发育时间变化 | 第122-125页 |
·转基因棉花的花药发育进程 | 第125页 |
·GhGA20ox1基因的超量表达和反义抑制对棉花果实和种子发育的影响 | 第125-126页 |
·GhGA20ox1基因的超量表达和反义抑制对棉花纤维的影响 | 第126-130页 |
·转基因棉花纤维性状的变化 | 第126-128页 |
·转基因棉花的纤维起始和早期伸长 | 第128-130页 |
·讨论 | 第130-133页 |
·GhGA20ox1的超量表达和反义抑制对棉花GA合成的影响 | 第130-131页 |
·GA在棉花发育中的作用 | 第131-133页 |
·GA对棉花开花结铃的影响 | 第131-132页 |
·GA对棉花花粉发育的影响 | 第132页 |
·GA对棉花纤维发育的影响 | 第132-133页 |
·小结 | 第133-134页 |
第七章 结论 | 第134-136页 |
·主要结论 | 第134-135页 |
·棉花GA20-氧化酶基因GhGA20ox1的克隆和功能分析 | 第134页 |
·棉花GA20-氧化酶同源基因GhGA20ox2的克隆和功能分析 | 第134页 |
·GA对棉花发育的影响 | 第134-135页 |
·启动子的克隆和功能分析 | 第135页 |
·论文的创新 | 第135-136页 |
·基因和启动子克隆 | 第135页 |
·棉花GA的内源调控 | 第135-136页 |
参考文献 | 第136-153页 |
致谢 | 第153-154页 |
附录1 缩略词表 | 第154-155页 |
附录2 学习期间在GenBank上登录的基因序列 | 第155-156页 |
附录3 学习期间主持、参加的主要项目和发表的文章 | 第156-158页 |
1.主持和参加的主要项目 | 第156页 |
2.攻读博士学位期间发表论文情况 | 第156-158页 |
3.攻读博士学位期间专利申请情况 | 第158页 |